本发明公开了4型和6型猪细小病毒双重荧光定量PCR检测的引物和探针组及试剂盒，所述引物和探针组由PPV6的上游引物PPV6‑F、下游引物PPV6‑R和探针PPV6‑P以及PPV4的上游引物PPV4‑F、下游引物PPV4‑R和探针PPV4‑P组成，所述PPV6‑F、PPV6‑R、PPV6‑P、PPV4‑F、PPV4‑R、PPV4‑P的核苷酸序列分别如SEQ ID NO:1~SEQ ID NO:6所示。
本发明公开了一种猪细小病毒7型SYBR Green I荧光定量PCR检测方法，包括如下步骤：S1、制备特异性引物；根据Gen Bank登录的PPV7(Gen Bank:KU563733.1)Cap基因核苷酸序列，设计用于PPV7的特异性引物(F1、R1)；PPV7特异性引物上游引物F1：PPV7‑F1(5'‑GCGACCAGTCGAAAGTCTTC‑3')，PPV7特异性引物下游引物R1：PPV7‑R1(5'169bp；S2、重组质粒标准品制备并提取DNA；本发明为建立一种能够快速、特异、敏感、简便、特异性好的检测猪细小病毒7型的SYBR Green I荧光定量PCR方法，本发明根据Gen Bank登录的PPV7(Gen Bank:KU563733.1)Cap基因核苷酸序列，设计一对用于PPV7的特异性引物，扩增169bp的PPV7衣壳蛋白基因，构建重组质粒，以其作为标准品建立了SYBR Green I荧光定量
本发明公开了PPV7荧光定量PCR检测的引物和探针及试剂盒。所述PPV7‑F、PPV7‑R、PPV7‑P的核苷酸序列分别如SEQ ID NO:1~3所示。本发明所建立的方法与PRV、TGEV、PEDV、PRoV、JEV、PPV1型、PRRSV及CSFV等病毒核酸均无交叉反应，具有良好的特异性，组间变异系数小于2%，重复性和稳定性良好。本方法可在1h内完成PPV7的检测，并能同时进行大批量的样本检测，可以实现对猪细小病毒7型快速检测。
