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[发明专利]重组系统-CN201380024889.0有效
发明人：娜塔丽·维森哈恩;凯瑟琳娜·佩特罗内拉·安东尼娅·玛丽亚·科伦;伯纳德·迈瑞克;维克多·布尔;约翰尼斯·安德列什·劳博斯;伊万内·约翰内斯·奥迪利亚·亚伦德森 -专利权人：帝斯曼知识产权资产管理有限公司
申请日： 2013-03-12 - 公布日： 2018-10-16 - 主分类号： C12N15/63 文献下载
摘要：本发明涉及在靶位点进行重组的方法，该方法包括：提供两种或更多种核酸，它们总共包含：(a)能够与靶位点侧翼序列同源重组的序列；(b)两个或更多个位点特异性重组位点；和(c)编码识别位点特异性重组位点的重组酶的序列，其中所述两种或更多种核酸能够相互同源重组从而产生单一核酸，并且其中所述两种或更多种核酸中的至少两种各包含编码无功能的部分重组酶的序列；以及使所述两种或更多种核酸相互重组以及与靶位点的侧翼序列重组，以在靶位点插入编码有功能重组酶的连续核酸序列，所述编码重组酶的序列的侧翼是至少两个位点特异性重组位点以及所述位点特异性重组位点的侧翼是能够与靶位点的侧翼序列同源重组的序列。
重组系统

[发明专利]在哺乳动物细胞内进行位点特异性重组的方法及系统-CN201010159522.8无效
发明人：杨淑伟;刘恺 -专利权人：中国科学院上海生命科学研究院
申请日： 2010-04-29 - 公布日： 2011-11-09 - 主分类号： C12N15/52 文献下载
摘要：本发明中提供了一种在哺乳动物细胞内进行位点特异性重组的方法及系统。具体而言，本发明中提供了可在哺乳动物内表达并介导位点特异性重组的整合酶基因，由其表达的整合酶或该整合酶的保守性变异多肽、或其活性片段、或其活性衍生物，以及采用所述整合酶基因或整合酶在哺乳动物细胞中进行位点特异性重组的方法本发明的整合酶或其基因在哺乳动物细胞中所介导的位点特异性重组具有简便、稳定等诸多优点，为本领域提供了有力的研究和开发工具。
哺乳动物细胞内进行特异性重组方法系统

[发明专利]一种基因组整合外源序列的方法-CN202010152728.1有效
发明人：尹进;张倩;董一名;李腾;张浩千 -专利权人：深圳蓝晶生物科技有限公司
申请日： 2020-03-06 - 公布日： 2023-05-23 - 主分类号： C12N15/74 文献下载
摘要：所述方法包括以下步骤：1)在罗氏真养菌的基因组上插入位点特异性重组酶Bxb1对应的attB位点以构建基因组上整合了attB序列的重组罗氏真氧菌；2)构建含有外源序列、位点特异性重组酶Bxb1基因、位点特异性重组酶Bxb1对应的attP序列的重组载体；3)将步骤2)中构建的所述重组载体转入步骤1)中构建的所述重组罗氏真氧菌中，利用所述位点特异性重组酶Bxb1介导attB和attP序列之间的重组，从而将所述重组载体整合到所述重组罗氏真氧菌的基因组上
一种基因组整合序列方法

[发明专利]一种位点特异重组酶、其制备方法及应用-CN200710172188.8无效
发明人：朱焕章;刘韶辉;马金芳;辛清婷;彭斯曼;唐丽莎;余龙 -专利权人：复旦大学
申请日： 2007-12-13 - 公布日： 2008-05-28 - 主分类号： C12N9/22 文献下载
摘要：本发明属于遗传工程领域，具体涉及一种位点特异重组酶、其制备方法及应用。本发明提供了一种新的位点特异重组酶，该位点特异重组酶特异性的识别下列结构式所示脱氧核苷酸序列，在箭头位置裂解所示脱氧核苷酸序列，并将attB识别位点的序列与下列结构式所示序列在裂解位点重新连接，(见图)本发明的位点特异重组酶能够特异性的识别基因组MpsL1位点，具有较高活性，因而，本发明的位点特异重组酶将成为遗传工程技术操作，尤其是基因定点插入重组的有效工具。
一种特异重组制备方法应用

