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[发明专利]卵泡体外成熟方法-CN200980102429.9有效
发明人：刘奎 -专利权人：刘奎
申请日： 2009-01-19 - 公布日： 2010-12-29 - 主分类号： A61K33/24 文献下载
摘要：本发明涉及用于使卵泡和卵母细胞成熟的方法。更具体地，本发明涉及磷酸酶PTEN抑制剂(如氧钒酸和过氧钒酸配合物)在使卵泡和卵母细胞体外和体内成熟之方法中的用途。
卵泡体外成熟方法

[发明专利]促进水牛卵母细胞体外成熟的方法-CN201410614012.3在审
发明人：张明;李敏玲;陈富美 -专利权人：广西大学
申请日： 2014-11-04 - 公布日： 2015-01-28 - 主分类号： C12N5/075 文献下载
摘要：本发明公开了一种促进水牛卵母细胞体外成熟的方法，在水牛卵母细胞体外成熟培养液中添加一定浓度的EGCG进行成熟培养。研究表明，成熟22～24h后，卵母细胞第一极体排出率为59.31％；成熟卵母细胞经体外受精处理后，囊胚发育率高达24.68％；成熟卵母细胞经孤雌激活处理后，囊胚发育率高达31.69％。可见，水牛体外成熟培养液中添加EGCG有利于卵母细胞体外成熟和成熟后早期胚胎发育，本发明可以显著提高卵母细胞的体外成熟率和囊胚发育率。因此，应用本发明能显著促进卵母细胞的成熟，提高卵母细胞成熟率和成熟质量，从而能提高水牛体外胚胎生产效率。
促进水牛细胞体外成熟方法

[发明专利]小鼠裸卵体外成熟方法及小鼠裸卵体外成熟培养液-CN201310020667.3无效
发明人：杨盼;曹鸿国;章孝荣;张飞;张运海;刘亚;李运生;陶勇;方富贵 -专利权人：安徽农业大学
申请日： 2013-01-21 - 公布日： 2013-05-01 - 主分类号： C12N5/075 文献下载
摘要：本发明公开了小鼠裸卵体外成熟方法及小鼠裸卵体外成熟培养液。其中，小鼠裸卵体外成熟方法的步骤包括（1）小鼠裸卵的分离培养；（2）小鼠裸卵的成熟检测；（3）小鼠裸卵成熟后发育能力检测。小鼠裸卵体外成熟培养液由α-MEM+10%FBS+10ng/mlEGF+1.5U/mlhCG+1mM/mlGlu+0.23mM/ml丙酮酸钠+10uMForskolin组成。本发明通过在小鼠卵母细胞培养体系中添加同卵母细胞体外成熟相关的化学试剂，建立了小鼠裸卵体外高效成熟发育体系，该体系不仅能够有效人工调控小鼠裸卵的体外成熟，而且成熟后的裸卵能够具有正常卵母细胞形成胚胎的发育能力
小鼠体外成熟方法培养液

[发明专利]卵母细胞体外成熟培养液及其制备方法和应用-CN201910326404.2有效
发明人：胡敏华;周治东;杜志国;龙海斌;何嘉欣;石观稳;刘运忠;倪庆纯 -专利权人：广州医药研究总院有限公司
申请日： 2019-04-23 - 公布日： 2020-11-17 - 主分类号： C12N5/075 文献下载
摘要：本发明涉及一种卵母细胞体外成熟培养液及其制备方法和应用，卵母细胞体外成熟培养液包括发情母犬血清、发情母犬卵泡液和基础培养液。该卵母细胞体外成熟培养液可使犬COCs体外核成熟至MI‑MII阶段的比例稳定在45％左右，显著提高了犬COCs体外核成熟率，为犬卵母细胞体外成熟培养提供了新的思路。
细胞体外成熟培养液及其制备方法应用

