[发明专利]一株高产多糖的菌株及利用该菌株发酵生产多糖的方法

权利要求书

1.一株高产多糖的菌株，该菌株为胶质芽孢杆菌，又名硅酸盐细菌（Bacillus mucilaginosus）SM-01，该菌于2012年2月16日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.5766。

2. 一种利用胶质芽孢杆菌SM-01生产微生物多糖的方法，其特征为按以下步骤生产：

（1） 斜面种子培养：采用保藏号为CGMCC No.5766的胶质芽孢杆菌（Bacillus mucilaginosus）SM-01为生产菌株，按照常规方法进行活化培养得到种子液，将该种子液涂布到无氮固体培养基上；

（2） 摇瓶种子培养：挑取步骤（1）中固体培养基上的SM-01菌株一环，接种于已灭菌的装有40-80 mL种子培养基的500 mL锥形瓶中，培养温度为28-32℃，置摇床上以150-200 r/min的转速培养20-32 h至对数生长期，即得到SM-01菌株的细胞液体培养物；

（3） 发酵罐培养：将步骤（2）中制备好的细胞液体培养物以4-8%w/w的接种量接入发酵培养基，装液量为500 mL锥形瓶中装40-80 mL发酵培养基，培养温度为28-32℃，在150-200 r/min的转速下培养60-84 h，得多糖发酵液；

（4） 多糖的分离提取：取步骤（3）所得发酵液按体积稀释2-4倍，将稀释后的发酵液于冷冻离心机8000-12000rpm，4℃离心20-40min去除菌体，取上清液于旋转蒸发仪浓缩至原体积，加2-4倍体积95%乙醇并不断搅拌，4℃静置12-24h，4000-6000rpm，4℃,离心10-20min得到沉淀，将沉淀用适量乙醇抽提3次，用等体积去离子水复溶沉淀，多糖溶液置4℃透析过夜，加入2-4倍体积95%乙醇不断搅拌，4℃放置24h，4000-6000rpm，4℃离心10-20min得沉淀，将沉淀于真空干燥机烘干或复溶后冷冻干燥得多糖；

其中步骤（1）中所述的固体培养基的成分及配比为（g/L）：蔗糖5-15；尿素0.1-1；K₂HPO₄ 0.2-2；MgSO₄·7H₂O 0.2-2；NaCl 0.2-2；CaCO₃ 1-5；琼脂粉10-20，pH 7.0-7.5，121℃高压蒸汽灭菌20min；步骤（2）所述种子培养基的成分及配比为（g/L）：蔗糖5-15；尿素0.1-1；K₂HPO₄ 0.2-2；MgSO₄·7H₂O 0.2-2；NaCl 0.2-2；CaCO₃3-8，121℃高压蒸汽灭菌20min；步骤（3）所述发酵培养基的成分及配比同步骤（2）。