本发明属于分子生物学检测领域,公开了一种定量检测西红花的微滴式数字PCR引物、探针、试剂盒及方法。所述定量检测西红花的微滴式数字PCR引物的核苷酸序列为:XHH‑ITS‑F:5’‑ATAAGCGCGCCCGAGAGATGAT‑3’(SEQ ID No.1),XHH‑ITS‑R:5’‑CATCCTGGGGTCGCATTCGAT所述定量检测西红花的微滴式数字PCR探针的核苷酸序列为:XHH‑ITS‑P:5’‑CGCCATCCATGGATTAGCGCATGGA‑3’(SEQ ID No.3)。采用上述引物和探针能够对西红花进行定量检测,并具有良好的特异性和灵敏性。