[发明专利]利用海洋红树林内生真菌生产抗癌蒽醌类化合物的培养基及制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及微生物学领域；更具体地，涉及利用海洋红树林内生真菌生产抗癌蒽醌类化合物的培养基及制备方法。 

背景技术

21世纪是一个海洋大开发的时代，越来越多的沿海国家把开发海洋资源的能力作为当前评估国家综合实力的砝码。独特的海洋环境造就了各种各样的生态系统，被誉为“海上森林”的红树林就是其中之一。红树林生长在热带、亚热带海岸的潮间带，其生活环境具有强还原性、强酸性、高含盐量和营养丰富等特点。红树林具有丰富的真菌资源，目前已分离鉴定的红树林真菌超过200种，海洋真菌可以产生众多种类的天然活性化合物。 

海洋红树林内生真菌No.1403属于层出镰刀菌(Fusarium proliferatum)，盐生坚座壳种(Halorosellinia sp.)，由香港城市大学L.L.P.Vrijmoed教授从红树林树叶内部分离得到。红树林内生真菌No.1403经液体或固体发酵可产生20多种代谢物，包括蒽醌类(Anthraquinone)、萘醌类(Naphthoquinone)和咕吨酮类(Xanthone)等天然物质。1403C是其产生的一种蒽醌类次级代谢物，1403C也叫做SZ-685C，1403C纯品为红色颗粒状结晶，1403C及其乙酰化产物具有显著的抗肿瘤活性，通过Akt/FOXO途径诱导癌细胞凋亡，是一种具有较好前景的抗癌候选药物。 

然而，1403C在初始环境下的得率相当低，目前已经成为制约1403C用于临床前研究的瓶颈。因此通过优化其培养环境、改善其发酵工艺已成为当务之急。培养基是微生物生长的基质，本领域迫切需要借助各种优化手段，寻求利用海洋红树林内生真菌No.1403高效生产抗癌蒽醌类化合物1403C的培养基。 

发明内容

本发明的目的在于提供利用海洋红树林内生真菌生产抗癌蒽醌类化合物 的培养基。 

本发明的另一目的在于提供利用海洋红树林内生真菌生产抗癌蒽醌类化合物的方法。 

在本发明的第一方面，提供一种发酵培养基，所述培养基含有： 

(1)葡萄糖            7-20g/L； 

(2)蛋白胨            0.5-2g/L； 

(3)牛肉浸膏          2-8g/L； 

(4)一水硫酸锰        0.1-0.5g/L； 

(1)-(4)的组分溶于10-60％(v/v)浓度的人工海水中。 

在一个优选例中，所述培养基含有： 

(1)葡萄糖            9-15g/L； 

(2)蛋白胨            0.9-1.6g/L； 

(3)牛肉浸膏          3-7g/L； 

(4)一水硫酸锰        0.2-0.4g/L。 

在另一优选例中，所述的培养基含有： 

(1)葡萄糖            11-13g/L； 

(2)蛋白胨            0.95-1.2g/L； 

(3)牛肉浸膏          5.5-6.5g/L； 

(4)一水硫酸锰        0.2-0.3g/L。 

在另一优选例中，所述的培养基含有： 

(1)葡萄糖            12.36g/L； 

(2)蛋白胨            1.05g/L； 

(3)牛肉浸膏          6.08g/L； 

(4)一水硫酸锰        0.246g/L。 

在另一优选例中，所述的培养基中，(1)-(4)的组分溶于30-50％(v/v)浓度的人工海水中；更佳地，(1)-(4)的组分溶于40％(v/v)浓度的人工海水中。 

在另一优选例中，所述的人工海水含有： 

(a)氯化钠            15-25g/L； 

(b)无水硫酸钠        3-7g/L； 

(c)无水氯化钙        1-2g/L； 

(d)六水氯化镁        4-8g/L； 

(e)硼酸              0.02-0.04g/L； 

(f)溴化钾            0.06-0.1g/L； 

(g)碳酸氢钠          0.1-0.2g/L； 

(a)-(g)的组分溶于水(较佳地为去离子水)中。 

在另一优选例中，所述的人工海水含有：