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[发明专利]半滑舌鳎遗传性别及WW超雌鱼鉴定方法-CN200810016870.2有效
发明人：陈松林;季相山;邵长伟;田永胜;王娜;武鹏飞 -专利权人：中国水产科学研究院黄海水产研究所
申请日： 2008-06-19 - 公布日： 2008-11-12 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明提供了一种半滑舌鳎遗传性别及WW超雌鱼鉴定方法，可以解决半滑舌鳎性别控制和全雌育种研究中不能鉴定ZW雌鱼和WW超雌鱼的问题。所采用的技术方案是：一种半滑舌鳎遗传性别鉴定方法，包括如下步骤：1)半滑舌鳎血液样品的制备；2)半滑舌鳎细胞DNA含量的测定；3)半滑舌鳎遗传性别的鉴定。本发明建立了用流式细胞仪测定半滑舌鳎雌、雄鱼DNA含量，根据雌雄DNA含量差异鉴定半滑舌鳎ZZ雄鱼、ZW雌鱼以及WW超雌鱼的技术方法，为半滑舌鳎性别控制和全雌苗种的生产提供了可靠的技术手段。本方法可以在半滑舌鳎性别控制和全雌苗种生产中推广应用，也可以在其他鱼类性别控制中进行应用。
舌鳎遗传性别 ww 超雌鱼鉴定方法

[发明专利]一种miRNA及其在调控C5aR1基因中的应用-CN202211414910.5在审
发明人：沙珍霞;刘红宁;陈亚东;王宁宁;刘鑫宝;谭苏旭;史鲲鹏;韩森;陈学杰 -专利权人：青岛大学
申请日： 2022-11-11 - 公布日： 2023-04-07 - 主分类号： C12N15/113 文献下载
摘要：本发明提供一种半滑舌鳎miRNA及其应用，所述miRNA的序列为SEQID NO:1，对应的靶基因为半滑舌鳎C5aR1，并且提供了所述半滑舌鳎RNA在调控半滑舌鳎C5aR1基因表达中的应用。本发明发现了调控半滑舌鳎C5aR1基因的miRNA，利用所述的miRNA能够调控C5aR1基因在半滑舌鳎体内的表达，从而降低炎症因子的表达，减少半滑舌鳎在细菌性炎症中的死亡。
一种 mirna 及其调控 c5ar1 基因中的应用

[发明专利]一种半滑舌鳎的弧菌结合蛋白及其应用-CN202210788541.X在审
发明人：周茜;陈亚东;王婕;马欣然;陈松林 -专利权人：中国水产科学研究院黄海水产研究所
申请日： 2022-07-04 - 公布日： 2023-05-12 - 主分类号： C07K14/78 文献下载
摘要：本发明提供半滑舌鳎的弧菌受体蛋白VI型胶原蛋白α2作为阻断弧菌病原粘附和侵染半滑舌鳎细胞的靶点蛋白的应用，为研究开发半滑舌鳎防治弧菌病感染策略和病害防控技术提供重要基础。本发明发现半滑舌鳎VI型胶原蛋白α2可介导多种弧菌属病原菌与半滑舌鳎的结合，可作为阻断弧菌粘附和侵染半滑舌鳎细胞的候选蛋白，从而为防治半滑舌鳎弧菌性疾病提供新策略。本发明还为研制新型抗菌药物提供了一种新途径，在半滑舌鳎病害防治等方面具有应用价值。
一种舌鳎弧菌结合蛋白及其应用

[发明专利]半滑舌鳎分子标记辅助性别控制方法-CN200710115084.3无效
发明人：陈松林;邓思平;田永胜;马洪雨;徐建勇;杨景峰;季相山;邓寒;翟介明;刘寿堂 -专利权人：中国水产科学研究院黄海水产研究所
申请日： 2007-12-01 - 公布日： 2008-07-23 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：一种半滑舌鳎分子标记辅助性别控制方法，包括半滑舌鳎雌性特异AFLP标记的筛选和克隆、半滑舌鳎遗传性别鉴定PCR方法的建立、半滑舌鳎伪雄鱼的制备以及利用半滑舌鳎伪雄鱼生产雌性化苗种的方法；筛选到半滑舌鳎雌性特异分子标记，建立了半滑舌鳎伪雄鱼诱导方法和利用雌性特异分子标记鉴定伪雄鱼的技术方法。本发明首次建立了采用AFLP分子标记结合性逆转技术对半滑舌鳎进行性别控制，提高雌性化鱼苗比例的方法，可将半滑舌鳎鱼苗中雌鱼的比例提高20－25％。本发明具有高效、准确和可靠的特点，在半滑舌鳎性别控制和单性苗种生产中具有重要的应用价值，同时在其它鱼类性别控制和单性化苗种生产中也具有应用前景。
舌鳎分子标记辅助性别控制方法