[发明专利]重组系统-CN201380024895.6有效
发明人：诺尔·尼克拉斯·玛利亚·伊丽莎白·佩吉·范;马帝那·贝舒森;伊万内·约翰内斯·奥迪利亚·亚伦德森 -专利权人：帝斯曼知识产权资产管理有限公司
申请日： 2013-03-12 - 公布日： 2019-09-10 - 主分类号： C12N15/63 文献下载
摘要：本发明涉及在靶位点进行重组的方法，该方法包括：提供两种或更多种核酸，它们总共包含：(a)能够与靶位点侧翼序列同源重组的序列；(b)两个或更多个位点特异性重组位点；(c)编码识别位点特异性重组位点的重组酶的序列；和(d)编码标记的序列，其中所述两种或更多种核酸能够相互同源重组从而产生单一核酸，并且其中所述两种或更多种核酸中的至少两种各包含编码无功能的部分标记的序列；以及使所述两种或更多种核酸相互重组以及与靶位点的侧翼序列重组，以在靶位点插入编码有功能标记的连续核酸序列和编码重组酶的序列，所述编码标记和/或重组酶的序列的侧翼是至少两个位点特异性重组位点以及所述位点特异性重组位点的侧翼是能够与靶位点的侧翼序列同源重组的序列。
重组系统

[发明专利]自删除质粒-CN201180032633.5有效
发明人：罗基·马尔科·科瑞安恩波格;马修·威廉·莱肯拜 -专利权人：科步尔生物制剂有限公司
申请日： 2011-06-28 - 公布日： 2013-05-08 - 主分类号： C12N15/64 文献下载
摘要：提供了制备无选择标记基因的质粒的方法，包括在不能实现位点特异性重组酶靶位点之间的重组的宿主细胞环境中培养含有选择标记基因的质粒，选择标记基因的侧翼为位点特异性重组酶靶位点，随后在能实现位点特异性重组酶靶位点之间的重组的另一宿主细胞环境中培养所述质粒还提供了通过所述方法制备的质粒在制备用于治疗和疫苗目的的重组蛋白、制备治疗性DNA和DNA疫苗以及使用活细菌载体向患者递送重组蛋白和DNA中的用途。
删除质粒

[发明专利]利用位点特异性重组生产重组病毒的方法-CN03805638.0无效
发明人：孙昊瑄;郑年哲;申东承;金敬真;赵成恩;崔恩旭 -专利权人：纽罗金耐克斯有限公司
申请日： 2003-03-08 - 公布日： 2005-07-13 - 主分类号： C12N7/01 文献下载
摘要：本发明公开了使用体外位点特异性重组生产重组病毒的方法。在本发明中，在体外将线形病毒基因组DNA消化成两个片段，并使之和旁侧有位点特异性重组酶位点的所需基因组物质发生位点特异性重组。根据本发明，由于位点特异性重组混合物可以应用于宿主细胞，而不需要进一步选择重组病毒基因组DNA的步骤，有可能同时快速获得多种重组病毒。因此，本发明可以用做高通量系统，以生产上百种或上千种重组病毒。
利用特异性重组生产病毒方法

[发明专利]一种φC31位点特异重组酶突变体、其制备方法及应用-CN200710172183.5无效
发明人：朱焕章;辛清婷;马金芳;刘韶辉;唐丽莎;彭斯曼;余龙 -专利权人：复旦大学
申请日： 2007-12-13 - 公布日： 2009-06-17 - 主分类号： C12N9/00 文献下载
摘要：本发明属于遗传工程领域，具体涉及一种位点特异重组酶、其制备方法及应用。ΦC31位点特异重组酶已成为哺乳细胞遗传操作的有效工具，但其在哺乳细胞上介导整合位点特异性以及整合效率有待于进一步提高。为此，本发明提供了一种ΦC31位点特异重组酶突变体。本发明的ΦC31位点特异重组酶突变体，能特异性识别基因组MpsL1位点，具有较高活性，因而，本发明的位点特异重组酶将成为遗传工程技术操作，尤其是基因定点插入重组的有效工具，而且为基因功能分析和基因治疗的研究开辟了新途径
一种 c31 特异重组突变体制备方法应用

