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[发明专利]一种快速鉴定转基因拟南芥阳性植株的方法-CN202010609570.6在审
发明人：闫志强;王晓雪;邓茹月;朱诉讼;尹燕斌;夏忠敏;宫彦龙;王忠妮 -专利权人：贵州省水稻研究所
申请日： 2020-06-29 - 公布日： 2020-11-06 - 主分类号： G01N21/64 文献下载
摘要：本发明公开了一种快速鉴定转基因拟南芥阳性植株的方法，所述方法包括将荧光蛋白基因和目标基因片段插入到双元载体中，随后转化农杆菌；用经转化的农杆菌转化拟南芥，收获拟南芥种子；将收获的种子播种在筛选培养基上，以筛选转基因拟南芥阳性植株；出苗后，观察拟南芥阳性植株的植物部位，如果检测到荧光信号，则可以确定该植株为转基因阳性植株，如果未检测到荧光信号，则该植株是假阳性植株。
一种快速鉴定转基因拟南芥阳性植株方法

[发明专利]一种渗透液与一种根癌农杆菌介导的草莓快速简易稳定遗传转化方法-CN201811480483.4在审
发明人：王静;赵密珍;庞夫花;豆伟涛 -专利权人：江苏省农业科学院
申请日： 2018-12-05 - 公布日： 2019-03-26 - 主分类号： C12N15/84 文献下载
摘要：将渗透液与单克隆菌体混合调混合液的OD₆₀₀值为0.6～1.2，对草莓未开的花蕾侵染，从开花到T₁代阳性植株，仅6个月，对比例从取叶片到开花结果得T₁代阳性植株至少14个月，本发明缩短8个月。本发明的转化方法中包括浸花后的草莓种子的荧光检测、幼苗抗生素筛选及幼苗荧光检测阳性植株，对T₁代植株催芽，长出胚芽的种子检测荧光初步判断阳性种子，再置于抗生素溶液浸湿的滤纸上生长，具有叶柄的小三叶植株时，再通过叶片颜色判断阳性植株，后通过荧光验证阳性植株。
阳性植株渗透液草莓根癌农杆菌介导稳定遗传荧光检测植株荧光幼苗转化简易胚芽叶柄抗生素溶液抗生素筛选植物生物学浸湿草莓种子单克隆菌叶片颜色种子检测花蕾混合液催芽滤纸侵染叶片开花验证生长

[发明专利]一种快速有效地降低花生遗传转化植株假阳性率的筛选方法-CN201410268640.0有效
发明人：彭振英;毕玉平;万书波;边斐;王兴军;李新国;单雷;郑玲 -专利权人：山东省农业科学院生物技术研究中心
申请日： 2014-06-16 - 公布日： 2017-01-11 - 主分类号： C12N15/84 文献下载
摘要：本发明涉及一种快速有效地降低花生遗传转化植株假阳性率的筛选方法，步骤如下：(1)制被待转化菌液；(2)制备转化后下胚轴；(3)初步筛选植株芽；(4)中度筛选植株芽；(5)深度筛选植株芽；(6)将深度筛选植株芽经培养后，制得转化植株。通过采用本发明所述的依次增加筛选压力的筛选方式，可以在丛生芽诱导的初始阶段除去大部分没有转化成功的丛生芽，以后每次继代培养都可去掉部分变白的假阳性植株，不仅节约了时间、大大降低了后期的工作量，而且能够保证最后得到的绿色植株绝大部分都是真正的阳性植株
一种快速有效地降低花生遗传转化植株阳性筛选方法

[发明专利]利用植株幼苗进行遗传转化的方法-CN201610976170.2有效
发明人：孔佑涵;李卫东;苑平;李先信;吴娟娟;易春;谢新华;张平;杨辉学 -专利权人：湖南省园艺研究所
申请日： 2016-11-07 - 公布日： 2019-12-03 - 主分类号： C12N15/84 文献下载
摘要：本发明公开了一种利用植株幼苗进行遗传转化的方法，包括：将幼苗植株于上胚轴处切断，保留幼苗植株上胚轴至根部部分作为遗传转化材料，其中，该幼苗植株的茎粗达到1mm或以上。本发明操作过程简单；使用的培养基简单、节约资源；获得阳性转化子的工作周期短；获得的阳性转化子易于保存。
利用植株幼苗进行遗传转化方法

