[发明专利]一种脂肽生物表面活性剂的工业化制备方法

权利要求书

1.一种脂肽生物表面活性剂的工业化制备方法，其特征在于：该脂肽生物表面活性剂是由枯草芽孢杆菌ACCC01430经发酵培养制得，其具体步骤如下：

A、将斜面固体枯草芽孢杆菌ACCC01430菌种接入摇瓶培养，摇瓶中每500ml培养基接入1环菌种,温度为35±2℃、120转/分震荡培养12～16小时，得到摇瓶菌种； 

B、一级发酵培养：将A步骤制得的摇瓶菌种转接入装有培养基的一级发酵罐中，摇瓶菌种与培养基的体积比为1：19～20,在温度为35±2℃、pH6～7.5、通风比1: 0.3～0.5及搅拌速度为100～150转/分的条件下发酵培养10～14小时，得到一级发酵菌种；

C、二级发酵培养：将B步骤制得的一级发酵菌种转接入装有培养基的二级发酵罐中，一级发酵菌种与培养基的体积比为1:10，在温度为35±2℃、pH 6～7.5、通风比1: 0.3～0.5及搅拌速度为100～110转/分的条件下发酵培养10～14小时，得到二级发酵菌种；

D、发酵培养：将C步骤制得的二级发酵菌种转接入装有培养基的三级发酵罐中，二级发酵菌种与培养基的体积比为1：10，在温度为35±2℃、pH 6～7.5、通风比1: 0.3～0.5、搅拌速度为80～100转/分，在菌体处于衰落期进行补料，发酵培养24～26小时，得到脂肽生物表面活性剂。

2.根据权利要求1所述的一种脂肽生物表面活性剂的工业化制备方法，其特征在于：摇瓶及各级发酵罐培养基配方是：米糠油2～5%、尿素0.2～1.5%、糖蜜10～15%、KCl 0.05～1.0%、KH₂PO₄  0.05～1.2%、K₂HPO₄ 0.05～1.5%、酵母膏0.005～0.1%、复合微量元素0.005～0.01%，余量为水，pH为6.0 -7.5；

所述的复合微量元素为硫酸锌1.1 g/L、氧化锡 1.3 g/L、氯化锰 1.0 g/L、 硫酸铜 1.0 g/L、氧化钴 1.0g/L及溶剂水复配而成。

3.根据权利要求1所述的一种脂肽生物表面活性剂的工业化制备方法，其特征在于：步骤D中所述的补料是米糠油，每次补料量按发酵液总体积量的3%～5%补加。

4.根据权利要求1或2或3所述的一种脂肽生物表面活性剂的工业化制备方法，其特征在于：各级发酵罐的装料系数是60～80%。