[发明专利]一种阿奇霉素缓释滴眼液中阿奇霉素的含量测定方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种阿奇霉素缓释滴眼液中阿奇霉素的含量测定，特别是以药用辅料聚卡波菲(PolycarbopHil)为缓释基质的阿奇霉素缓释滴眼液的中阿奇霉素的含量测定方法。

背景技术

阿奇霉素为15元环大环内酯类抗生素，抗菌谱广，除了对大部分细菌有抗菌作用外，对衣原体、支原体也有较好的活性。作用机制与红霉素相同，主要与细菌核糖体的50S亚单位结合，抑制依赖于RNA的蛋白合成。临床广泛用于化脓性链球菌引起的急性咽炎、急性扁桃体炎；敏感细菌引起的鼻窦炎、中耳炎、急性支气管炎、慢性支气管炎急性发作；肺炎链球菌、流感嗜血杆菌以及肺炎支原体所致的肺炎；沙眼衣原体及非多种耐药淋病奈瑟菌所致的尿道炎和宫颈炎；敏感细菌引起的皮肤软组织感染。

美国FDA于2007.4.27批准Inspire医药公司的1％阿奇霉素滴眼液(商品名)上市，用于治疗细菌性结膜炎。该制剂采用缓释药物传输技术DuraSite，可加强抗生素停留在组织表面的时间，从而达到每天用药1次的缓释效果，目前市售1％阿奇霉素滴眼液的缓释基质为药用辅料聚卡波菲。

聚卡波菲属聚丙烯酸类高分子的一种，是丙烯酸与丁二烯乙二醇共聚得到的一种轻度交联的网状高分子聚合物。分子量大于10⁶，分子结构式：

聚卡波菲为白色粉末状固体，不溶于水，亦不溶于强酸强碱。1％水分散体的pH值为3.5-4.0。聚卡波菲具有吸水膨胀性，每克吸水量可达62g(USP24)；其溶胀性受pH值的影响，酸性条件下，能够吸收自身重量10倍的水分，在pH值4以上溶胀率显著增加；中性条件下，可吸收自身重量70倍的水分。聚卡波菲的溶胀性还受离子强度的影响，随着离子强度的增加溶胀率降低，二价金属离子能够改变这种溶胀平衡，但有钠离子存在时，影响较小。

由于阿奇霉素缓释滴眼液中含有上述的高分子聚合物辅料，且不能直接滤除，因此不能直接进入色谱柱进行高效液相色谱法测定药物含量。现有技术人员对样品处理方法进行了多项研究，处理方法包括：(1)增强离子强度法：依据聚卡波菲的结构特性，试图通过改变离子强度来使聚卡波菲变性从而达到去除的目的，但去除聚卡波菲的同时，主药也被大量沉淀，回收率极低，无法满足测定要求；(2)透析法：将阿奇霉素缓释滴眼液装入透析袋中，置适量溶质中透析，无法将主药全部透出，回收率低，无法满足测定要求；(3)萃取法：采用三氯甲烷、乙酸乙酯、乙醚等有机溶剂萃取主药，结果是主药被降解，无法采用；(4)超滤法：将阿奇霉素缓释滴眼液适当稀释，通过超滤膜，同样是回收率低，无法满足测定要求。因此，现有的样品处理方法均不能准确检测阿奇霉素缓释滴眼液中阿奇霉素的含量。

发明内容

针对现有技术的上述缺陷，发明人提供一种以聚卡波菲为缓释介质的阿奇霉素滴眼液中阿奇霉素含量测定方法。

本发明的技术方案如下：

一种阿奇霉素缓释滴眼液中阿奇霉素含量的测定方法，包括如下步骤：

(1)采用有机溶剂与缓冲液按体积比(40～90)∶(60～20)配制流动相，所述有机溶剂为甲醇、乙醇或乙腈之一或组合，所述缓冲液为磷酸盐缓冲液，磷酸盐缓冲液浓度为0.01mol/L-0.04mol/L；流动相的pH值为5-10；

(2)用步骤(1)配制的流动相分别溶解阿奇霉素滴眼液样品和对照品，所述流动相与样品的体积比为(5～10)∶1；所述流动相与对照品的体积比为(5～10)∶1)；

所述样品是以聚卡波菲为缓释基质的阿奇霉素缓释滴眼液；

所述对照品是阿奇霉素标准品；

(3)按照高效液相色谱法测定阿奇霉素的含量，设置流动相流速为1.0ml/min，检测波长为210nm；将步骤(2)配制的样品溶液、对照品溶液过滤后分别进样，记录色谱图。

根据本发明优选的，所用高效液相色谱仪的色谱柱为Xterra MS C185μm 150mm×4.6mm色谱柱，色谱柱柱温为室温，进样体积为20μl。

根据本发明优选的，流动相的pH值调节剂为磷酸。

根据本发明优选的，所述流动相中有机溶剂与缓冲液的体积比为(50～80)∶(50～20)，进一步优选为(60～70)∶(40～30)。采用该配比可以保证阿奇霉素缓释滴眼液中的聚卡波非缓释基质的最大化沉淀，同时对阿奇霉素主药无影响，可以使阿奇霉素的回收率达到99％以上。

根据本发明优选的，所述流动相的pH值为6-8，进一步优选pH值为8。本发明人意外发现在pH偏碱性的情况下，主药稳定性好、回收率高，因此将其作为流动相的必须条件之一。