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[发明专利]一种鱼类血管囊单细胞测序样品的制备方法-CN202110157096.2在审
发明人：邱丽华;王鹏飞;闫路路;赵超;范嗣刚;郑少华;袁满 -专利权人：中国水产科学研究院南海水产研究所;饶平县少华水产科技有限公司
申请日： 2021-02-04 - 公布日： 2021-05-28 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本发明公开了一种鱼类血管囊单细胞测序样品的制备方法，取分离所得的完整鱼类血管囊经缓冲液润洗后，置于无菌滤网中，滴加缓冲液或培养基包裹血管囊，揉压血管囊，将鱼类血管囊内细胞挤压过筛，所得细胞制成单细胞悬浮液后经过筛孔孔径不大于40μm的筛网过滤，得鱼类血管囊单细胞悬浮液，作为鱼类血管囊单细胞测序样品。本发明可大大降低细胞过筛损伤，减少细胞碎片的产生，同时可分离出完整的血管囊外膜，减少单细胞悬浮液中的结缔组织干扰。而且得到单细胞悬浮液后再经过孔径在40μm以下的网筛过滤，再次去除多余细胞团和结缔组织等杂质，两次过筛后，大大降低单细胞悬浮液中的细胞团块和杂质含量，可得到几乎无细胞团和细胞碎片的完整单细胞悬浮液。
一种鱼类血管单细胞样品制备方法

[发明专利]临床级别视网膜色素上皮细胞的可再现的分化方法-CN202210484960.4在审
发明人： K·巴蒂;L·蔡斯;X·冯;B·S·耶哈 -专利权人： (由卫生与公众服务部部长代表的)美利坚合众国;富士胶片细胞动力公司
申请日： 2016-09-07 - 公布日： 2022-07-29 - 主分类号： C12N5/079 文献下载
摘要：本文提供了从多能干细胞(PSC)的起始细胞悬浮液例如单细胞悬浮液产生RPE细胞群体的方法。这样的方法可包括在分化培养基中培养PSC的起始单细胞悬浮液以产生人RPE细胞。
临床级别视网膜色素上皮细胞再现分化方法

[发明专利]临床级别视网膜色素上皮细胞的可再现的分化方法-CN201680060872.4有效
发明人： K·巴蒂;L·蔡斯;X·冯;B·S·耶哈 -专利权人： (由卫生与公众服务部部长代表的)美利坚合众国;富士胶片细胞动力公司
申请日： 2016-09-07 - 公布日： 2022-04-26 - 主分类号： C12N5/079 文献下载
摘要：本文提供了从多能干细胞(PSC)的起始细胞悬浮液例如单细胞悬浮液产生RPE细胞群体的方法。这样的方法可包括在分化培养基中培养PSC的起始单细胞悬浮液以产生人RPE细胞。
临床级别视网膜色素上皮细胞再现分化方法

[发明专利]一种实现高通量单细胞捕获与力学特性分析的微流控芯片-CN201810800119.5在审
发明人：覃开蓉;袁闱墨;薛春东;耿春阳 -专利权人：大连理工大学
申请日： 2018-07-20 - 公布日： 2018-11-23 - 主分类号： C12M1/34 文献下载
摘要：一种实现高通量单细胞捕获与力学特性分析的微流控芯片，属于细胞生物学及微流控芯片领域。该微流控芯片包括细胞悬浮液入口、细胞悬浮液出口和多排单细胞捕获阵列单元；多排单细胞捕获阵列单元并联设置，且共用一个细胞悬浮液入口和一个细胞悬浮液出口；每排单元由单细胞捕获通道阵列、阻力通道和出口通道组成捕获通道中的流量大于阻力通道中的流量，使得细胞被确定性地捕获在捕获通道入口处。由于每排单元间紧密排列，捕获通道也成阵列排布，故实现在一个显微镜视野下高通量捕获单细胞。阻力通道的长度为捕获通道阵列长度的100倍以上，使得各个被捕获单细胞受到近似一致的压差作用，因此可分析不同单细胞在此相同力学刺激下不同的力学特性。
单细胞捕获捕获微流控芯片细胞悬浮液阻力通道高通量力学特性分析通道阵列阵列单元多排细胞生物学通道入口处显微镜视野并联设置出口通道紧密排列力学刺激力学特性压差作用阵列排布单元间确定性出口近似细胞分析