[发明专利]水牛卵母细胞体外成熟培养方法-CN201610208646.8在审
发明人：苏雷 -专利权人：云南中科胚胎工程生物技术有限公司
申请日： 2016-04-06 - 公布日： 2016-06-01 - 主分类号： C12N5/075 文献下载
摘要：本发明的水牛卵母细胞体外成熟培养方法，其特征在于包括卵母细胞准备、IVM培养小滴制备以及体外成熟培养三个步骤，其采用的体外成熟培养液由TCM199、FBS、oFSH、17β-E₂、本发明的水牛卵母细胞体外成熟培养方法，能显著促进卵母细胞的细胞质成熟，解决了目前水牛体外成熟的卵母细胞受精后胚胎体外发育率低的问题；本发明的成熟培养液能促进水牛卵母细胞成熟发育，且对维持卵母细胞和早期胚胎形态有良好作用
水牛细胞体外成熟培养方法

[发明专利]改进牛卵母细胞体外成熟的方法-CN202010250266.7有效
发明人：郭晶;王小武;王娜;张月桥;郝少强;赵明礼;郭春明;许晓椿 -专利权人：天津力牧生物科技有限公司
申请日： 2020-04-01 - 公布日： 2022-06-03 - 主分类号： C12N5/075 文献下载
摘要：本发明涉及改进牛卵母细胞体外成熟的方法，具体地说，本发明涉及的牛卵母细胞体外成熟的方法包括如下步骤：(1)提供卵母细胞；(2)卵母细胞的体外成熟：使所述卵母细胞移入成熟培养液滴中，进行体外成熟培养，培养条件为100％湿度、38.5℃、5％CO2，体外成熟培养22～24h。所述成熟培养液包含：ECS、NaHCO3、EGCG、Hepe、雌二醇、BFF、黄体生成素、半胱氨酸、FSH(卵泡刺激素)、TCM‑199。本发明方法可以有效进发进牛卵母细胞体外成熟的性能。
改进牛卵母细胞体外成熟方法

[发明专利]小鼠裸卵体外成熟技术-CN200910015751.X无效
发明人：谭景和;周萍;吴延光;罗明久;李青;王刚;高达;魏德莉 -专利权人：山东农业大学
申请日： 2009-05-31 - 公布日： 2009-10-21 - 主分类号： C12N5/06 文献下载
摘要：本发明涉及一种小鼠裸卵体外成熟技术，属于生物技术领域。本发明为卵丘细胞利用胱氨酸和半胱胺提高了小鼠裸卵GSH合成和发育能力，进而建立了卵丘细胞共培养结合添加半胱胺和胱氨酸使小鼠裸卵完全恢复发育能力的体外成熟系统。小鼠裸卵在添加100-200μmol/l半胱胺和250-300μmol/l胱氨酸的TCM-199成熟培养液中与小鼠或山羊卵丘细胞共培养，其囊胚率达到添加相同巯基化合物培养成熟COC水平。将共培养成熟的裸卵和COC产生的2-细胞胚胎移植后，妊娠率和产仔数差异不显著。这是在国际上首次建立使小鼠裸卵完全恢复发育能力的体外成熟系统，对于动物胚胎工程以及人类辅助生殖技术研究和应用都有重要意义。
小鼠体外成熟技术

[发明专利]促进牛体外胚胎培养卵母细胞体外成熟的方法-CN201910421475.0在审
发明人：王小武;郭晶;王娜;郝少强;赵明礼;张月桥;杨尚斌;何伟;马毅;郭春明 -专利权人：天津博裕力牧科技有限公司;天津中科博雅生物育种研究有限公司;天津力牧鼎丰生物技术有限公司
申请日： 2019-05-21 - 公布日： 2019-07-30 - 主分类号： C12N5/073 文献下载
摘要：本发明涉及促进牛体外胚胎培养卵母细胞体外成熟的方法。其中牛体外受精胚胎培养的方法包括如下步骤：(1)卵母细胞的采集和体外成熟，在进行体外成熟操作时，将离体采集或者活体采集所得COCs在卵母细胞成熟培养液中洗涤1次，再转移到新的成熟培养液中培养22‑24h，培养条件为38.8℃、5.5‑6.5％CO2、饱和湿度；(2)体外受精；(3)胚胎体外培养及保存，保存时可以置入液氮中冷冻保存。特别地，采用本发明方法尤其是其中的成熟液可以有效提高卵母细胞体外成熟率。
卵母牛体胚胎培养体外成熟采集培养液成熟卵母细胞成熟胚胎体外培养成熟培养液冷冻保存卵母细胞培养条件受精胚胎体外受精保存成熟液活体离体液氮置入洗涤饱和