[发明专利]半滑舌鳎性别连锁的微卫星标记及遗传性别鉴定方法-CN201010239729.6有效
发明人：廖小林;陈松林;徐亘博;徐营 -专利权人：中国水产科学研究院黄海水产研究所
申请日： 2010-07-29 - 公布日： 2010-12-15 - 主分类号： C12N15/11 文献下载
摘要：一种半滑舌鳎性别连锁的微卫星标记及遗传性别鉴定方法，包括半滑舌鳎性别连锁的微卫星标记的筛选、验证、雌性特异等位基因的克隆、序列分析、特异引物设计以及半滑舌鳎遗传性别鉴定的PCR方法；根据获得的半滑舌鳎性别连锁的微卫星标记引物及雌性特异等位基因序列，创建了半滑舌鳎遗传性别的PCR鉴定方法。本发明首次筛选到半滑舌鳎性别连锁的微卫星标记及雌性特异等位基因，建立了半滑舌鳎遗传性别鉴定的PCR技术。本发明具有高效、准确和稳定的特点，在半滑舌鳎性别控制和单性苗种生产中具有重要应用价值，同时在克隆半滑舌鳎性别决定基因研究中也具有重要应用前景。
舌鳎性别连锁卫星标记遗传鉴定方法

[发明专利]半滑舌鳎卵裂雌核发育鱼苗的诱导方法-CN200910206552.7无效
发明人：陈松林;季相山;田永胜;杨景峰;徐亘博;邵长伟 -专利权人：中国水产科学研究院黄海水产研究所
申请日： 2009-10-14 - 公布日： 2010-04-07 - 主分类号： A01K61/00 文献下载
摘要：一种半滑舌鳎卵裂雌核发育鱼苗的诱导方法，包括：半滑舌鳎精子冷冻保存、精子的紫外照射、卵裂雌核发育鱼苗的诱导及鉴定方法。本发明建立了半滑舌鳎精子冷冻保存方法，建立了采用静水压抑制第一次卵裂诱导半滑舌鳎雌核发育胚胎染色体加倍的方法，筛选到半滑舌鳎精子冷冻保存的有效稀释液和冷冻方法，筛选到适合半滑舌鳎卵裂雌核发育的静水压休克起始时间、静水压力和处理时间，建立了半滑舌鳎卵裂雌核发育鱼苗的鉴定方法。本方法首次获得了半滑舌鳎卵裂雌核发育鱼苗，雌核发育鱼苗诱导率可达0.25％；本发明具有先进、高效、实用、可靠的特点，可用于解决半滑舌鳎雄性生长慢、雌性比例低、养殖成本高的问题，在半滑舌鳎苗种繁育、性别控制
舌鳎卵裂核发鱼苗诱导方法

[发明专利]一种半滑舌鳎鳗弧菌病疫苗的制备方法-CN201010290119.9无效
发明人：阎斌伦;张晓君 -专利权人：淮海工学院
申请日： 2010-09-21 - 公布日： 2011-06-22 - 主分类号： A61K39/39 文献下载
摘要：本发明是一种半滑舌鳎鳗弧菌病疫苗的制备方法，其特征在于：它以半滑舌鳎病原鳗利斯顿氏菌BH1为免疫原，以黄芪浸出液为佐剂；其制备方法步骤如下：将鳗利斯顿氏菌BH1菌株接种在普通营养肉汤培养基上培养后，加入甲醛灭活，得灭活菌体；取黄芪用蒸馏水浸泡后煎煮，过滤，浓缩至终浓度为原药1g/ml，得黄芪浸出液；将灭活菌体与黄芪浸出液混合，制成半滑舌鳎鳗弧菌病疫苗。使用本发明方法制备的疫苗并进行半滑舌鳎免疫，能显著提高半滑舌鳎抗鳗弧菌感染的能力，可有效预防半滑舌鳎养殖生产中的鳗弧菌感染，减少半滑舌鳎死亡率，增加半滑舌鳎养殖的产量，保证半滑舌鳎养殖生产的健康和可持续发展，提高半滑舌鳎养殖生产的经济效益。
一种舌鳎弧菌疫苗制备方法