[发明专利]基因组编辑的方法和组合物-CN201980042919.8在审
发明人：安德烈·罗纳德·沃森;克里斯蒂安·福斯特;林帅亮 -专利权人：利甘达尔股份有限公司
申请日： 2019-04-24 - 公布日： 2021-03-23 - 主分类号： A61K48/00 文献下载
摘要：在一些实施例中，递送媒介物包含有效负载，该有效负载包含(a)剪切细胞的基因组的一种或多种序列特异性核酸酶或编码它们的一种或多种核酸，(b)第一供体DNA，其包含被插入细胞的基因组中的核苷酸序列，其中所述核苷酸序列的插入在细胞的基因组中的插入位点产生位点特异性重组酶的靶序列(例如，attP位点)；(c)位点特异性重组酶(或编码它的核酸)(例如，ΦC31，ΦC31RDF，Cre，FLP)，其中位点特异性重组酶识别所述靶序列；和(d)第二供体DNA，其包含核苷酸序列，由于位点特异性重组酶对所述靶序列的识别
基因组编辑方法组合

[发明专利]一种条件性基因表达调控系统-CN201710265611.2有效
发明人：肖丹;胡大海;蔡维霞;吴高峰;贾艳慧;黎跃华;赵彬 -专利权人：中国人民解放军第四军医大学
申请日： 2017-04-21 - 公布日： 2019-07-12 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明公开了一种条件性基因表达调控系统，该系统由目标基因的表达载体和位点特异性重组酶的表达载体两部分组成，目标基因的读码框中插入了内含子序列，在内含子序列中插入一个位点特异性重组酶的识别序列，在目标基因的5＇或者3＇端也插入一个位点特异性重组酶的识别序列，两个识别序列的方向相反且两者之间的DNA片段反向放置。本发明使得正常情况下目标基因不能表达，在位点特异性重组酶的作用下，两个识别序列发生重组使得两者之间的DNA片段方向发生颠倒，从而使目标基因恢复正常表达。
目标基因位点特异性重组酶条件性基因表达表达载体调控系统特异性重组酶内含子序列反向放置读码框子序列在位颠倒

[发明专利]Rasamsonia转化体-CN201380013996.3在审
发明人：埃里克·皮特·洛斯;伊万内·约翰内斯·奥迪利亚·亚伦德森;阿德里安努斯·维尔赫穆斯·赫曼努斯·沃勒布里吉特 -专利权人：帝斯曼知识产权资产管理有限公司
申请日： 2013-03-12 - 公布日： 2015-08-12 - 主分类号： C12N15/90 文献下载
摘要：本发明涉及在Rasamsonia细胞的靶位点实施重组的方法，其中所述方法包括：-提供两种或多种核酸，它们总共包含：(a)能够与靶位点的侧翼序列同源重组的序列；(b)两个或多个位点特异性重组位点；(c)编码识别位点特异性重组位点的重组酶的序列；和(d)编码标记的序列，其中所述的两种或多种核酸能够相互同源重组以产生一种核酸，和其中所述的两种或多种核酸中的至少两种各包含编码无功能的部分标记的序列；和-在Rasamsonia细胞中，使所述的两种或多种核酸相互重组并与靶位点的侧翼序列重组，以在靶位点插入编码有功能标记的连续核酸序列和编码重组酶的序列，所述编码标记和/或编码重组酶的序列的侧翼是至少两个位点特异性重组位点且所述位点特异性重组位点的侧翼是能够与靶位点的侧翼序列同源重组的序列，从而在Rasamsonia细胞的靶位点实施重组。
rasamsonia 转化