[发明专利]人成熟卵泡液在未成熟卵体外成熟技术中的应用-CN02112608.9无效
发明人：钱云;刘嘉茵;冒韵东;王淑玉;丁卫;杨乃明 -专利权人：南京医科大学第一附属医院
申请日： 2002-01-29 - 公布日： 2002-12-18 - 主分类号： C12N5/08 文献下载
摘要：本发明所述的含人成熟卵泡液的培养液用于人未成熟卵的体外培养技术,其成分由Ham′sF－10或TCM199,人代血清SSS,rFSH,HCG,17β雌二醇,以及人成熟卵泡液组成。利用未成熟卵体外成熟技术(IVM),将卵子成熟障碍的不孕症妇女的未成熟卵取出,采用本发明技术制备的培养液将其培养成熟,并在体外受精和进行胚胎移植,帮助其妊娠。获得了65%的卵子成熟率和33.3%的妊娠率。本发明技术提供了一种高效、价廉、方便的人卵子体外成熟的培养液,并有可能将其制成商品化的制剂,用于人未成熟卵的体外成熟技术。
成熟卵泡未成熟体外技术中的应用

[发明专利]一种提高卵母细胞体外成熟质量和效率的方法-CN201811219334.2在审
发明人：赵学明;朱化彬;郝海生;杜卫华;庞云渭;张燕;刘岩;赵亚涵 -专利权人：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
申请日： 2018-10-19 - 公布日： 2019-01-11 - 主分类号： C12N5/075 文献下载
摘要：本发明提供了一种提高卵母细胞体外成熟质量和效率的方法，所述方法包括在体外成熟过程中至少更换一次体外成熟液的步骤，以及进一步的包括在体外成熟液中添加一定量的FGF。本发明的方法制备的卵母细胞具有显著提高的细胞核成熟效率和细胞胞质成熟效率，MII期卵母细胞高达95％，皮质颗粒和线粒体正常分布的卵母细胞比例、谷胱甘肽和ATP水平均显著高于正常成熟组；在体外成熟液中添加一定量的FGF，可进一步提高了卵母细胞的成熟质量和效率。本发明的方法制备的卵母细胞经体外受精之后，体外受精效率显著高于正常成熟组，体现为更高的卵裂率、囊胚率和更多的囊胚细胞数，具有重大的应用价值。
卵母细胞成熟体外成熟卵母制备体外受精效率细胞核谷胱甘肽囊胚细胞皮质颗粒体外受精细胞胞质成熟液卵裂率囊胚率线粒体次体应用

[发明专利]一种卵母细胞体外成熟培养液的制备方法-CN202110283271.2有效
发明人：包云;余柯达;柴娟;毛佳婷;师帅 -专利权人：金华市人民医院
申请日： 2021-03-17 - 公布日： 2023-05-02 - 主分类号： C12N5/075 文献下载
摘要：本发明公开了一种卵母细胞体外成熟培养液的制备方法，包括以下步骤：(1)用PBS制备200mmol/L的肌肽溶液；(2)将步骤(1)中的肌肽溶液加入IVM未成熟卵培养液中，形成体外成熟培养液；(3)将步骤(2)所得的体外成熟培养液通过20‑25μm的滤膜进行过滤，最终得卵母细胞体外成熟培养液。肌肽能够有效促进未成熟卵母细胞的体外成熟及提高卵母细胞的质量。
一种细胞体外成熟培养液制备方法

