[发明专利]一种金银花叶提取物作为抗猪繁殖与呼吸综合征病毒剂的用途

说明书

【技术领域】

本发明属于生物医药技术领域，更具体地，本发明涉及一种金银花叶提取物作为抗猪繁殖与呼吸综合征病毒剂的用途。

【背景技术】

猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus，PRRSV)是猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome，PRRS)的病原体，属于动脉炎病毒科动脉炎病毒属成员。它是有囊膜、二十面体对称的单股RNA病毒。猪繁殖与呼吸综合征是近年发现的一种新的动物病毒性传染病，临床上以母猪的繁殖障碍及各种年龄猪的呼吸系统疾病和高死亡率为特征。

金银花(Lon icera japonica Thunb)为忍冬科植物，其干燥花蕾或带初开的花入药。味甘性寒，具有清热解毒、凉散风热之功效，主治痈肿、喉痹、丹毒、热毒血痢、风热感冒、温病发热等症，应用历史悠久。CN200810054995公开了一种金银花叶药用提取物。其提取方法是取金银花叶，切段或粉碎，按质量份加蒸馏水煮提，过滤，合并滤液，滤液浓缩，用盐酸调pH，离心，其上清液上大孔吸附树脂柱吸附，乙醇洗脱，回收乙醇，干燥，得到金银花叶药用提取物。该方法提取的金银花叶药用提取物辅以药剂学接受的辅料可以制成临床可使用的多种剂型，如片剂、胶囊剂等剂型。CN200810111737公开了一种治疗腹泻、肠炎的金银花叶有效部位药物组合物。该发明将金银花叶经提取、富集纯化，制成药组合物，从而使金银花叶得到充分利用。CN201110058959公开了一种从金银花叶中提取活性成分的方法，该方法包括鲜金银花叶预处理、超临界CO₂萃取、超声波强化浸提、浓缩上清液、最后制得活性成分等步骤。该方法提取金银花叶片中的活性成分，大大提高其应用价值，得到的产品可应用于制药、保健品等诸多领域。

但是，目前还没有将金银花叶提取物作为抗猪繁殖与呼吸综合征病毒剂的任何报道，也没有相关的专利申请。

因此，本发明人在研究工作中发现金银花叶提取物在抗猪繁殖与呼吸综合征方面具有非常重要的作用，于是本发明人经过大量实验研究，终于完成了本发明。

【发明内容】

[要解决的技术问题]

本发明的目的是提供一种金银花叶提取物作为抗猪繁殖与呼吸综合征病毒剂的用途。

[技术方案]

本发明是通过下述技术方案实现的。

本发明涉及一种金银花叶提取物作为抗猪繁殖与呼吸综合征病毒剂的用途。

根据本发明的一种优选实施方式，所述的金银花叶提取物使PRRSVmRNA含量降低1000倍以上。

根据本发明的另一种优选实施方式，所述的金银花叶提取物使PRRSV病毒滴度从10^5.8TCID₅₀降低至10^0.3TCID₅₀。

根据本发明的另一种优选实施方式，所述的金银花叶提取物对PRRSV感染细胞的最小保护浓度是6.25μg/mL。

根据本发明，所述的金银花叶提取物是采用下述制备方法得到的。

该制备方法的步骤如下：

称取金银花叶在温度40-60℃下烘干1.0-2.0h后，按照所述金银花叶以g计重量与所述乙醇水溶液以ml计体积之比1∶100-400，使用以体积计60-85％乙醇水溶液在温度40-80℃与常压的条件下加热回流提取2-5次，分离得到的提取液合并；

合并的提取液经过滤后进行浓缩与干燥得到一种黑色浸膏；

将所述的黑色浸膏与蒸馏水按照重量比1∶5充分混匀得到一种溶液，然后让这种溶液通过大孔离子交换树脂柱进行吸附，再顺序地用水与乙醇水溶液进行梯度洗脱，取以体积计55-65％乙醇水溶液洗脱液进行浓缩，然后真空冷冻干燥，得到所述的金银花叶提取物。

根据本发明的另一种优选实施方式，合并的提取液在温度40-60℃与0.1-0.5MPa的条件下进行浓缩下进行浓缩直至干燥。

根据本发明的另一种优选实施方式，所述的大孔离子交换树脂选自AB-8大孔吸附树脂。

根据本发明的另一种优选实施方式，水洗脱时水的使用量是大孔离子交换树脂柱体积的2-4倍。

根据本发明的另一种优选实施方式，在乙醇水溶液梯度洗脱时，乙醇水溶液浓度分别是以体积计25-35％、55-65％与85-95％，而它们的使用量分别是大孔离子交换树脂柱体积的1-2、3-4与2-3倍。