[发明专利]一种适配移液器枪头的单细胞分离筛-CN201410398252.4在审
发明人：刘德华 -专利权人：科晶(宁波)生物科技有限公司
申请日： 2014-08-13 - 公布日： 2014-12-10 - 主分类号： C12M1/12 文献下载
摘要：本发明提供了一种适配移液器枪头的单细胞分离筛，用以从细胞悬浮液中分离出单细胞。所述移液器枪头可以为普通市售各种规格的移液器枪头，也可以为能与所述单细胞分离附件紧密嵌合的特制移液器枪头。首先用移液器枪头吸取一定体积的细胞悬浮液后，加装嵌套所述单细胞分离筛，推送释放入采集容器的过程即可完成细胞悬浮液的单细胞分离。所述移液器枪头单细胞分离筛使用方法作简单快捷，无需使用者改变操作习惯，且可根据后续实验或步骤的单细胞用量决定移液体积，节省样品用量，大大提高单细胞采集、分离、或后续分析检测、扩增培养的效率，尤其适用现代高通量
一种适配移液器枪头单细胞分离

[发明专利]一种检测加热不燃烧卷烟总粒相物对细胞DNA损伤的方法-CN201811433448.7在审
发明人：管莹;李雪梅;韩敬美;何东沅;张伟;高茜;徐玉琼;汤建国;朱东来;张霞 -专利权人：云南中烟工业有限责任公司
申请日： 2018-11-28 - 公布日： 2019-03-08 - 主分类号： G01N21/64 文献下载
摘要：本发明公开一种检测加热不燃烧卷烟总粒相物对细胞DNA损伤的方法，包括以下步骤：(1)样品前处理；(2)人鼻腔上皮细胞单细胞悬浮液的制备；(3)人鼻腔上皮细胞单细胞悬浮液的细胞浓度计算；(4)人鼻腔上皮细胞单细胞悬浮液的接种；(5)受试物暴露；(6)收集细胞；(7)细胞固定；(8)染色；(9)流式检测和分析。本发明样品的有效处理、检测剂量的优化设定以及靶细胞的正确选择，使得本方法能够准确检测加热不燃烧卷烟总粒相物对细胞周期的影响。
单细胞悬浮液卷烟总粒相物上皮细胞人鼻腔加热细胞DNA损伤种检测燃烧样品前处理细胞浓度计算细胞固定细胞周期优化设定有效处理准确检测靶细胞受试物检测染色流式制备接种暴露分析

[发明专利]检测加热不燃烧卷烟总粒相物对细胞早期凋亡率影响方法-CN201811433487.7在审
发明人：管莹;李雪梅;张伟;高茜;徐玉琼;汤建国;朱东来;张霞;韩敬美;何东沅 -专利权人：云南中烟工业有限责任公司
申请日： 2018-11-28 - 公布日： 2019-04-09 - 主分类号： C12Q1/02 文献下载
摘要：本发明公开检测加热不燃烧卷烟总粒相物对细胞早期凋亡率影响方法，包括以下步骤：(1)样品前处理；(2)人鼻腔上皮细胞单细胞悬浮液的制备；(3)人鼻腔上皮细胞单细胞悬浮液的细胞浓度计算；(4)人鼻腔上皮细胞单细胞悬浮液的接种；(5)受试物暴露；(6)收集细胞；(7)细胞早期凋亡率的测定。本发明样品的有效处理、检测剂量的优化设定以及靶细胞的正确选择，使得本方法能够准确检测加热不燃烧卷烟总粒相物对细胞早期凋亡率的影响。
细胞凋亡单细胞悬浮液卷烟总粒相物上皮细胞人鼻腔加热燃烧检测样品前处理浓度计算优化设定有效处理准确检测靶细胞受试物制备接种暴露

[实用新型]一种单细胞悬浮液制备装置-CN201921962658.5有效
发明人：张惠丹;戴敬;孙培亚;赵洪玉 -专利权人：苏州绘真医学检验有限公司
申请日： 2019-11-14 - 公布日： 2020-08-07 - 主分类号： C12M1/00 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种单细胞悬浮液制备装置，包括过滤柱、废液收集管道、废液收集桶、单细胞悬浮液释放管道和负压连接管道，所述过滤柱顶端开口、底端与单细胞悬浮液释放管道连接，所述过滤柱内部装有细胞过滤网，所述过滤柱底部一侧设有废液过滤出口该装置简便易操作、全自动一体化，使单细胞悬液制备过程操作简化、得到的单细胞质量较高且稳定。
一种单细胞悬浮液制备装置

