[发明专利]新型可降解聚合物为载体的抗乳腺癌Her2疫苗

权利要求书

1.一种新型的抗乳腺癌Her2多肽疫苗的研制方法，其特征包括将HER2/neu 342-350多肽和E75多肽等抗原肽囊缩到聚乳酸-羟基乙酸共聚物形成的纳米颗粒中，形成大小约500纳米到2微米之间的纳米疫苗，这样的疫苗能高效的被抗原递呈细胞(包括巨噬细胞和树突状细胞)摄取，从而显著提高her2抗原肽的免疫原性，该疫苗的研制方法为：①通过固相方法合成HER2/neu 342-350多肽和E75多肽，具体固相合成步骤是氯甲基聚苯乙烯树脂作为不溶性的固相载体，首先将一个氨基被封闭基团Fmoc-保护的氨基酸共价连接在固相载体上，20％pipe的作用下，脱掉氨基的保护基，这样第一个氨基酸就接到了固相载体上了，DIEA提供一个碱性的反应环境，HBTu作为缩合剂，将第二个氨基酸再与已接在固相载体的第一个氨基酸的氨基反应形成肽键，这样在固相载体上就生成了一个带有保护基的二肽，重复上述肽键形成反应，使肽链从C端向N端生长，直至达到所需要的肽链长度，脱去保护基Fmoc-，水解肽链和固相载体之间的酯键，就得到了合成好的肽；②多肽在可降解聚合物纳米颗粒中的囊缩，取0.6ml含多肽的水溶液(10mg/ml in PBS)，加入到4ml PLGA的二氯甲烷溶液中(15mg PLGA/ml二氯甲烷)，用探头式的超声波破碎仪超声乳化40秒，乳化过程中用冰浴冷却，然后将此乳浊液加入到60ml含聚乙烯醇的水溶液中(2.5wt％PVA的水溶液)，超声乳化2分钟，然后搅拌过夜，让有机溶剂挥发干净，3000g低速离心25分钟去掉大颗粒，然后21000g超速离心25分钟收集产物，洗三次，冻干得到纳米疫苗。

2.根据权利要求1所述的PLGA肽囊的抗乳腺癌纳米疫苗的制备方法，其特征在于：将Her2多肽囊缩到可降解聚合物PLGA中，制成粒径在500纳米到2微米之间的纳米疫苗，可显著提高抗原肽的免疫原性。

3.根据权利要求1所述的PLGA肽囊的抗乳腺癌纳米疫苗的制备方法，其特征在于：所使用的Her2蛋白上的抗原肽包括HER2/neu 342-350多肽和E75多肽。

4.根据权利要求1所述的PLGA肽囊的抗乳腺癌纳米疫苗的制备方法，其特征在于：Her2抗原肽纳米疫苗制备过程中，将合成好的Her2抗原肽通过双乳化的方式囊缩到可降解的聚合物PLGA中。