本发明属于有害微生物防治技术领域,公开了一种蜡样芽孢杆菌的抑制物制备方法及应用,所述木贼镰刀菌HS02的ITS区核苷酸序列为SEQ ID NO:1;由木贼镰刀菌HS02制备得到的木贼镰刀菌HS02发酵物提取物;所述木贼镰刀菌HS02发酵物提取物在抑制蜡样芽孢杆菌的生长中的应用方法为:将木贼镰刀菌HS02进行发酵,将发酵物提取物用于抑制所述蜡样芽孢杆菌的生长。本发明结果表明提取物浓度在5mg/mL时对蜡样芽孢杆菌抑菌圈直径可达20.33±1.03mm,最低抑菌浓度(MIC)为0.078125mg/mL,抑菌效果非常突出。本发明具有方法简单、成本低、抑菌效果突出,在食品和医药行业具有广阔的应用前景。