[发明专利]利用位点特异性重组生产重组病毒的高通量系统-CN03805643.7有效
发明人：孙昊瑄;金度希;郑年哲;崔恩旭;申东承;金珉成;李龙源;金敬真 -专利权人：纽罗金耐克斯有限公司
申请日： 2003-03-08 - 公布日： 2005-07-13 - 主分类号： C12N7/01 文献下载
摘要：本发明公开了使用体外位点特异性重组生产重组病毒的方法。本发明中，在体外将环形病毒基因组DNA消化成线形的病毒基因组DNA，并使之和旁侧有位点特异性重组酶位点的所需基因组物质发生位点特异性重组。根据本发明，由于位点特异性重组混合物可以应用于宿主细胞，而不需要进一步选择重组病毒基因组DNA的步骤，有可能同时快速获得多种重组病毒。因此，本发明可以用做高通量系统，用于生产及筛选上百种或上千种重组病毒。
利用特异性重组生产病毒通量系统

[发明专利]一种基于位点特异性重组的抗生素生物合成基因簇的克隆方法-CN201210508069.6无效
发明人：张渤;丁晓明;赵国屏 -专利权人：复旦大学
申请日： 2012-12-03 - 公布日： 2013-04-24 - 主分类号： C12N15/74 文献下载
摘要：本发明属于生物技术和基因工程领域，具体为一种基于位点特异性重组系统实现抗生素生物合成基因簇克隆的方法。本发明是基于链霉菌噬菌体φBT1自身编码的整合酶所介导的位点特异性重组反应，先通过同源重组的方式对抗生素产生菌株进行遗传改造，在靶标基因簇的两端分别插入BAC载体、抗性基因和φBT1整合酶所识别的位点特异性重组位点attB和attP，抽提染色体基因组片段，在φBT1整合酶的作用下于体外使attB和attP位点之间发生位点特异性重组反应，靶标基因簇自身环化，从而实现几十甚至几百kb的大片段抗生素生物合成基因簇的克隆
一种基于特异性重组抗生素生物合成基因克隆方法

[发明专利]DNA构建体和制备具有条件突变型Acvr1等位基因的小鼠的方法-CN201480015186.6有效
发明人： A·N·艾科诺米德斯;S·J·哈特赛尔 -专利权人：瑞泽恩制药公司
申请日： 2014-03-13 - 公布日： 2018-02-06 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：提供了包含含有突变的外显子的条件Acvr1等位基因的经遗传修饰的小鼠，其在诱导后转化成突变型外显子表型，其中突变型外显子表型包括异位骨形成。提供了包含侧翼连接有位点特异性重组酶识别位点的以反义方向排列的突变型Acvr1外显示子5的小鼠，其中所述小鼠还包含识别位点特异性重组酶识别位点的位点特异性重组酶，其中所述重组酶在小鼠暴露于他莫西芬后被诱导在暴露于他莫西芬后，所述重组酶被表达并作用于RRS‑侧翼连接的突变型外显子5，以及以有义方向放置突变型外显子5并且缺失野生型外显子。
具有条件 acvr1 突变型等位基因啮齿类动物

[发明专利]一种平衡染色体动物模型的构建方法-CN202310878186.X在审
发明人：琚存祥;张宇曦;张明坤;侯欢欢;赵静 -专利权人：江苏集萃药康生物科技股份有限公司
申请日： 2020-04-29 - 公布日： 2023-10-27 - 主分类号： C12N15/90 文献下载
摘要：本发明提供了一种近乎完整染色体倒置的平衡染色体以及具有平衡染色体动物模型的构建方法，使用位点特异性重组酶系统介导的重组技术，在染色体着丝粒侧插入片段1，包括位点特异性重组酶系统一侧识别位点，该位点的上游具有正选择标记基因表达元件片段A；在端粒侧插入片段2，包括位点特异性重组酶系统另侧识别位点，该位点的上游具有反向的正选择标记基因表达元件片段B，经相应的位点特异性重组酶诱导实现两个位点特异性重组酶系统识别位点之间的序列倒置，正选择标记基因表达元件片段
一种平衡染色体动物模型构建方法

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