[发明专利]人脐带间充质干细胞成软骨诱导分化培养基、配制方法及其应用在审

专利信息
申请号: 202211282268.X 申请日: 2022-10-19
公开(公告)号: CN115637252A 公开(公告)日: 2023-01-24
发明(设计)人: 徐道俊;吴茂友;周巧;李美玲 申请(专利权)人: 赛德特生物制药有限公司
主分类号: C12N5/077 分类号: C12N5/077;C12N5/0775;C12Q1/02
代理公司: 北京三友知识产权代理有限公司 11127 代理人: 韩蕾;张德斌
地址: 610000 四川省成都市金牛高新*** 国省代码: 四川;51
权利要求书: 查看更多 说明书: 查看更多
摘要: 发明公开了一种人脐带间充质干细胞成软骨诱导分化培养基、配制方法及其应用。所述培养基包括基础培养基、诱导因子和添加因子;其中诱导因子包括:地塞米松、TGF‑β1、维生素C磷酸盐和ITS+1;添加因子包括:泽泻醇B;泽泻醇B的加入量为50μmol/L以上。本发明同时提供了所述培养基的配制方法。本发明还提供一种人脐带间充质干细胞体外诱导定向分化软骨细胞及软骨细胞量化的方法,并提供该方法所得到的软骨细胞。本发明向经典成软骨诱导分化完全培养基中添加一定量的泽泻醇B,所得诱导分化培养基可以显著增加软骨细胞的分化数量。
搜索关键词: 脐带 间充质 干细胞 软骨 诱导 分化 培养基 配制 方法 及其 应用
【主权项】:
暂无信息
下载完整专利技术内容需要扣除积分,VIP会员可以免费下载。

该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息,商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于赛德特生物制药有限公司,未经赛德特生物制药有限公司许可,擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作,请联系【客服