[发明专利]一种半滑舌鳎miRNA及其在调控tgfb2基因表达中的应用-CN202210239256.2有效
发明人：王娜;王佳林;石蕊;杨倩;程鹏;陈松林 -专利权人：中国水产科学研究院黄海水产研究所
申请日： 2022-03-09 - 公布日： 2023-06-16 - 主分类号： C12N15/113 文献下载
摘要：本发明涉及一种半滑舌鳎miRNA及其在调控tgfb2基因表达中的应用，属于分子生物学和基因工程技术领域，所述miRNA的名称为novel‑m0083‑3p，其序列如SEQ ID NO.1，其对应靶基因为半滑舌鳎本发明还提供所述半滑舌鳎miRNA在调控半滑舌鳎tgfb2基因表达的中的应用。本发明发现了调控半滑舌鳎tgfb2基因的miRNA，利用所述的miRNA能够调控tgfb2基因在半滑舌鳎体内的表达，从而调节半滑舌鳎的生长。
一种舌鳎 mirna 及其调控 tgfb2 基因表达中的应用

[发明专利]荧光原位杂交技术检测半滑舌鳎的性染色体组成的方法-CN201110100676.4无效
发明人：王旭波;张全启;高金宁;姜佳君;齐洁;王志刚;于海洋 -专利权人：中国海洋大学
申请日： 2011-04-21 - 公布日： 2011-08-31 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明涉及一种荧光原位杂交技术检测半滑舌鳎的性染色体组成的方法。其特征在于，用于原位杂交的探针为含有半滑舌鳎雌性特异DNA片段的fosmid或BAC克隆，在雌性半滑舌鳎的一个细胞或一个染色体分裂相中有一个荧光信号，而在超雌半滑舌鳎的一个细胞或一个染色体分裂相中有两个荧光信号本发明对半滑舌鳎的细胞或染色体分裂相进行荧光原位杂交分析，通过观察杂交信号分辨半滑舌鳎的性染色体组成，是一种有效的鉴定半滑舌鳎雌性个体和尤其是超雌个体的技术，为利用染色体操作技术进行半滑舌鳎全雌育种的研究提供技术手段
荧光原位杂交技术检测舌鳎染色体组成方法

[发明专利]一种基于肠道菌群评估半滑舌鳎细菌性肠炎风险的方法和应用-CN202211340260.4在审
发明人：王庆奎;王洋;谷雪勤;韩鑫怡;韩妞妞 -专利权人：天津农学院
申请日： 2022-10-28 - 公布日： 2023-03-28 - 主分类号： C12Q1/689 文献下载
摘要：本发明公开一种基于肠道菌群评估半滑舌鳎细菌性肠炎风险的方法，包括如下步骤：(1)采集肠道内容物；(2)确定半滑舌鳎肠道内容物细菌种类与比例；(3)评估肠炎风险。本发明通过采集、检测半滑舌鳎肠道内容物样本细菌的组成与比例，即可评估、判定半滑舌鳎是否患细菌性肠炎以及患肠炎的风险。本发明方法不需杀死待检半滑舌鳎即可评估其是否患细菌性肠炎，尤其适合半滑舌鳎亲鱼、选育后代等珍贵个体细菌性肠炎的评估与诊断。
一种基于肠道评估舌鳎细菌性肠炎风险方法应用

[发明专利]半滑舌鳎美人鱼发光杆菌疫苗的制备与使用方法-CN201110086569.0无效
发明人：张晓君;阎斌伦 -专利权人：淮海工学院
申请日： 2011-04-07 - 公布日： 2011-08-03 - 主分类号： A61K39/106 文献下载
摘要：本发明是一种半滑舌鳎美人鱼发光杆菌疫苗的制备方法，其特征在于：将美人鱼发光杆菌ST1菌株接种在普通营养琼脂肉汤培养基上，28℃培养24h，加入终浓度0.3%的甲醛28℃灭活48h，得灭活菌体；取黄芪用蒸馏水浸泡后煎煮，过滤，浓缩得黄芪浸出液；将灭活菌体与得黄芪浸出液混合制得半滑舌鳎美人鱼发光杆菌疫苗。本发明疫苗能使半滑舌鳎产生良好的免疫应答，增强半滑舌鳎对病原美人鱼发光杆菌的免疫力，提高半滑舌鳎养殖的成活率，增加半滑舌鳎养殖的产量，提高半滑舌鳎养殖生产的经济效益。从根本上解决了目前半滑舌鳎养殖生产过程中易发生美人鱼发光杆菌所致疾病的问题。本发明还公开了一种半滑舌鳎美人鱼发光杆菌疫苗的使用方法。
舌鳎美人鱼发光杆菌疫苗制备使用方法