[发明专利]基因EcAAT在控制水稻谷粒品质中的用途-CN200810197030.0无效
发明人：练兴明;张启发;周莹 -专利权人：华中农业大学
申请日： 2008-09-19 - 公布日： 2009-03-18 - 主分类号： C12N15/54 文献下载
摘要：再进行遗传转化，在水稻品种中，超量表达，在转基因T2代植株中发现，阳性植株种子中的氨基酸水平和蛋白质含量都显著高于阴性植株。发现转基因阳性植株的种子中的氨基酸总含量为113.72mg/g，比其对应的阴性植株的含量提高了5.4％；转基因阳性植株的种子中的蛋白质含量为71.00mg/g，比其对应的阴性植株的含量提高了11.1％。
基因 ecaat 控制水稻谷粒品质中的用途

[发明专利]一种以肉质花梗为外植体的西兰花高效遗传转化方法-CN202210311643.2有效
发明人：虞慧芳;顾宏辉;盛小光;王建升;沈钰森;赵振卿 -专利权人：浙江省农业科学院
申请日： 2022-03-28 - 公布日： 2023-09-05 - 主分类号： C12N15/84 文献下载
摘要：肉质花梗外植体的选取；(2)外植体的灭菌：将所述肉质花梗清洗并灭菌；(3)外植体的预培养；(4)外植体的浸染；(5)外植体与菌液共培养；(6)外植体延迟培养：(7)外植体筛选培养；(8)抗性芽的生根培养；(9)再生植株的阳性检测：通过PCR和GUS染色双重检测均为阳性的植株，为西兰花遗传转化阳性苗。本发明的方法，肉质花梗能在较短时间内再生出芽，遗传转化植株阳性率为22～25％，转化所需时间短，转化结果稳定，试验可重复性高。
一种肉质花梗外植体兰花高效遗传转化方法

[发明专利]一种植物基因编辑中的重组载体以及利用其筛除假阳性愈伤组织的方法和应用-CN202210869040.4在审
发明人：张建铎;王晋;杨光宇;邢佳鑫;孔维松;邓乐乐;杨文武;许力;蒋佳芮;高茜;向海英;曾婉俐;李雪梅 -专利权人：云南中烟工业有限责任公司
申请日： 2022-07-22 - 公布日： 2023-04-04 - 主分类号： C12N15/82 文献下载
摘要：本发明公开了一种植物基因编辑中的重组载体以及利用其筛除假阳性愈伤组织的方法和应用。该重组载体可筛除假阳性愈伤组织，重组载体中包含Rose1基因元件，是将一个AtUbi10驱动，NOS终止的含有Rose1基因元件的ARS表达框加入到T‑DNA中，与基因编辑其他元件形成一个连锁的重组载体采用本发明的方案进行植物基因编辑技术创制突变体时，在抗性愈伤组织阶段通过肉眼可辨的深紫色即可判定愈伤组织是否为假阳性。假阳性愈伤组织的筛除减少了假阳性植株的出现，降低了后期对假阳性植株的栽培、检测等步骤的投入，使有效发生基因编辑植株出现的概率也进一步提高。
一种植物基因编辑中的重组载体以及利用筛除阳性组织方法应用

[发明专利]一种可筛除假阳性愈伤组织的植物基因编辑重组载体及应用-CN202210871881.9在审
发明人：张建铎;邢佳鑫;王晋;杨光宇;孔维松;邓乐乐;杨文武;许力;蒋佳芮;高茜;向海英;曾婉俐;李雪梅 -专利权人：云南中烟工业有限责任公司
申请日： 2022-07-22 - 公布日： 2023-03-28 - 主分类号： C12N15/29 文献下载
摘要：本发明公开了一种可筛除假阳性愈伤组织的植物基因编辑重组载体及应用。该重组载体可筛除假阳性愈伤组织及转化株，重组载体中包含NtAN2基因元件，是将一个NtU4M启动子驱动，35S终止的含有NtAN2基因元件的表达框加入到T‑DNA中，与基因编辑其他元件形成一个连锁的重组载体采用本发明的方案进行植物基因编辑技术创制突变体时，在抗性愈伤组织阶段通过肉眼可辨的红色即可判定愈伤组织是否为转基因假阳性。假阳性愈伤组织的筛除减少了假阳性植株的出现，降低了后期对假阳性植株的栽培、检测等步骤的投入，使有效发生基因编辑植株出现的概率也进一步提高。
一种筛除阳性组织植物基因编辑重组载体应用

