[发明专利]一种微量,快速和精确检测人红细胞抗原和血清中抗体的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种利用免疫血液学原理快速、准确地检测人红细胞血型抗原和血清中存在的抗体的方法，具体地说是一种微量，快速和精确检测人红细胞抗原和血清中抗体的方法。

背景技术

在1901年Kaul Landsteiner证明，当人群之间相互输血时，由于红细胞的血型不同可以引起被输血者有发烧，黄疸，他因此把血型分成A，B，和O型，而且在实际应用中也说明在血型之间相符的人群间输血是不会有输血反应的。1902年A.Decastrello和A.Sturli发现了AB血型。1940年由Levine和Stetson发现了Rh血型，这是根据红细胞膜是否存在这种抗原而把血型分为Rh阳性(也称为D+)为含有这种抗原，Rh阴性(也称为D-)为不含有这种抗原。现在已经清楚，98％以上的中国人为Rh阳性，而白种人仅有70％为Rh阳性。

检测红细胞膜表面的抗原和血清中的抗体来自于血液免疫学的发展，随着科学家可以分离这种抗体和抗原，并利用这些抗体和抗原去检测相应红细胞膜表面的抗原和血清中的抗体，从而现已明确在A型红细胞抗原的人都有B型抗体在血浆里，B型红细胞抗原的人都有A型抗体在血浆里，而O型红细胞抗原的人都有A，B型抗体在血浆里，AB型红细胞抗原的人都无A，B，抗体存在血浆里。

在1950年Watkins and Morgan(Nature 180：1038-1040，1957)首先分析了红细胞膜的抗原结构并纯化了许多抗原，发现了红细胞膜表面含有更多的抗原系统，同时，利用这些已知的抗原也检测出在血浆中存在着更多的抗体，而在1980年以后单克隆抗体的发明更进一步的加速了红细胞抗原的发现和发展。许多红细胞抗原的单克隆抗体的发现和生产，促进了更多抗原的发现也加速了这些抗原和抗体在临床上的应用。

市场上可利用的单克隆或多克隆抗体大都用来测定红细胞的表面抗原，像A，B和D，而常用的方法就是红细胞凝聚实验。即红细胞抗原和相应，已知的抗体结合后会产生红细胞聚集反应，这种方法称为正向红细胞配型，而采用相应，已知的红细胞抗原和未知的抗体结合后产生红细胞聚集反应，这种方法称为反向红细胞配型，为了更精确的配型，临床上都同时采用这二种方法去检测红细胞血型。

在常规的红细胞配型实验中，待检测红细胞和已知抗体，或待检测血清和已知红细胞抗原，分别在玻璃片，试管，凝胶，检查板混合，通常用于对A，B，O红细胞抗原的测定，而对D型抗原则采用oomb’s方法，即在待检测红细胞和抗D抗原抗体混合以后，还需加抗人免疫球蛋白抗体，然后才会出现凝结反应，这也称为间接红细胞凝结实验。

在1980年后兴起的单克隆抗体技术，加速了这些抗原的鉴定和发展，由于这些抗体的精确反应以及来源稳定，现在已经替代了大部分在临床上应用的多克隆抗体，但其价格上也比多克隆抗体为贵。应用玻璃片的方法简单，快速，但消耗试剂多而且不是很精确；消耗时间，效率低下；试管方法精确，但费时，费试剂，效率低，结果不能保存；凝胶方法精确，结果能保存，但费时，费试剂，效率低；检查板方法结果能保存，快速，可以方便自动化操作，效率高但费试剂，结果不能保存，操作麻烦，无直观性而且有时会出现误差，而需人工复查。

发明内容

本发明的目的及所要解决的技术问题是提供一种微量，快速和精确检测人红细胞抗原和血清中抗体的方法。该方法指明了检测人红细胞抗原和血清中抗体的保存反应结果及供以后复查的途径，并指出了在提高和保证了血液制品的安全应用的前提下制备成各种各样的红细胞配型微量板提供给临床应用的途径。

为此，本发明解决所述问题的技术方案是：一种微量，快速和精确检测人体红细胞抗原和血清中抗体的方法，包括如下步骤：选微型配型板步骤，其板型为30，60，72或其它孔微型配型板，用以测定红细胞抗原和血清抗体；