[发明专利]一种检测加热不燃烧卷烟总粒相物对细胞周期影响的方法-CN201811434049.2在审
发明人：管莹;李雪梅;张霞;韩敬美;何东沅;张伟;高茜;徐玉琼;汤建国;朱东来 -专利权人：云南中烟工业有限责任公司
申请日： 2018-11-28 - 公布日： 2019-04-09 - 主分类号： C12Q1/02 文献下载
摘要：本发明公开一种检测加热不燃烧卷烟总粒相物对细胞周期影响的方法，包括以下步骤：(1)样品前处理；(2)人鼻腔上皮细胞单细胞悬浮液的制备；(3)人鼻腔上皮细胞单细胞悬浮液的细胞浓度计算；(4)人鼻腔上皮细胞单细胞悬浮液的接种；(5)受试物暴露；(6)收集细胞；(7)细胞固定；(8)染色；(9)流式检测和分析。本发明样品的有效处理、检测剂量的优化设定以及靶细胞的正确选择，使得本方法能够准确检测加热不燃烧卷烟总粒相物对细胞周期的影响。
单细胞悬浮液卷烟总粒相物上皮细胞细胞周期人鼻腔加热种检测燃烧样品前处理细胞浓度计算细胞固定优化设定有效处理准确检测靶细胞受试物检测染色流式制备接种暴露分析

[发明专利]用于增殖人胚泡衍生干细胞的培养系统和方法-CN200780016941.2无效
发明人： R·斯特瑞尔;C·埃勒斯特罗姆;H·赛伯 -专利权人：塞拉提斯股份公司
申请日： 2007-03-16 - 公布日： 2009-05-27 - 主分类号： C12N5/08 文献下载
摘要：本发明涉及用于基于酶促解离成单细胞悬浮液来增殖人胚泡衍生干细胞(hBS细胞)的培养系统和方法。所述用于增殖人胚泡衍生干(hBS)细胞的培养系统包括：i)密度为至少50,000细胞/cm²的人饲养细胞，ii)一种或多种用于将hBS细胞集落解离成单细胞悬浮液的解离剂，和iii)支持性培养基，该培养系统通过在每个连续传代中将hBS细胞集落解离成单细胞悬浮液而使得可能在延长的时间段内增殖hBS细胞，并同时维持hBS细胞的显著特征。
用于增殖人胚泡衍生干细胞培养系统方法

[发明专利]一种适用于流式细胞术检测倍性的贝类样品制备方法-CN03133650.7无效
发明人：阙华勇;刘晓;张国范 -专利权人：中国科学院海洋研究所
申请日： 2003-08-07 - 公布日： 2005-02-16 - 主分类号： G01N1/28 文献下载
摘要：本发明公开一种适用于流式细胞术检测倍性的贝类样品制备方法。它从幼虫、稚贝、幼贝或成贝获取生物样品；往生物样品中加入细胞核分离液，振荡、研磨或剁切制备成匀浆状，静置沉淀得上清悬浮液；将上清悬浮液转移到离心管，离心去除上清液，收集游离的单细胞核；再往单细胞核中加入细胞核固定液I，重新悬浮细胞核；然后离心去除上清液，收集游离的单细胞核；再往单细胞核中加入细胞核固定液II，悬浮细胞核，制成可在常温下保存或长途运输，以备用于流式细胞仪检测的单细胞核样品。本发明适用于流式细胞仪的检测，具有稳定的高检出率。
一种适用于细胞检测贝类样品制备方法

[发明专利]单细胞分离器的应用方法-CN201310073666.5无效
发明人：张伟华;杨林;张明 -专利权人：博生吉医药科技（苏州）有限公司
申请日： 2013-03-08 - 公布日： 2013-05-22 - 主分类号： C12N5/00 文献下载
摘要：本发明提供了一种单细胞分离器的应用方法。所述单细胞分离器包括探针板和细胞培养板，所述探针板上设置有探针，所述细胞培养板上设置有与所述探针相对应的收容孔。所述单细胞分离器的应用方法主要包括以下步骤：S1、对探针进行预处理；S2、准备细胞悬浮液；S3、将所述细胞悬浮液加入至所述细胞培养板的所述收容孔内；S4、将所述探针伸入对应的所述收容孔中；S5、将所述探针移出，以将单细胞从所述细胞悬浮液中分离出来。本发明单细胞分离器的应用方法不仅简单、易操作，而且对细胞本身无损伤、有利于细胞的后续培养、扩增与检测。
单细胞分离器应用方法