[发明专利]一种促进植物生长的方法-CN201310445072.2有效
发明人：贾桂芳;何川;段洪超 -专利权人：北京大学
申请日： 2013-09-26 - 公布日： 2020-12-01 - 主分类号： C12N15/84 文献下载
摘要：本发明涉及一种促进植物生长的方法，其包含步骤：构建含有FTO或者其它同源去甲基蛋白酶基因的植物表达载体；植物表达载体转化受体菌；受体菌转化到目标植物中；培养所述目标植物，收集并培养T0代种子，从其幼苗中筛选阳性植株；培养筛选的阳性植株，待幼苗长大后收集T1代种子；培养T1代种子，从其幼苗中筛选阳性植株；培养筛选的阳性植株，待幼苗长大后收集T2代种子；培养T2代种子，从其幼苗中筛选纯合株系；将T2代纯合株系植株的T1
一种促进植物生长方法

[发明专利]一种农杆菌介导的水稻活体转基因方法-CN201010560948.4无效
发明人：李绍清;田裴秀子;朱英国 -专利权人：武汉大学
申请日： 2010-11-25 - 公布日： 2011-05-18 - 主分类号： C12N15/82 文献下载
摘要：本发明公开了一种农杆菌介导的水稻活体转基因方法，其步骤：A、幼穗转化处理：利用分光光度计测定农杆菌浓度后，将农杆菌溶液用液体LB培养基稀释；B、转基因阳性苗的除草剂筛选：除草剂进行转基因阳性水稻的筛选，筛选时，将pCAMBIA3301-ubi转化处理所获得的种子催芽后，播种于营养钵中；C、转基因阳性株的检测PCR鉴定：筛选出的转基因水稻为阳性植株；D、转基因阳性株的GUS检测：取对照9311和转基因阳性植株的新鲜叶片直接浸泡在溶液中处理，GUS基因在转基因植株的叶片中表达，叶片被染色成深蓝色；转基因水稻中外源基因正常表达，证明其为阳性。
一种杆菌水稻活体转基因方法

[发明专利]提高转基因丹参中阳性率的方法-CN201610957098.9在审
发明人：朱育盼 -专利权人：朱育盼
申请日： 2016-10-27 - 公布日： 2017-03-15 - 主分类号： C12N15/82 文献下载
摘要：本发明涉及一种提高转基因丹参中阳性率的方法，应用根癌农杆菌介导的叶盘转化法操作简便、重复性高、能快速、有效获得转基因丹参植株。目前丹参植株遗传转化体系多采用卡那霉素进行筛选，但本实验室在对已经完成测序工作的99‑3品系的丹参进行遗传转化研究中发现99‑3丹参叶片对卡那霉素敏感，用它做筛选抗生素时叶片生长容易停止，实验重现性差。本方法采用50mg/L Hyg进行筛选时，不仅获得了阳性转基因植株，而且阳性率极高，接近100％。上述方法建立了一种以丹参叶片作为外植体，通过根癌农杆菌的遗传转化法将携带外源质粒转入丹参外植体中的高效可靠、简便的丹参植株提高阳性率的方法。
提高转基因丹参阳性方法

