[发明专利]一种制备脂肪烷烃及其中间体烯烃的方法

说明书

技术领域

本发明涉及生物技术领域。具体地，本发明涉及烃类化合物的制备方法。更具体地，本发明涉及一种微生物、一种适于转化微生物的系统、一种制备重组微生物的方法、一种生产烃类化合物的方法、一种烃类化合物、以及一种制备生物燃料的系统。

背景技术

第一代生物柴油，主要以动植物油脂为原料油，通过化学法或酶法催化的酯交换工艺来制备。这种生产方式的不足在于生产原料短缺、甲醇的使用以及甘油副产物的去除等问题。目前，在工业上用于制备生物柴油的主要油脂原料(如大豆油、菜籽油等)同时也是人类生活的必需品，而大量种植油料作物又受到耕地不足、粮食供应不足、天气地理环境不适等多方面限制。

第二代生物柴油，则是近年来随着合成生物学和代谢工程的迅速发展，通过选择合适的微生物并利用各种生物技术改造其代谢合成途径(如脂肪酸合成途径、异戊二烯合成途径等)而获得的。研究人员能利用微生物直接生产性能更加优越、品质更高的新型第二代生物柴油——长链烷烃。但是第二代生物柴油的生产仍然受到微生物自身代谢途径的限制，得到的产物产量低、副产物多。

目前利用生物方法生产燃料的方法，仍有待改进。

发明内容

本发明旨在解决现有技术的问题之一。为此，根据本发明的一个方面，本发明提出了一种微生物，其特征在于，包括第一核酸序列，其中，所述第一核酸序列编码聚酮合酶基因sgcE或其功能等同体。利用根据本发明实施例的微生物，能够有效地生产烃类化合物。

根据本发明的实施例，上述微生物还可以具有下列附加技术特征：

根据本发明的一个实施例，进一步包括第二核酸序列，其中，所述第二核酸序列编码硫酯酶基因sgcE10或其功能等同体。

根据本发明的一个实施例，进一步包括第三核酸序列，其中，所述第三核酸序列编码乙酰辅酶A羧化酶基因或其功能等同体。

根据本发明的一个实施例，所述乙酰辅酶A羧化酶基因为选自accA、accB、accC和accD的至少一种。

根据本发明的一个实施例，进一步包括第四核酸序列，其中，所述第四核酸序列编码烯醇还原酶基因mupE、fabI或其功能等同体。

根据本发明的一个实施例，所述微生物为选自真核微生物和原核微生物的至少一种。

根据本发明的一个实施例，所述微生物为选自细菌、真菌、放线菌、螺旋体、支原体、衣原体、立克次体、病毒和酵母的至少一种。

根据本发明的一个实施例，所述微生物为大肠杆菌。

根据本发明的第二方面，本发明还提出了一种适于转化微生物的系统。根据本发明的实施例，该适于转化微生物的系统包括第一核酸序列，其中，所述第一核酸序列编码聚酮合酶基因sgcE或其功能等同体。利用该系统，能够转化微生物，从而得到前述的微生物，进而可以有效地生产烃类化合物。

根据本发明的实施例，上述适于转化微生物的系统还可以具有下列附加技术特征：

根据本发明的一个实施例，进一步包括第二核酸序列，其中，所述第二核酸序列编码硫酯酶基因sgcE10或其功能等同体。

根据本发明的一个实施例，所述第一核酸序列与所述第一核酸序列被设置于不同的载体上。

根据本发明的一个实施例，进一步包括第三核酸序列，其中，所述第三核酸序列编码乙酰辅酶A羧化酶基因或其功能等同体。

根据本发明的一个实施例，所述乙酰辅酶A羧化酶基因为选自accA、accB、accC和accD的至少一种。

根据本发明的一个实施例，所述第一、第二和第三核酸序列被设置在相互不同的载体上。

根据本发明的一个实施例，进一步包括第四核酸序列，其中，所述第四核酸序列编码烯醇还原酶基因mupE、fabI或其功能等同体。

根据本发明的一个实施例，所述第一、第二、第三和第四核酸序列被设置在相互不同的载体上。

根据本发明的一个实施例，进一步包括IPTG-诱导型启动子，其中，所述第一、第二、第三或第四核酸序列的至少之一被设置在所述IPTG-诱导型启动子的控制之下。

根据本发明的一个实施例，所述IPTG-诱导型启动子为选自T7启动子、tac启动子和lac启动子的至少一种。

根据本发明的一个实施例，所述微生物为选自真核微生物和原核微生物的至少一种。

根据本发明的一个实施例，所述微生物为选自细菌、真菌、放线菌、螺旋体、支原体、衣原体、立克次体、病毒和酵母的至少一种。