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[发明专利]心肌细胞分离培养方法-CN201911372247.5在审
发明人：许珊珊;张勇杰;卢永波 -专利权人：广东博溪生物科技有限公司
申请日： 2019-12-27 - 公布日： 2020-05-15 - 主分类号： C12N5/077 文献下载
摘要：本发明提供一种心肌细胞分离培养方法，包含以下步骤：1）取心脏组织，使用PBS液体清洗掉残留的血液；用眼科剪将心脏组织剪成0.1‑1mm3的组织块，加入0.5‑5mL的Ⅰ型胶原酶，36‑37.5℃条件下震荡消化0.5‑3小时；消化结束后加入2.5‑50mL PBS进行稀释中止，1200rpm/min离心5min，弃上清，获得细胞沉淀；2）将所述细胞沉淀用0.5‑5mL胰酶进行重悬，弯头吸管吹打10‑300次，消化液变浑浊后加入培养液终止胰酶消化，1200rpm/min离心5min，弃上清，获得原代心肌细胞。3）将所述原代心肌细胞用培养液进行重悬后，按照0.1‑10×105个细胞/ cm2接种于培养液中，置于37℃、5%CO2的培养箱中进行培养，获得所述心肌细胞。
心肌细胞分离培养方法

[发明专利]抗心律失常药向干细胞衍生的心肌细胞的应用及其用途-CN202080041003.3在审
发明人： H·肯普夫;S·E·拉斯马森;D·M·罗普克 -专利权人：诺和诺德股份有限公司
申请日： 2020-06-05 - 公布日： 2022-01-11 - 主分类号： C12N5/077 文献下载
摘要：本发明涉及在通过移植干细胞衍生的心肌细胞来治疗心力衰竭的方法中使用的抗心律失常药，抗心律失常心肌细胞群体，通过在体外将干细胞衍生的心肌细胞暴露于抗心律失常药而获得抗心律失常心肌细胞群体的方法，和/或抗心律失常心肌细胞群体在预防心律失常和治疗心力衰竭中的医学用途具体地，本发明涉及抗心律失常心肌细胞群体的移植或抗心律失常药与移植的干细胞衍生的心肌细胞在体内的共施用。
心律失常干细胞衍生心肌细胞应用及其用途

[发明专利]一种原代小鼠或大鼠心肌细胞的分离培养方法-CN201610218220.0在审
发明人：王晓冰;杨国峰 -专利权人：王晓冰;杨国峰
申请日： 2016-04-08 - 公布日： 2016-08-31 - 主分类号： C12N5/077 文献下载
摘要：本发明公开了一种原代小鼠或大鼠心肌细胞的分离培养方法，采用特制的复合酶进行长期消化，使得获得细胞总量大，分离度高，活率高；由于采集方式的不同，杜绝了心脏内残留血液的污染和影响，使得本发明的方法获得的心肌细胞细菌、真菌和其他细胞的污染概率极低，同时还能够进行传代培养，为以心肌培养为基础的相关研究提供了良好的细胞培养解决方案。
一种小鼠大鼠心肌细胞分离培养方法

[发明专利]RhoE基因在制备治疗糖尿病心肌病的药品中的应用-CN202210624029.1在审
发明人：揭伟;申志华;郭峻莉;施凯佳;邢敬慈;赵鋆 -专利权人：海南医学院;广东医科大学
申请日： 2022-06-02 - 公布日： 2022-10-21 - 主分类号： C12Q1/6883 文献下载
摘要：本发明提供了RhoE基因在制备治疗糖尿病心肌病的药品中的应用，属于生物医药技术领域。本发明首次发现糖尿病心肌病动物模型和体外高糖培养的心肌细胞中RhoE表达是下降的，伴随纤维化等的改变，阐明了糖尿病/高糖刺激对心肌细胞中RhoE表达具有显著的抑制效应和促纤维化作用，且实验证实了高糖刺激通过AMPK信号而下调了心肌细胞中RhoE的表达，心肌细胞中RhoE表达下调增加了纤维化。通过靶向恢复心肌组织内RhoE的表达显著恢复了糖尿病导致的心功能损伤。
rhoe 基因制备治疗糖尿病心肌药品中的应用

[发明专利]一种重组心肌细胞及其用途-CN202110728326.6在审
发明人：张家毓;刘洋洋 -专利权人：上海交通大学医学院附属第九人民医院
申请日： 2021-06-29 - 公布日： 2021-09-28 - 主分类号： C12N5/10 文献下载
摘要：本发明涉及医药技术领域，特别是涉及一种重组心肌细胞及其用途，所述重组心肌细胞为移植有外源线粒体的疾病心肌细胞，所述外源线粒体来源于与所述疾病心肌细胞同源的健康心肌细胞。所述重组心肌细胞或健康人的离体心肌细胞的线粒体能用于制备预防或治疗心肌病产品中。本发明的重组心肌细胞活力强，能够明显改善疾病状态下细胞的功能，对受损的心肌有显著的修复作用，为心肌病防治药物的开发提供了新的选择。
一种重组心肌细胞及其用途