[发明专利]一种将基因ZmNAC77应用于玉米中增强根系生长的方法-CN202210403278.8在审
发明人：李慧;姜宇航;朱建堂;何文兴 -专利权人：济南大学
申请日： 2022-04-18 - 公布日： 2022-07-29 - 主分类号： C12N15/82 文献下载
摘要：（2）将所述重组载体导入大肠杆菌中，提取质粒后将其转入农杆菌中得重组农杆菌，然后将所述重组农杆菌转化至玉米植株中，收集其成熟的玉米种子。（3）将所述玉米种子播种后筛选出阳性转基因植株，获得独立转化事件的玉米苗后再次进行繁种，并进行阳性纯系转基因株系筛选。（4）测定该阳性纯系转基因株系中的ZmNAC77表达量，选择目标植株。本发明培育出了能够在玉米中过表达ZmNAC77基因的阳性纯系转基因株系，其根系更长，植株更强壮，也更易生存，有效提高了玉米产量。
一种基因 zmnac77 应用于玉米增强根系生长方法

[发明专利]超量表达白菜MYB55在甘蓝型油菜分子育种中的应用-CN201910236624.6有效
发明人：柴友荣;蒋佳怡;尹能文;廖雪莉;张琳;袁成龙;蒋熳霖;杜有杰;谢瑞芳 -专利权人：西南大学
申请日： 2019-03-27 - 公布日： 2020-06-26 - 主分类号： C12N15/82 文献下载
摘要：本发明公开了超量表达白菜MYB55在甘蓝型油菜分子育种中的应用，通过构建正义超量表达植物载体，转化黑籽甘蓝型油菜品种中双10号后，获得转基因阳性植株；转基因阳性植株发育明显滞后，植株高度在盛花期前明显低于对照植株，但是转基因植株的横向生长发达；转基因植株的生殖生长较对照野生型植株延迟3‑5天，但是花、蕾和角果数增加，从而整个转基因植株的产量增加。对转基因植株进行组织解剖学观察发现，转基因植株茎秆维管束变大、木质部变厚且面积更大，抗折力增加；另外对转基因植株茎秆接种核盘菌，病斑显著比野生型植株小，以上结果说明BrMYB55参与植物的生长发育，增加了产量以及参与植物抗倒和抗菌核病过程
超量表达白菜 myb55 甘蓝油菜分子育种中的应用

[发明专利]一种优化的涂抹除草剂筛选转基因作物的方法-CN201110101955.2无效
发明人：夏勉;何峰;王伟娜;张斌 -专利权人：北京未名凯拓作物设计中心有限公司
申请日： 2011-04-22 - 公布日： 2012-01-11 - 主分类号： A01H1/04 文献下载
摘要：（a）在T0代转基因农作物的新生的第3~5叶片上，用marker笔标记直径约1cm的圆圈；（b）用移液器吸取2ul的除草剂溶液点在圆圈的中心；（c）5~7天后，经除草剂处理的有一片或以上叶片表现正常的植株为转基因阳性植株；（d）将上述筛选得到的转基因阳性植株移栽到大棚里，收种。本发明提供的涂抹筛选方法能够高效、简便地筛选得到T0代转基因阳性植株，对于转基因作物的筛选具有重要的意义。
一种优化涂抹除草剂筛选转基因作物方法

[发明专利]农杆菌介导马铃薯转hrap基因获得抗病性表达的方法-CN200710200922.7无效
发明人：黄先群;林忠平;蒋敏华;李丽;陈坚;毛堂芬;董颖苹;冯腾永 -专利权人：贵州省生物技术研究所
申请日： 2007-06-28 - 公布日： 2008-02-06 - 主分类号： C12N15/87 文献下载
摘要：本发明公开了一种利用农杆菌介导hrap基因获得抗病马铃薯植株的方法。因此，其抗病效果更好，能提高马铃薯植株的抗病性。将hrap基因通过农杆菌介导入马铃薯植株中，使马铃薯植株具有抗晚疫病和青枯病的能力。本发明采用的技术方案是：将经过预培养的外植体接种于农杆菌菌液中浸染，浸染后的外植体经共培养、诱导愈伤、诱导生芽和生根培养选择，选择根选两次都能生根的试管苗扩繁后转移盆栽得转化植株，转化植株用PCR检测和Southern杂交检测方法筛选阳性植株，经活体接种抗病性鉴定获得抗病马铃薯植株。对外植体进行两次根选，剔除了转化过程中的假阳性植株，避免了对假阳性植株的后继培养，节省劳动力，降低了生产成本。
杆菌马铃薯 hrap 基因获得抗病性表达方法

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