本发明公开了丙型肝炎病毒NS3解旋酶ATP结合位点单克隆抗体识别表位,所述表位具有如下所示的氨基酸序列:PTGSGKSTK(SEQ ID NO:1)。本发明还公开了识别上述表位的单克隆抗体,及上述表位与单克隆抗体的应用。本发明的丙型肝炎病毒NS3解旋酶ATP结合位点单克隆抗体识别表位,为新发现的一个NS3蛋白抗原表位,该表位处于NS3C端解旋酶第一区域的ATP结合位点。本发明的单克隆抗体能特异性识别上述ATP结合位点,使解旋酶活性减弱或消失,进而影响HCV的复制抗体与此位点相结合,有望达到治疗HCV的目的。