[发明专利]用于iPSC和ESC衍生的心肌细胞的功能成熟的方法和系统-CN201880029024.6在审
发明人： X·张;Y·A·阿巴西;李楠;王小波 -专利权人：美国艾森生物科学公司
申请日： 2018-03-03 - 公布日： 2019-12-17 - 主分类号： C12N13/00 文献下载
摘要：本发明为诱导未成熟心肌细胞功能成熟的方法，所述未成熟心肌细胞衍生自诱导的多能干细胞(iPSC)和胚胎干细胞(ESC)，所述方法为通过根据诱导成熟的脉冲谱使未成熟心肌细胞电起搏，直到未成熟心肌细胞成熟为功能上的成体心肌细胞时为止
心肌细胞未成熟诱导成熟心肌细胞功能多能干细胞胚胎干细胞脉冲谱成体起搏

[发明专利]心肌分化相关蛋白Ybx－1的鉴定及其在心血管疾病治疗中的应用-CN200610081236.8无效
发明人：温见燕;夏晴;陆彩玲;尹丽娜;龚燕华;阴彬;彭小忠;袁建刚;强伯勤 -专利权人：中国医学科学院基础医学研究所
申请日： 2006-05-26 - 公布日： 2007-11-28 - 主分类号： G01N33/68 文献下载
摘要：本发明提供了一种基于蛋白质组学技术，研究P19CL6细胞向心肌细胞分化前后差异表达蛋白的筛选和鉴定方法。本发明在验证P19CL6细胞在1％DMSO诱导下成功分化成心肌细胞的基础上，应用上述的方法，提供了P19CL6细胞向心肌细胞分化前后有意义的差异表达蛋白。其中Ybx－1在P19CL6细胞分化为心肌细胞后表达上调，Ybx－1与P19CL6细胞向心肌细胞的分化密切相关，参与心肌细胞分化的表达调控。Ybx－1可用于干细胞种植心肌再生或心肌细胞重建治疗心脏疾病，尤其是心肌梗塞治疗。
心肌分化相关蛋白 ybx 鉴定及其心血管疾病治疗中的应用

[发明专利]心肌细胞和组合物及其产生方法-CN202080055085.7在审
发明人：理查德·T·利;杰西卡·加伯恩;道格拉斯·A·梅尔顿;亚哈龙·赫尔曼 -专利权人：哈佛学院校长同事会;儿童医学中心公司
申请日： 2020-06-08 - 公布日： 2022-08-19 - 主分类号： C12N5/077 文献下载
摘要：本文公开了用于产生成熟心肌细胞的方法和包含成熟心肌细胞的组合物。本文还公开了用于增强静止心肌细胞的成熟的方法和包含成熟静止心肌细胞的组合物。
心肌细胞组合及其产生方法

[发明专利]一种纯化干细胞来源的心肌细胞的无血清培养基-CN201610163672.3在审
发明人：刘文;周向前;王志敏;陈志辉 -专利权人：上海产业技术研究院;上海尤格恩生物科技有限公司
申请日： 2016-03-19 - 公布日： 2016-06-22 - 主分类号： C12N5/077 文献下载
摘要：本发明属于生物技术细胞培养技术领域，具体为一种纯化干细胞来源的心肌细胞的无血清培养基。其组分包括：L-谷氨酰胺、胰岛素、维生素、基因重组人血白蛋白、氨基酸、非必需氨基酸、微量元素、乳糖、槲皮素、溴脱氧核苷、RPMI无糖培养基；其中，L-谷氨酰胺0.1-5mmol/L、胰岛素2-10mmol该培养基可以帮助提纯混合体系的心肌细胞，其他的非心肌细胞在细胞混合物中比例逐渐降低，最后获得纯度高的心肌细胞。此培养基不含血，避免了病毒污染造成的危害。
一种纯化干细胞来源心肌细胞血清培养基

[发明专利]一种化学品胚胎毒性预测模型及其建立方法-CN201510478375.3在审
发明人：王艳;程薇;胡庆亮;张星 -专利权人：上海交通大学医学院
申请日： 2015-08-07 - 公布日： 2015-10-21 - 主分类号： C12N5/077 文献下载
摘要：一种化学品胚胎毒性预测模型包括细胞种类；该细胞种类包括核型为XX的SP3ES细胞诱导分化出的心肌细胞。其建立方法包括步骤一、小鼠胚胎成纤维细胞的分离和培养；二、小鼠ES的体外扩增培养；三、小鼠ES的核型分析及性别鉴定；四、小鼠ES多能性的维持和鉴定；五、小鼠ES体外诱导分化为心肌细胞；六、小鼠ES诱导分化的心肌细胞的心肌特异性标志蛋白的免疫化学检测；七、小鼠ES诱导分化的心肌细胞的表达谱的Real-time PCR检测；八、模式化合物的选择；九、模式化合物细胞毒性的检测；十、模式化合物对ES分化能力的抑制效应的检测；十一、模式化合物胚胎毒性的评价填补EST体系中无雌性小鼠胚胎干细胞的空白。
一种化学品胚胎毒性预测模型及其建立方法

