[发明专利]一种制备恒河猴局灶性脑缺血模型的方法

说明书

技术领域

本发明涉及恒河猴局灶性脑缺血模型的方法。

背景技术

脑卒中是严重危害人类生命健康的疾病，是目前导致人类死亡的第二大病因，也是成年人致残的一个主要原因。世界范围内大约2/3的卒中发生在发展中国家。在我国，由于人口基数大，人口老龄化问题日益突出，卒中发病率逐年增加。卒中存活者中50％遗留严重残疾，10％的患者需要长期专人护理，再加上昂贵的治疗费用，给社会和家庭带来沉重的负担。最常见的卒中类型是缺血性脑卒中，约占所有卒中的80％。多年来人们一直致力于缺血性卒中的脑损伤机制以及治疗措施的研究。但迄今为止，缺血性脑损伤机制尚未完全探明，现有治疗的效果亦不尽人意，除卒中单元、抗血小板药物(如阿司匹林)和3小时内t-PA静脉溶栓治疗有肯定疗效以外，其他治疗均无可靠证据说明其疗效。因此，进一步探明缺血性脑损伤机制，探索其他有效安全的治疗措施是亟待解决的问题。

无论是脑损伤机制的研究还是新治疗措施的探索，都离不开脑缺血动物模型。理想的脑缺血动物模型应该具备接近临床、可重复性好、操作简便以及避免产生附带效应干扰实验结果等特征。

有文献报道局灶性脑缺血模型的建立方法，多是采用大鼠、家兔建模，如：肖育华，局灶性脑缺血模型的建立，《中国比较医学杂志》，2008年18卷10期，方法随机将26只新西兰兔分成对照组与缺血组，利用三氯化铁溶液刺激实验组兔大脑中动脉，在缺血24h处死，测定脑组织H₂O、Na⁺、K⁺、Ca²⁺含量，并测定脑梗死范围，观察模型建立的效果。李金国，等，线栓法制备大鼠局灶性脑缺血模型的研究，《泰山医学院学报》，2008年4期，采用线栓法制备局灶性脑缺血大鼠模型，采用的动物有鼠种和种系制作脑缺血模型选用的实验动物有：小鼠、大鼠、蒙古沙土鼠、猫、狗、猪、羊以及灵长类动物猕猴等，其中最为常用的是大鼠，使用率超过90％。王晓云，兔大脑中动脉局灶性脑缺血模型制作和正电子发射断层显像观察，《中国脑血管病杂志》，2007年4卷1期，线栓法制作兔大脑中动脉局灶性脑缺血模型的最适线栓头端直径，并采用正电子发射断层显像技术(PET)检查缺血脑组织葡萄糖代谢水平的变化。

非人灵长目动物在种属上与人类十分接近，其脑血管和脑组织对缺血的反应类似于人类。用其构建的脑缺血模型最有可能模拟出人类缺血性脑损伤的疾病过程。因此，这类动物可能是目前制作脑缺血模型的最佳选择。其中，以大脑中动脉(middle cerebral artery，MCA)缺血再灌注模型最为重要。既往的研究通过外科手术暴露MCA然后微血管夹闭、气囊充气压迫等方式阻塞MCA，但术后并发症较多，限制了该模型的应用；近年来，随着血管内介入诊疗技术的快速发展，该技术也被用于各种实验研究，目前已有采用血管内介入法构建的局灶性脑缺血猴模型，但均存在梗死位置不恒定，模型建立后梗死灶大小和瘫痪症状变化较大等不足，很难将该模型用于药物效果的评估。

发明内容

本发明的技术方案是提供了一种制备恒河猴局灶性脑缺血模型的方法。

本发明提供了一种制备恒河猴局灶性脑缺血模型的方法，它采用弹簧圈栓塞构建动物模型。

具体地，它包括如下步骤：

a、动物麻醉：将恒河猴进行药物麻醉；

b、脑缺血再灌注模型的建立：采用Seldinger技术行经皮股动脉穿刺；成功后以4F造影导管行主动脉弓上血管和脑血管造影了解颅内动脉走形情况；造影结束后，导管尾端接Y型带阀接头，其侧臂带三通软连接管并与加压输液袋相连，持续滴入生理盐水以防血栓形成；选择走形平直的一侧大脑中动脉，将微导管引至MCA M1段中远端后释放出弹簧圈，完全阻断一侧大脑中动脉中远端血流，之后退出支撑导丝；栓塞1h后，撤出弹簧圈，再次行超选择造影，证实MCA血流恢复，然后拔出微导管、动脉血管鞘，股动脉区局部压迫20min。

其中，b步骤是在DSA直视下进行血管内介入操作。

本发明还提供了一种筛选治疗局灶性脑缺血的药物的方法，它包括如下步骤：

a、采用权利要求1-3的方法制备恒河猴局灶性脑缺血模型；

b、将候选药物一起施用于恒河猴；

c、观察候选药物抑制恒河猴局灶性脑缺血模型的情况，并进行评分，评价潜在的治疗局灶性脑缺血的药物。