[发明专利]一株用于碱性果胶酶生产的工程菌及其应用有效
| 申请号： | 201210064448.0 | 申请日： | 2012-03-13 |
| 公开（公告）号： | CN102586158A | 公开（公告）日： | 2012-07-18 |
| 发明（设计）人： | 宋江宁;李小曼;王辉林;马延和 | 申请（专利权）人： | 天津工业生物技术研究所 |
| 主分类号： | C12N1/20 | 分类号： | C12N1/20;C12N9/26;C12P19/14;C12R1/19 |
| 代理公司： | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人： | 关畅 |
| 地址： | 300308 天津*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 用于 碱性 果胶酶 生产 工程 及其 应用 | ||
1.大肠埃希氏菌(Escherichia coli)BL21(DE3)PGL04，它的保藏编号为CGMCC No.5697。
2.权利要求1所述大肠埃希氏菌BL21(DE3)PGL04在生产碱性果胶酶中的应用。
3.一种生产碱性果胶酶的方法，包括如下步骤：
(1)将权利要求1所述大肠埃希氏菌BL21(DE3)PGL04接种至发酵培养基，得到OD600nm＝0.1-0.2的发酵初始体系；
(2)将发酵初始体系进行如下发酵：先35-37℃振荡培养3-5小时，然后加入IPTG至终浓度为50-100μM，25-30℃继续振荡培养40-48小时，得到碱性果胶酶。
4.如权利要求3所述的方法，其特征在于：所述发酵培养基制备方法如下：取10-15g胰蛋白胨、15-23g酵母提取物、5-10g氯化钠、10-15g甘油、10-17mM磷酸二氢钾和65-75mM磷酸氢二钾，用水溶解并定容至1L。
5.如权利要求3或4所述的方法，其特征在于：所述大肠埃希氏菌BL21(DE3)PGL04以种子液的方式接种至所述发酵培养基。
6.如权利要求5所述的方法，其特征在于：所述种子液的制备方法如下：将所述大肠埃希氏菌BL21(DE3)PGL04接种至种子培养基，35-37℃振荡培养至OD600nm＝3-6，即为种子液。
7.如权利要求6所述的方法，其特征在于：所述种子培养基的制备方法如下：取10-15g胰蛋白胨、5-8g酵母提取物和5-10g氯化钠，用水溶解并定容至1L。
8.权利要求3至7中任一所述方法生产得到的碱性果胶酶。
9.权利要求8所述碱性果胶酶在降解多聚半乳糖醛酸中的应用。
10.权利要求8所述碱性果胶酶在以多聚半乳糖醛酸为底物生产不饱和多聚半乳糖醛酸中的应用。
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