[发明专利]一种牙科种植体及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及牙科种植体材料，特别涉及一种载有miRNA或siRNA的牙科种植体及其制备方法。

背景技术

随着种植技术发展，牙科种植体已广泛应用于临床的牙列缺损及缺失病人的修复。但是，种植体植入后，骨结合时间久。一般来说，种植体植入3-6个月之后才可负载修复，尤其是一些特殊病人，如糖尿病、骨质疏松病人等，实行种植更加困难，勉强种植常导致失败病例的出现。这极大地困扰着病人及牙科医生。

如今，为了提高骨结合速率，缩短骨结合时间，已有多种种植体表面形貌出现并应用于临床，主要是采用微弧氧化(MicroarcOxidation，MAO)、钛浆喷涂或喷砂酸蚀等技术以改善种植体表面形貌。微弧氧化作为一种比较成熟的种植体表面处理技术已在临床广泛应用，其种植体表面具有多孔结构，可以提高骨结合速率。

此外，为了提高骨结合速率，现在已有多种促成骨分化因子成功加载到种植体表面的科研报道，主要有骨形成蛋白(BMP)、转化生长因子-β(TGF-β)、胰岛素样生长因子(IGF-1)。其一种加载方法是将PDLLA(poly(D，L-lactide)、聚内消旋乳酸)与TGF-β、IGF-1蛋白混合形成微球，并包裹在纯钛丝表面，常温干燥后，冰箱内-20℃保存。另一种方法，就是将种植体基体浸没于生物因子BMP与磷酸钙的混合溶液48h，待干燥后于-80℃保存。上述方法中的微球直径约为30-100μm，完全覆盖牙科种植体原有形貌，并且加载完成后需要在-20℃或-80℃保存才能保证其活性；另外上述步骤繁琐，首先需要采用多步骤制备PDLA、PDLLA等，然后才能与BMP等蛋白混合后加载，加载时间至少48小时。

发明内容

本发明的一个目的在于提供一种牙科种植体，该牙科种植体为具有微纳米形貌的微弧氧化涂层，又加载有高效促成骨分化因子，可以更加快速地提高骨结合速率，缩短骨结合时间。

本发明的另一个目的在于提供上述牙科种植体的制备方法。

为了达到上述目的，本发明采用以下技术方案予以实现。

一种牙科种植体，其特征在于，所述牙科种植体的外表面为具有微纳米形貌的微弧氧化涂层，所述微弧氧化涂层加载有促成骨分化因子，所述促成骨分化因子为miRNA或siRNA。

上述牙科种植体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1，选用纯钛或者钛合金加工成种植体基体，再将种植体基体表面抛光后，依次用丙酮、无水乙醇和去离子水超声清洗，然后吹干；

步骤2，采用微弧氧化工艺在种植体基体外表面制备具有微纳米形貌的微弧氧化涂层，再依次用丙酮、无水乙醇和去离子水超声清洗，然后吹干；

步骤3，将脂质体与miRNA或siRNA混合成载体混合物；

步骤4，将种植体基体浸没于载体混合物中，干冰冷冻；

步骤5，采用真空冻干工艺将载体混合物加载到微弧氧化涂层，常温放置，获得载有miRNA或siRNA的牙科种植体。

上述技术方案中，优选地，步骤1采用纯钛种植基体。

优选地，步骤2所述的微弧氧化工艺中，微弧氧化电解液溶质由0.04M β-甘油磷酸钠和0.2M醋酸钙配制，溶剂为去离子水，电源频率100Hz，电压为300至450V，占空比20％，处理时间4-6min。

优选地，步骤3中，所述载体混合物中miRNA或siRNA浓度为0.3-0.5μM；步骤3中，所述脂质体为脂质类转染试剂之一，包括商品化的Lipofectamine2000、Oligofectamine或TransIT-TKO。

优选地，步骤4中所述干冰冷冻时间为3-8min；更优选地，步骤4中干冰冷冻时间为5min。

优选地，步骤5所述真空冻干工艺中，真空室中压力值等于或低于1Pa，温度为-20℃至-30℃，冻干时间大于等于24h。

随着RNA的发现及其功能的研究。RNA干涉(RNAi)作为一种强大的实验工具，发展迅速；其利用具有同源性的RNA作用于目标基因的信使RNA(mRNA)诱导序列特异的目标基因沉默，迅速阻断目标基因活性，并成为基因分析和潜在临床治疗的有效工具。其中，小干扰RNA(small interfering RNA；siRNA)和微RNA(microRNA；miRNA)是两种序列特异性的转录后基因表达的调节因子。