本发明所提供的一种新用途是利用MtWRKY76的编码核酸分子培育结瘤能力高和/或耐逆性高的转基因结瘤植物的方法。本发明所提供的培育结瘤能力高和/或耐逆性高的转基因结瘤植物的方法,包括向受体结瘤植物中导入MtWRKY76基因得到结瘤能力和/或耐逆性高于所述受体结瘤植物的转基因结瘤植物的步骤;所述MtWRKY76是如下a)或b)的蛋白质:a)氨基酸序列如SEQ ID No.2所示的蛋白质;b)将SEQ ID No.2中的一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且与结瘤植物结瘤能力和/或耐逆性相关的由a)衍生的蛋白质本发明对于培育耐盐耐旱及增强结瘤能力的转基因豆科作物具有重要价值。
本发明提供了一种植物结瘤调控基因及其应用,属于基因工程技术领域。本发明提供的植物结瘤调控基因,所述基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明将所述的植物结瘤调控基因转导入植物体内,令其过表达,可显著增加根瘤的结瘤数量和毛状根的生根数量,从而提高植物从土壤中汲取营养物质的能力,促进植物的生长发育。
本发明公开了一种基于RNA干扰技术培育高结瘤转基因植物的方法,首先利用SEQ ID NO:1所示的基因片段构建RNAi载体,然后利用所得RNAi载体构建转基因植物,得到与正常植物相比具有高结瘤/固氮能力的转基因植物利用本发明构建的RNAi载体转化受体大豆植株获得转基因植物,能够显著提高非生物胁迫下大豆的结瘤固氮能力,对提高大豆产量具有重大的意义。
本发明公开了一种提高植物结瘤固氮效率的方法,首先构建含有SEQ ID NO:1所示基因片段的重组表达载体,然后利用此重组表达载体构建转化体,再利用此转化体侵染目的植物,筛选阳性植株,获得与正常植物相比根瘤数目增多、结瘤/固氮能力增强的转基因植物。利用本发明的方法所构建的转基因大豆具有明显增多的结瘤数目和更高的固氮效率。
本发明公开了一种培育高结瘤固氮转基因植物的方法,在植物体内过表达序列表中的SEQ ID NO:1所示核苷酸序列,获得与正常植物相比具有高结瘤固氮能力的转基因植物。经试验验证,利用本发明构建的过表达载体转化受体大豆植株获得转基因植物,能够显著提高大豆的结瘤固氮能力,对提高大豆产量具有重大的实际意义。本发明的技术方案在基础科研和农林应用两个方面均具有实际价值。
本发明公开了一个参与调控豆科植物共生结瘤的细胞凋亡抑制因子BI‑1基因,该基因的核苷酸序列如序列表SEQ ID NO:1所述。并提供了该基因在调控豆科植物根瘤数目中的应用。本发明利用酵母双杂交技术在大豆根瘤AD‑cDNA文库中筛选,找到了一个新的与结瘤因子受体蛋白相互作用的蛋白,并且通过序列比对及功能预测等方法证实了该基因是一个细胞凋亡抑制因子基因;利用超表达技术研究了该基因在豆科植物百脉根中共生结瘤过程中的功能,结果表明该基因编码的蛋白参与共生结瘤过程,超表达后,根瘤数目明显增多,在豆科植物共生固氮上具有应用前景。
本发明公开了一种用调控植物结瘤固氮能力的RNA干扰载体,包括骨架载体和发夹结构,所述发夹结构利用SEQ ID NO:2所示的基因片段构建,将基因片段插入到pTCK303载体的限制性内切酶KpnI/Spe使所得RNA干扰载体转化受体植物,沉默受体植物中的对应基因,使受体植物的根组织具有增强的结瘤固氮能力。利用本发明构建的RNA干扰载体转化受体大豆植株获得转基因植物,能够显著提高大豆的结瘤固氮能力,对提高大豆产量具有重大的意义。
本发明公开了一种用调控植物结瘤固氮能力的RNA干扰载体,包括骨架载体和发夹结构,所述发夹结构利用SEQ ID NO:2所示的基因片段构建,将基因片段插入到pTCK303载体的限制性内切酶Kpn I/Spe使所得RNA干扰载体转化受体植物,沉默受体植物中的对应基因,使受体植物的根组织具有增强的结瘤固氮能力。利用本发明构建的RNA干扰载体转化受体大豆植株获得转基因植物,能够显著提高大豆的结瘤固氮能力,对提高大豆产量具有重大的意义。