[发明专利]一种化学品胚胎毒性预测模型及其建立方法-CN202111186116.5在审
发明人：王艳;程薇;胡庆亮;张星 -专利权人：上海交通大学医学院
申请日： 2015-08-07 - 公布日： 2022-01-14 - 主分类号： C12N5/077 文献下载
摘要：一种化学品胚胎毒性预测模型包括细胞种类；该细胞种类包括核型为XX的SP3 ES细胞诱导分化出的心肌细胞。其建立方法包括步骤一、小鼠胚胎成纤维细胞的分离和培养；二、小鼠ES的体外扩增培养；三、小鼠ES的核型分析及性别鉴定；四、小鼠ES多能性的维持和鉴定；五、小鼠ES体外诱导分化为心肌细胞；六、小鼠ES诱导分化的心肌细胞的心肌特异性标志蛋白的免疫化学检测；七、小鼠ES诱导分化的心肌细胞的表达谱的Real‑time PCR检测；八、模式化合物的选择；九、模式化合物细胞毒性的检测；十、模式化合物对ES分化能力的抑制效应的检测；十一、模式化合物胚胎毒性的评价填补EST体系中无雌性小鼠胚胎干细胞的空白。
一种化学品胚胎毒性预测模型及其建立方法

[发明专利]基于Rbm24基因获得干细胞源成熟心肌细胞的方法-CN201710025465.6有效
发明人：徐秀琴;刘靖;林瑜 -专利权人：厦门大学;厦门大学深圳研究院
申请日： 2017-01-13 - 公布日： 2020-06-19 - 主分类号： C12N15/12 文献下载
摘要：基于Rbm24基因获得干细胞源成熟心肌细胞的方法，涉及干细胞再生医学与药物。通过Rbm24基因转染多能性干细胞，或激活Rbm24的表达，可以高效获得干细胞源的成熟心肌细胞。实验证实在多能干细胞中转入Rbm24基因后，分化出的心肌细胞肌节排列整齐，亚显微结构显示成熟心肌细胞特征，具有较低的静息电位和明显的去极化和复极化期，电生理特征趋于成熟的心肌细胞，说明Rbm24基因促进了多能干细胞向心肌细胞的成熟，干细胞源分化获得的成熟心肌细胞具有药物筛选及临床应用价值。
基于 rbm24 基因获得干细胞成熟心肌细胞方法

[发明专利]柯楠因在制备治疗心肌损伤性心脏病药物中的用途-CN200910150933.8有效
发明人：朱依谆;吴利新;朱依纯 -专利权人：复旦大学
申请日： 2009-06-20 - 公布日： 2010-03-31 - 主分类号： A61K31/4375 文献下载
摘要：本发明属制药领域，涉及钩藤生物碱提取物柯楠因在制备心肌损伤药物中的用途，尤其是在制备治疗缺血缺氧心肌损伤药物中的用途。本发明通过体外心肌细胞培养实验，结果表明柯楠因可以提高细胞存活率，促进NO生成；可降低缺氧缺糖损伤心肌细胞的LDH的漏出率；可提高SOD活性；可以抑制脂质过氧化以及具有抑制心肌细胞凋亡的作用。所述的柯楠因可作为治疗药物应用于治疗心肌损伤尤其是缺血缺氧心肌损伤心脏病。
制备治疗心肌损伤心脏病药物中的用途

[发明专利]用于心肌细胞分离提纯的试剂盒及使用方法-CN201711342026.4在审
发明人：董念国;刘保庆;李飞;尚小珂;史峰;邱雪峰;史嘉玮;陈思;吴龙;刘隽炜;刘义华;胡行健;洪昊;李华东;孙永丰;乔韡华;张超;王寅;李庚;朱鹏;刘名;耿冰川;代金池;白鹏;姜烨凡 -专利权人：华中科技大学同济医学院附属协和医院
申请日： 2017-12-14 - 公布日： 2018-04-06 - 主分类号： C12N5/077 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于心肌细胞分离提纯的试剂盒及使用方法，涉及生物细胞培养技术领域，试剂盒包括第一试剂混合物、第二试剂混合物和第三试剂混合物，其中第一试剂混合物包括7.012‑8.007份Nacl，0.395采用本发明的试剂盒进行心肌原代细胞分离提纯，大大缩短心肌细胞提纯耗时。且心肌细胞与非心肌细胞分离效果更佳，心肌细胞纯度更高。
用于心肌细胞分离提纯试剂盒使用方法

[发明专利]用于使多能干细胞分化为心肌细胞的方法-CN201580023317.X有效
发明人： M·布尔钦;S·施利希特 -专利权人：豪夫迈·罗氏有限公司
申请日： 2015-05-04 - 公布日： 2020-09-01 - 主分类号： C12N5/077 文献下载
摘要：本申请涉及用于使多能干细胞(PSC)分化为心肌细胞的方法。此外，本申请涉及用于使人胚胎干细胞(hESC)和诱导型多能干细胞(iPSC)分化为确定的心肌细胞的方法，其基于化学成分确定的培养基诱导的连接步骤。
用于多能干细胞化为心肌细胞方法