[发明专利]用于绵羊卵母细胞体外成熟的方法及预处理液和试剂盒-CN201410369750.6有效
发明人：张家新;赵丽霞;陈秀亮 -专利权人：张家新
申请日： 2014-07-28 - 公布日： 2014-11-05 - 主分类号： C12N5/075 文献下载
摘要：本发明公开了用于绵羊卵母细胞体外成熟的方法及预处理液和试剂盒。本发明涉及用于绵羊卵母细胞体外成熟的预处理液，其特征在于：包含绵羊小卵泡液和用于绵羊卵母细胞体外成熟的常规培养液成分。本发明还公开了一种绵羊卵母细胞体外成熟的方法，其特征在于在常规体外成熟方法的基础上增加了预处理步骤。同时，本发明还验证了采用本发明的成熟方法培养的卵母细胞体外受精后获得的受精卵的卵裂率和囊胚率显著高于常规成熟方法培养的卵母细胞。本发明提供的预处理液和体外成熟培养方法能有效地促进绵羊卵母细胞体外成熟，具有对卵母细胞无毒害、限制少、效果好等特点。
用于绵羊细胞体外成熟方法预处理试剂盒

[发明专利]小鼠裸卵的体外成熟培养方法-CN201410120868.5无效
发明人：卞雅妮;曹鸿国;章孝荣;张飞;魏超;李运生;刘亚;张运海;方富贵 -专利权人：安徽农业大学
申请日： 2014-03-27 - 公布日： 2014-07-02 - 主分类号： C12N5/075 文献下载
摘要：本发明公开了小鼠裸卵的体外成熟培养方法，包括以下步骤：（1）裸卵的体外成熟培养；（2）成熟裸卵的孤雌激活；（3）成熟裸卵的体外受精。本发明能够创造一个人工模拟卵母细胞自然发生成熟的环境，使裸卵在体外能够高效成熟发育，并且裸卵体外培养成熟后具备同正常发育的卵母细胞一样能够体外受精和胚胎发育。实践证实，该体系裸卵体外成熟发育效率高，体系成熟稳定，裸卵体外自然受精后胚胎发育质量高，因此，本发明能够极大地促进裸卵在人类生殖健康和现代家畜遗传育种中的应用和推广。
小鼠体外成熟培养方法

[发明专利]小卵泡卵母细胞的体外成熟培养液及其应用-CN201610291108.X有效
发明人：夏国良;张延浩;王超 -专利权人：中国农业大学
申请日： 2016-05-04 - 公布日： 2021-05-14 - 主分类号： C12N5/075 文献下载
摘要：本发明涉及细胞培养，具体公开了一种小卵泡卵母细胞的体外成熟培养液，其含有100nM的E2和100ng/mL的CNP/BNP。本发明还提供了所述体外成熟培养液在促进小卵泡卵母细胞体外成熟或抑制小卵泡卵母细胞减数分裂中的应用及一种促进卵母细胞体外成熟的培养方法，具体为：采集动物的卵母细胞，按卵泡直径大小分类：将小卵泡卵母细胞置于前述的体外成熟培养液中进行前成熟培养，培养时间为20h，然后在成熟液内培养46±2h；将大卵泡卵母细胞直接在成熟液中培养46±2h。本发明采用两段体外成熟培养方法，应用CNP/BNP和E2前成熟处理小卵泡卵母细胞，促进核成熟和胞质成熟同步，提高了体外发育能力，能够成为新型的减数分裂抑制药物在畜牧业成产上推广应用。
卵泡细胞体外成熟培养液及其应用

[发明专利]一种提高羔羊体外胚胎发育能力的方法-CN201710790139.4有效
发明人：侯健;田浩;关宏;闫凤祥 -专利权人：中国农业大学
申请日： 2017-09-05 - 公布日： 2021-06-01 - 主分类号： C12N5/075 文献下载
摘要：本发明公开了一种提高羔羊体外胚胎发育能力的方法。本发明提供了一种促进羔羊卵子体外成熟的方法，为将离体羔羊的卵母卵丘细胞复合体在添加成年羊卵泡液的促卵子成熟培养液中进行体外成熟培养，实现促进羔羊卵子体外成熟。本发明用添加成年羊卵泡液的促卵子成熟培养液来培养羔羊卵母细胞，卵子成熟后通过体外受精生产体外胚胎，可以显著提高羔羊胚胎的发育能力。该方法简单易行，材料来源方便。
一种提高羔羊体外胚胎发育能力方法

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