本发明公开了一种腺相关病毒载体,将COL7A1蛋白编码基因部分序列重组至ssAAV‑dj载体得到所述腺相关病毒载体;所述腺相关病毒载体为AAV9‑C7‑4K,其包括ssAAV‑dj载体骨架和COL7A1蛋白编码基因同源臂,所述ssAAV‑dj载体骨架序列如SEQ ID No:1所示,所述COL7A1蛋白编码基因同源臂序列如SEQ ID No:2所示。本发明的腺相关病毒载体包装滴度高、载体生产成本低。经本发明腺相关病毒疗法——通过直接静脉注射高纯度的上述腺相关病毒,治疗后的RDEB小鼠表现出系统性改善,其生存期显著延长。