[发明专利]半滑舌鳎微卫星标记HSTS_lx的检测方法-CN200710014192.1无效
发明人：刘云国;李八方 -专利权人：中国海洋大学
申请日： 2007-04-16 - 公布日： 2007-09-19 - 主分类号： G01N27/447 文献下载
摘要：一种半滑舌鳎微卫星标记HSTS_lx的检测方法。首先提取半滑舌鳎血液中的基因组DNA并稀释备用；再利用半滑舌鳎EST序列中含有的微卫星核心序列，在其序列两端设计特异性引物；然后使用该引物对半滑舌鳎不同地理群或半滑舌鳎群内个体的基因组DNA进行PCR扩增，对PCR产物进行检测；利用产物出现的条带进行分析，确定每个个体的基因型，并获得半滑舌鳎的遗传多态性图谱。本发明的特点是可快捷的获得半滑舌鳎遗传标记HSTS_lx的遗传变异图谱，方法简便。而且，相对于其它分子遗传标记技术而言微卫星标记符合孟德尔遗传模式，呈共显性遗传，所得结果可直观地检测出半滑舌鳎每个个体的基因型；应用于不同地理群或半滑舌鳎群内个体间遗传标记、系谱认证和遗传图谱的构建等。
舌鳎卫星标记 hsts_lx 检测方法

[发明专利]半滑舌鳎微卫星标记HSTS_yg的检测方法-CN200710014193.6无效
发明人：刘云国;李八方 -专利权人：中国海洋大学
申请日： 2007-04-16 - 公布日： 2007-10-31 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：一种半滑舌鳎微卫星标记HSTS_yg的检测方法。首先提取半滑舌鳎血液中的基因组DNA并稀释备用；再利用半滑舌鳎RAPD产物中含有的微卫星核心序列，在其序列两端设计特异性引物；然后使用该引物对半滑舌鳎不同地理群或半滑舌鳎群内个体的基因组DNA进行PCR扩增，对PCR产物进行检测；利用产物出现的条带进行分析，确定每个个体的基因型，并获得半滑舌鳎的遗传多态性图谱。本发明的特点是可快捷的获得半滑舌鳎遗传标记HSTS_yg的遗传变异图谱，方法简便。而且，相对于其它分子遗传标记技术而言微卫星标记符合孟德尔遗传模式，呈共显性遗传，所得结果可直观地检测出半滑舌鳎每个个体的基因型；应用于不同地理群或半滑舌鳎群内个体间遗传标记、系谱认证和遗传图谱的构建等。
舌鳎卫星标记 hsts_yg 检测方法

[发明专利]半滑舌鳎雌核发育二倍体鱼苗的诱导方法-CN200910262682.2无效
发明人：陈松林;田永胜;杨景峰;翟介明;邵长伟;廖小林;苏鹏志;季相山;徐建勇;武鹏飞 -专利权人：中国水产科学研究院黄海水产研究所
申请日： 2007-11-01 - 公布日： 2010-08-11 - 主分类号： A01K61/00 文献下载
摘要：一种半滑舌鳎雌核发育二倍体鱼苗的诱导方法，包括：半滑舌鳎卵子人工雌核发育方法，雌核发育鱼苗的鉴定方法。本发明首次建立了采用半滑舌鳎精子和花鲈精子诱导半滑舌鳎卵子雌核发育获得雌核发育二倍体鱼苗的方法，筛选到适合半滑舌鳎卵雌核发育的冷休克起始时间、冷休克温度和时间，建立了半滑舌鳎雌核发育鱼苗的鉴定方法。本方法获得雌核发育鱼苗诱导率为0.4-6.3％；本发明具有先进、高效、实用、可靠的特点，在半滑舌鳎性别控制和全雌育种上具有重大应用价值和广阔的推广应用前景。
舌鳎核发二倍体鱼苗诱导方法

[发明专利]半滑舌鳎雌性特异AFLP片段及遗传性别鉴定的PCR方法-CN200610044177.7无效
发明人：陈松林;李静;田永胜;沙珍霞;王清印;庄志猛;徐建勇 -专利权人：中国水产科学研究院黄海水产研究所
申请日： 2006-05-12 - 公布日： 2006-12-20 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：一种半滑舌鳎雌性特异AFLP片段及遗传性别鉴定的PCR方法，包括雌性特异AFLP片段的回收、AFLP片段的克隆、序列分析以及半滑舌鳎遗传性别鉴定的PCR方法；建立了分离和克隆半滑舌鳎雌性特异AFLP片段的技术，获得了雌性特异DNA片段，设计了特异的引物，将AFLP标记转化成SCAR标记，创建了半滑舌鳎遗传性别鉴定的PCR技术。本发明首次分离到半滑舌鳎雌性特异的DNA片段，查明了其DNA序列，建立了半滑舌鳎遗传性别鉴定的PCR分析技术。本发明具有先进、高效、准确、可靠的特点，在半滑舌鳎性别控制和单性苗种生产中具有重要应用价值，同时在其它鱼类遗传性别鉴定和性别控制研究中也具有应用前景。
舌鳎雌性特异 aflp 片段遗传性别鉴定 pcr 方法

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