[发明专利]用于早期胃癌诊断/预警的化合物指纹图谱模型及建立

说明书

技术领域

本发明涉及一种用于早期胃癌诊断/预警的化合物指纹图谱模型及建立方法，为胃癌的早期预警提供帮助。

背景技术

胃癌的发生率在我国恶性肿瘤中居第2位，病死率居第1位。且近年来青年患者比例在逐年增加。目前临床上主要基于X线钡餐法，纤维胃镜内窥(包括超声内窥)、组织病理学检查、血清肿瘤标记物等一种或多种技术相结合的方法来检测胃癌。上述方法患者在检查过程中接受的辐射和所服用的药剂带来一定副作用，且适用对象局限性大。而且这些方法是基于肿瘤尺寸诊断胃癌，对于早期或者微小胃癌的确证率不高。往往在癌症晚期才得以确诊，使得患者的治疗和预后为时已晚。如何确诊早期胃癌是一个挑战性的医学难题。事实证明，细胞代谢产物中含有许多疾病标志物，而挥发性细胞代谢物中含有大量从未发现、可以作为癌症标志物的产物。细胞由于癌变，发生生理生化状况的异常改变，产生一些易挥发代谢物，例如，细胞在癌变过程中氧化应激增强，导致氧自由基的活动增强，从而引起细胞膜表面多不饱和脂肪酸氧化为为易挥发的烷烃类、醛类等化合物。因此，建立胃癌细胞挥发性代谢产物指纹图谱，可能对早期胃癌的发现、确诊具有一定医学价值。

质谱技术由于其较高的检测灵敏度近年来被广泛用于癌细胞挥发性代谢产物检测。固相微萃取是一种绿色，无需溶剂，方便快捷的样品富集浓缩技术，原理是依据物质的极性差异，选择不同纳米材料的固相吸附涂层，对于一定体系中某一类挥发性有机目标物实现选择性吸附、浓缩。目前广泛使用的是Supelco公司生产的萃取头。然而，上述技术是基于良好的样品来源基础上。如果细胞挥发性代谢物在进行固相微萃取之前，没有得到较好的保留，就会导致一些潜在的癌症标志物被遗漏，主要原因包括：1、癌细胞代谢产物中挥发性物质的浓度较低，含量通常在痕量甚至超痕量级；2、癌细胞代谢产物是一个依赖时间的动态过程，大部分挥发性标志物是细胞中间代谢产物，因而细胞培养时间对标志物筛选极其重要；3、固相微萃取条件会直接影响检测结果。

中国专利ZL200410053327.1，该专利提供了一种可用于诊断肝癌的蛋白质指纹图谱模型，用蛋白质芯片飞行时间质谱系统，检测正常人及肝癌、肝硬化、慢性肝炎患者的外周血清样品，找出与肝癌患者差异显著的特异蛋白质峰，根据各蛋白质峰的质荷比m/z及与其相对应的蛋白质波峰强度系数A，得到蛋白质指纹图谱，包括肝癌与肝硬化、肝癌与慢性肝炎、肝癌患者与正常人及肝癌与非肝癌鉴别的蛋白质指纹图谱。只要将被测人血清中相应蛋白质的m/z及其A值与本发明指纹图谱逐一对比分析，就可初步用于肝癌诊断。

检索中，尚未见与胃癌细胞代谢产物中痕量挥发性有机物的检测密切相关的报道，也未见用于早期胃癌诊断和预警的指纹图谱模型。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种用于早期胃癌诊断/预警的化合物指纹图谱模型，可用于早期胃癌的筛选和预警，为早期胃癌的筛查提供新的科学依据。

本发明所要解决的另一技术问题是提供上述用于早期胃癌诊断/预警的化合物指纹图谱模型的建立方法。

为实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

本发明所述的用于早期胃癌诊断/预警的化合物指纹图谱模型，是采用气质联用仪分离和检测胃癌细胞代谢产物中痕量挥发性有机化合物4-异丙氧基丁醇，壬醛，4-丁氧基正丁醇的质量体积浓度，并将这些物质的质量体积浓度与正常胃粘膜细胞的质量体积浓度进行比对统计，根据比对结果绘制而成，所述模型中4-异丙氧基丁醇、壬醛以及4-丁氧基正丁醇质量体积浓度之比为：4-异丙氧基丁醇[胃癌细胞]/[正常胃粘膜细胞]≤0.31，壬醛[胃癌细胞]/[正常胃粘膜细胞]≤0.36，4-丁氧基正丁醇[胃癌细胞]/[正常胃粘膜细胞]≤0.40，所述模型中的物质浓度是以正常胃粘膜细胞中这些物质的质量体积浓度为100％作为参考值。

本发明上述的用于早期胃癌诊断/预警的化合物指纹图谱模型，将被测细胞代谢产物中挥发性有机物中4-异丙氧基丁醇(Peak5)、壬醛(peak6)以及4-丁氧基正丁醇(peak9)的浓度，与本发明指纹图谱模型进行比对分析，则可初步用于提示早期胃癌。

进一步的，所述用于早期胃癌诊断/预警的化合物指纹图谱模型，其中挥发性有机代谢产物中存在特征峰：3-辛酮(peak2)，2-丁酮(peak8)。所谓的特征峰是相对于正常细胞而言，胃癌细胞中存在，但是正常细胞中不存在(为0)，所以，只要质谱能检测到该物质，则可以进一步补充和加强早期胃癌的预警效果。