[发明专利]一种检测口含烟制品对细胞炎症效应因子分泌量影响方法-CN201611055891.6在审
发明人：管莹;李雪梅;夭建华;米其利;高茜;朱洲海;唐萍 -专利权人：云南中烟工业有限责任公司
申请日： 2016-11-25 - 公布日： 2017-03-15 - 主分类号： C12Q1/02 文献下载
摘要：本发明公开一种检测口含烟制品对细胞炎症效应因子分泌量影响方法，包括以下步骤(1)受试物的前处理；(2)人口腔角质细胞单细胞悬浮液的制备；(3)人口腔角质细胞单细胞悬浮液的细胞浓度的计算；(4)人口腔角质细胞单细胞悬浮液的细胞接种；(5)受试物的分组；(6)受试物检测剂量的设定；(7)受试物培养品的制备；(8)受试物的孵育；(9)受试物孵育品的收集；(10)标准溶液配制；(11)添加待测样；(12)添加抗体；(13)添加结合液；(14)显色；(15)测量吸光值；(16)细胞因子分泌量测定。本发明的方法能够准确有效的检测卷烟烟气总粒相物对细胞炎症效应因子分泌影响。
一种检测口含烟制品细胞炎症效应因子分泌影响方法

[发明专利]一种检测烟气总粒相物对细胞炎症效应因子影响方法-CN201611056530.3有效
发明人：管莹;李雪梅;夭建华;熊国行;米其利;高茜;朱洲海 -专利权人：云南中烟工业有限责任公司
申请日： 2016-11-25 - 公布日： 2019-01-25 - 主分类号： C12N5/02 文献下载
摘要：本发明公开一种检测烟气总粒相物对细胞炎症效应因子影响方法，包括以下步骤：(1)受试物的前处理；(2)人肺成纤维细胞单细胞悬浮液的制备；(3)人肺成纤维细胞单细胞悬浮液的细胞浓度的计算；(4)人肺成纤维细胞单细胞悬浮液的细胞接种；(5)受试物的分组；(6)受试物检测剂量的设定；(7)受试物培养品的制备；(8)受试物的孵育；(9)受试物孵育品的收集；(10)标准溶液配制；(11)添加待测样；(12)添加抗体；(13)添加结合液；(14)显色；(15)测量吸光值；(16)细胞因子分泌量测定。本发明的方法能够准确有效的检测卷烟烟气总粒相物对细胞炎症效应因子分泌影响。
受试物单细胞悬浮液成纤维细胞细胞炎症效应因子总粒相物人肺种检测孵育烟气制备标准溶液配制细胞因子分泌卷烟烟气细胞接种结合液前处理检测测样抗体吸光显色分泌测量细胞分组

[发明专利]一种快速检测芸薹属六倍体新种质倍性的方法-CN201610648697.2有效
发明人：杨素;周伟军;张康妮;许玲;王尖;葛常青;徐建祥 -专利权人：浙江大学
申请日： 2016-08-10 - 公布日： 2019-04-23 - 主分类号： G01N1/28 文献下载
摘要：本发明公开了一种快速检测芸薹属六倍体新种质倍性的方法，包括：(1)从芸薹属新种质上取从心叶往外的第三片叶，装入含有钢珠的离心管中，向离心管中加入提取缓冲液，在‑20～‑10℃下静置5～20min后放入磨样机中进行磨样；(2)将磨碎后的叶片用滤网过滤得滤液，在滤液中加入RNAse溶液，在37℃中孵化20～30min；(3)在孵化后的滤液中加入染色液避光染色得单细胞悬浮液样品；(4)用流式细胞仪对单细胞悬浮液样品进行检测本发明采用磨样机对叶片组织进行研磨，产生的单细胞悬浮液中单细胞数量较多，很少产生破碎细胞，同时检测效率高，适合大批量检测。
一种快速检测芸薹属六倍体新种质方法

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