[发明专利]一种唾液乳杆菌及其冻干制剂与应用

说明书

技术领域

本发明涉及微生物技术领域，特别涉及一株猪源唾液乳杆菌菌株及其冻干制剂与应用。

背景技术

动物肠道内存在着约30个属500多种微生物，相互依赖，相互竞争，共同维持着肠道的微生态平衡。但长期以来，抗生素作为饲料添加剂的大量使用，在抑制和杀灭病原菌的同时也抑杀了动物机体内正常共生的菌群，使肠道长期处于失衡状态，对动物的健康甚至人类的健康构成直接的威胁。因此，加速开发安全、优质、高效的绿色饲料添加剂已迫在眉睫。近年来的科学研究发现，在饲料中添加益生菌活菌制剂可以起到促进动物生长、抑制病原菌繁殖及提高机体免疫能力等功能，该类添加剂也越来越受到人们的关注。目前，美国食品药物管理局（FDA）和美国饲料控制官员协会（AAFCO）公布了可以直接饲喂的微生物菌种有43种，我国对饲用微生物的研究起步较晚，可饲用菌种较少，农业部1126号公告中公布的允许使用的菌种仅有16种，因此，研究开发新型的益生菌菌种有着广阔的应用前景。

研究表明，同源性菌群对宿主的益生作用优于异源菌群（Timmerman等，2006），即理想的菌株应该来自同种动物的消化道，同时，作为益生菌菌株还必须具有生长速度快，产酸能力强以及较强的耐胃酸、耐肠胆盐等特性，这样才能保证益生菌能够以足够活菌含量到达动物肠道后并快速生长繁殖，净化肠道环境，真正发挥其益生作用。依据上述筛选原则，本发明分离得到一株性能优良的乳酸杆菌-唾液乳杆菌，目前，国内关于唾液乳杆菌的研究主要集中于人类发酵食品方面，而作为动物饲用方面的报道较少，本发明对该菌进行了分离筛选、增殖培养、冻干工艺制备及动物应用试验等系统的研究，从而验证了其高效性和实用性，并为益生菌菌种的开发和推广应用奠定基础。

发明内容

本发明提供一株乳杆菌，该乳杆菌生长、产酸、耐酸耐胆盐等性能优良，并提供适合该菌株的冻干保护剂配方从而制备得到冻干制剂，使其能够应用于实际动物饲料中，并充分发挥其优良益生菌作用。

一种唾液乳杆菌（Lactobacillus salivarius）菌株，名称为唾液乳杆菌Lactobacillus salivarius ZLS006，其保藏号为：CGMCC No.5761。

本发明还提供一种唾液乳杆菌冻干制剂，其特征在于采用所述的唾液乳杆菌Lactobacillus salivarius ZLS006菌株，其保藏号为：CGMCC No.5761。

所述唾液乳杆菌活菌数为3.5×10⁹cfu/g。

本发明还提供了所述唾液乳杆菌冻干制剂的制备方法，包括如下步骤：

将唾液乳杆菌菌种进行发酵培养，得到发酵液，将所述发酵液离心分离菌体，得到菌泥，向所述菌泥中加入冻干保护剂，混匀、冻干，即得到所述唾液乳杆菌冻干制剂。

所述发酵培养的培养基由如下质量百分比的物质组成：以MRS培养基为基础，其中蛋白胨0.6~1.2%，酵母浸粉0.3~0.6%，牛肉膏0.6~1.2%，葡萄糖1.6~2.2%。

所述发酵培养的培养基优选为由如下质量百分比的物质组成：以MRS培养基为基础，其中蛋白胨1.0%，酵母浸粉0.6%，牛肉膏1.2%，葡萄糖1.6%。

所述发酵培养的接种量为1%～3％，发酵温度为37℃，发酵时间为20～24h。

所述发酵培养的发酵罐的装液量为50％，培养转速为100r/min，pH6.5，罐压维持在0.05MPa；发酵结束后，采用管式离心机19000rpm连续离心，收取菌泥，加入冻干保护剂，冻干保护剂体积与离心前发酵液体积相等，混匀，置于冻干机中冻干23h，收取冻干粉。

所述冻干保护剂由如下重量百分比的物质组成：12%脱脂乳，5%糊精，2%聚乙烯吡咯烷酮，4%乳糖，0.1%谷氨酸钠，0.1%半胱氨酸，0.3%乙酸钠，其余为水。

所述唾液乳杆菌的冻干制剂在动物饲料添加剂中的应用也属于本发明的保护范围。其中

动物包括但不限于猪、牛、羊、鸡等动物，其优选猪。

本发明还提供一种唾液乳杆菌（Lactobacillus salivarius）冻干保护剂，由如下重量百分比的物质组成：12~16%脱脂乳，5~10%糊精，2~4%聚乙烯吡咯烷酮，4~6%乳糖，0.1~0.5%谷氨酸钠，0.1~0.5%半胱氨酸，0.3~0.8%乙酸钠，其余为水。