[发明专利]一种乙酰甲喹人工抗原及其制备的抗体

说明书

技术领域

本发明涉及一种乙酰甲喹人工抗原及其制备的抗体。

背景技术

喹噁啉类化合物是一类分子中均有喹噁啉-1，4-二氧化物母核结构人工合成的抗菌药，主要成员有喹乙醇(olaquindox，OLA)、卡巴氧(cabadox，CBX)、乙酰甲喹(mequindox，MEQ)和喹烯酮(quinocetone，QCT)等。由于能够抑制多种革兰氏阳性菌和阴性菌，并且对畜、禽、鱼类等具有明显的促生长作用，喹噁啉类化合物被广泛作为饲料添加剂应用。

随着研究的深入，发现喹噁啉类化合物有明显的毒副作用，卡巴氧具有遗传毒性和致癌嫌疑，喹乙醇有强的蓄积毒性和致突变性，因此国际上有关喹噁啉类化合物的最高残留限量也有着非常严格的规定，我国出台了相应法规来规范化喹噁啉类化合物的使用。我国禁止将卡巴氧作为饲料添加剂，喹乙醇只能用于仔猪的药物饲料添加剂、严禁用于养禽生产。另外，国内外学者的研究及生产实践表明乙酰甲喹毒性偏大、也不适于用作禽药物饲料添加剂，喹烯酮虽然防病做生长效果好、无毒副作用，但是一种基因毒剂和生殖诱变剂，有致突变、致畸和致癌性。

目前，对于饲料中喹噁啉类化合物残留的检测方法研究较少。因此建立一个灵敏、快速、操作简单，适合大量样本筛查的喹噁啉类化合物检测方法是具有重要的经济意义和社会意义。

发明内容

本发明的目的是提供一种乙酰甲喹人工抗原及其制备的抗体。

本发明提供了一种化合物，即式(I)所示化合物。式(I)所示化合物为将乙酰甲喹进行结构改造得到的化合物，既最大程度保留了乙酰甲喹的特征结构，又具有可以与载体蛋白发生偶联的活性基团。

本发明还保护式(I)所示化合物的制备方法，包括如下步骤：将乙酰甲喹和羧甲基羟胺反应，获得所述化合物。所述反应具体可在无水丙酮与N，N-二甲基甲酰胺的混合溶剂(无水丙酮与N，N-二甲基甲酰胺的体积比具体可为1∶1)中进行。所述乙酰甲喹和所述羧甲基羟胺的摩尔比具体可为1∶1.5。

本发明还保护一种乙酰甲喹人工抗原，为将式(I)所示化合物与载体蛋白偶联得到的偶联物。所述载体蛋白为牛血清白蛋白或卵清白蛋白。式(I)所示化合物与载体蛋白的偶联比具体可为(8-10)∶1。所述偶联比指的是摩尔比。式(I)所示化合物与所述载体蛋白具体可通过活性酯法偶联。所述乙酰甲喹人工抗原如式(II)所示。所述乙酰甲喹人工抗原可以作为免疫原也可以作为包被原。将所述乙酰甲喹人工抗原免疫动物，可获得高特异性的单克隆抗体和多克隆抗体，方法简便、易行。将所述乙酰甲喹人工抗原包被酶标板，也可以用于喹噁啉类化合物抗血清的检测。包被原与免疫原结构上的差异可以进一步提高检测的灵敏度和特异性。

式(I)。

式(II)。

所述乙酰甲喹人工抗原可用于制备喹噁啉类化合物特异性抗体；所述喹噁啉类化合物为乙酰甲喹、卡巴氧、喹乙醇或喹烯酮。所述抗体可为单克隆抗体或多克隆抗体。

以所述乙酰甲喹人工抗原为免疫原制备得到的抗体也属于本发明的保护范围。所述抗体可为单克隆抗体或多克隆抗体。所述单克隆抗体具体可为抗乙酰甲喹单克隆抗体杂交瘤细胞1A10分泌的单克隆抗体。

本发明还保护一种杂交瘤细胞，命名为抗乙酰甲喹单克隆抗体杂交瘤细胞1A10，简称杂交瘤细胞1A10，已于2012年2月15日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC，地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号)，保藏号为CGMCC No.5780。

所述杂交瘤细胞1A10分泌的单克隆抗体也属于本发明的保护范围。

所述所述乙酰甲喹人工抗原可用于检测喹噁啉类化合物。

所述抗体(单克隆抗体或多克隆抗体)可用于检测喹噁啉类化合物。

以上任一所述喹噁啉类化合物为分子中具有喹噁啉-1，4-二氧化物母核结构的化合物。以上任一所述喹噁啉类化合物为乙酰甲喹、卡巴氧、喹乙醇或喹烯酮。

本发明对于喹噁啉类化合物的检测具有重大价值。

附图说明

图1为乙酰甲喹的人工抗原紫外光谱图。

图2为采用乙酰甲喹制作的标准曲线图。

具体实施方式