本文链接:http://www.vipzhuanli.com/patent/202211282268.X/,转载请声明来源钻瓜专利网。

同类专利
  • 一种人骨膜单细胞悬液制备方法-202310844723.9
  • 郑圣晗;李志芬;郑智鸿;李常胜;林建雄 - 杭州联川生物技术股份有限公司
  • 2023-07-11 - 2023-10-27 - C12N5/077
  • 本发明公开了一种人骨膜单细胞悬液制备方法及应用,所述方法先将人骨膜组织分别利用第一解离液、第二解离液和第三解离液进行3次消化,然后进行红细胞裂解,制备得到人骨膜单细胞悬液,其中,第一解离液为链霉蛋白酶,弹性蛋白酶,透明质酸酶和胶原酶II型溶于细胞培养基中配制而成的混合酶解离液,第二解离液为0.5mg/mL胶原酶P溶液,第三解离液为0.25%的胰蛋白酶‑EDTA溶液。该方法操作简单,试剂材料易获取,无有害成分,安全环保。本发明的方法采用多步消化法,有很高的可重复性和成功率,能够稳定地得到高活率且杂质低的人骨膜单细胞悬液,能很好地应用于单细胞检测。
  • 环状RNA circCOPS8在促进成肌细胞分化中的应用-202310768852.4
  • 李辉;陈孟杰;刘庆友;孙萍;宋明明;刘兴宇;曲秀文;石德顺 - 广西大学
  • 2023-06-27 - 2023-10-27 - C12N5/077
  • 本发明公开了环状RNA circCOPS8在促进成肌细胞分化中的应用。本发明从水牛中发现并克隆了一种来源于COPS8基因的与成肌细胞分化相关的环状RNA,将其命名为circCOPS8。本发明发现过表达circCOPS8可促进成肌细胞的分化,可将其用于肉牛的分子育种。此外,本发明还发现过表达circCOPS8可促进肌肉损伤修复。本发明不仅提供了环状RNA circCOPS8在促进成肌细胞分化中的应用,同时还提供了促进成肌细胞分化的方法,丰富了家畜肌肉发育分子机制,有助于我国肉牛分子育种的发展。
  • 一种动物组织来源的凋亡囊泡的制备方法及其应用-202211592026.0
  • 刘云松;张晓;朱原;刘垚杉 - 北京大学口腔医学院
  • 2022-12-12 - 2023-10-27 - C12N5/077
  • 本发明提供了一种动物组织来源的凋亡囊泡的制备方法,该方法步骤如下:分离动物组织并剪碎、在含有星形孢菌素的培养基中诱导凋亡、通过梯度离心法分离得到组织来源的凋亡囊泡。本发明首次以动物组织为起始材料制备凋亡囊泡,制备方法简单,时间短,产量高,成本低。通过本发明的方法制备的凋亡囊泡具有调控大鼠骨髓间充质干细胞活性、促进大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化、促进成纤维细胞迁移等作用,在相关疾病的治疗中具有广阔的应用前景。
  • 一种消化及传代细胞的培养方法-202311077287.3
  • 张燕军;尚方正;潘剑锋;马荣;戎友俊;郭富荣;吕琦;王志英;王瑞军;苏蕊 - 内蒙古农业大学
  • 2023-08-24 - 2023-10-24 - C12N5/077
  • 本发明属于分子生物学技术领域,具体涉及一种消化及传代细胞的培养方法。所述培养方法为:准备需要进行消化与传代的细胞;吸弃旧培养基并对细胞培养板进行清洗,得到保留贴壁细胞的细胞培养板;于保留贴壁细胞的细胞培养板中加入胰蛋白酶‑EDTA溶液,以覆盖所述贴壁细胞,覆盖完成后吸弃胰蛋白酶‑EDTA溶液,并等待细胞至消化完全;继续加入完全培养基并对细胞进行吹打至细胞混匀,然后另取培养器皿进行培育即可。本发明所述的消化及传代细胞的培养方法,能够缩短细胞消化人为操作周期,提高工作效率;同时,明显减少操作步骤,能避免或减少细胞污染情况的发生以及对细胞的损伤;另外还能减少试剂与耗材的使用,降低试验成本。
  • 一种离体培养心肌细胞的解离液及解离方法-202210996325.4
  • 陆曼;付丽娜;马静;辛文 - 北京全式金生物技术股份有限公司
  • 2022-08-19 - 2023-10-20 - C12N5/077
  • 本发明公开一种离体培养心肌细胞的解离液及解离方法,属于干细胞生物学与再生医学领域。本发明的用于离体培养心肌细胞的解离液包括Tryple、Dispase II、胰蛋白酶、DnaseⅠ和blebbistatin。其中,Tryple、Dispase II、胰蛋白酶和DnaseⅠ作为混合消化液,起到消化解离的作用。而blebbistatin作为消化过程中的保护剂。本发明还公开了解离方法,使用本发明的解离液以及解离方法可快速高效的获得活率高于85%的离体培养的心肌细胞且获得较多数量的心肌活细胞。
  • 胆甾相纤维素纳米晶薄膜在增强细胞黏附上的应用-202210565487.2
  • 徐福建;王晓逍;丁小康 - 北京化工大学
  • 2022-05-23 - 2023-10-20 - C12N5/077
  • 本发明公开了胆甾相纤维素纳米晶薄膜在增强细胞黏附上的应用,将细胞在形成取向结构的纤维素纳米晶薄膜上进行培养,能够增强细胞黏附,所述的胆甾相纤维素纳米晶薄膜通过如下方法制得:将纤维素纳米晶悬浮液的浓缩液加入超纯水稀释成稀溶液,转移到放置多巴胺负载的玻片的称量皿中,室温下静置2‑3天,通过缓慢蒸发诱导纤维素纳米晶自组装,得到在玻片上具有取向结构的纤维素纳米晶薄膜。
  • 一种甲醛固定的肌肉组织肌梭的快速分离方法-202210404747.8
  • 赵雪红;宋肖;凌振航;丁露;周茜;范晓航;杨林;李薇 - 湖北文理学院
  • 2022-04-18 - 2023-10-17 - C12N5/077
  • 本发明公开了一种甲醛固定的肌肉组织肌梭的快速分离方法,它涉及一种快速分离肌梭的方法。包括以下步骤:1、新鲜分离的骨骼肌标本置入10%中性甲醛固定液中过夜;2、将固定好的肌肉组织流水冲洗,充分去除固定液;3、标本放入分解液中进行消化;4、在体视显微镜下观察、分离肌梭,拍照。本发明将肌肉内的结缔组织进行分解,使组织软化有助于肌梭的快速辨认和分离;用本消化方法分离出的肌梭,表面干净,免疫染色结果清晰,核袋纤维和核链纤维的区分简单易行。
  • 一种高效增殖培养基在鱼细胞培养中的应用-202310722382.8
  • 陈启和;张圣良;刘东红;徐恩波;芦红云 - 浙江大学
  • 2023-06-19 - 2023-10-10 - C12N5/077
  • 本发明提供了一种高效增殖培养基在鱼细胞培养中的应用,属于基因工程技术领域;所述高效增殖培养基包括基础培养基和胎牛血清;所述基础培养基包括DMEM/F12培养基或F10培养基。采用本发明的高效增殖培养基用于大黄鱼肌卫星细胞培养时,培养时间显著缩短,且获得的细胞形态正常并维持了细胞干性,满足细胞培养要求。相较于通用培养基(DMEM高糖,100μL/mL的胎牛血清),本发明提供的高效增殖培养基降低了培养时间,节约了培养成本,提高了培养效率,适合大规模产业化应用。
  • 一种诱导干细胞成骨分化的方法-202310962015.5
  • 曾烨;姚杏红;沈钧怡 - 四川大学
  • 2023-08-01 - 2023-10-10 - C12N5/077
  • 本发明公开了一种诱导干细胞成骨分化的方法,该方法包括以下步骤:通过具有多个正多边形微图案的水凝胶诱导干细胞成骨分化;其中,正多边形边长大于等于干细胞短轴长,相邻两个正多边形的间距小于等于干细胞短轴长采用本发明方法可以有效诱导干细胞成骨分化,分化过程不需要限定细胞生长形成微图案形貌,也不需要添加化学诱导剂,采用本发明方法对干细胞进行诱导成骨分化,其效果比化学诱导剂效果还优异。
  • 一种基于粘弹性水凝胶实现细胞回春的方法-202310795209.0
  • 李一伟;刘笔锋;任雪晴;陈鹏 - 华中科技大学
  • 2023-06-30 - 2023-10-03 - C12N5/077
  • 本发明涉及一种基于粘弹性水凝胶实现细胞回春的方法,属于细胞生物学技术领域。将成纤维细胞或间充质细胞在粘弹性水凝胶上进行接触培养,所述成纤维细胞或间充质细胞与粘弹性水凝胶相互作用,使得成纤维细胞或间充质细胞聚集,以实现所述成纤维细胞或间充质细胞回春。以实现所述成纤维细胞或间充质细胞回春。本发明通过与细胞接触培养实现细胞回春,整个过程只需要6天左右,得到的细胞具有多项分化潜能,不需要额外添加诱导因子,操作简单,安全性高。
  • 孕期强的松暴露所致胎源性骨关节炎模型的构建方法、干预靶标及其应用-202310766443.0
  • 汪晖;陈廖斌;胡文;刘亮;戴永国 - 武汉大学
  • 2023-06-26 - 2023-09-29 - C12N5/077
  • 本发明公开了了一种孕期强的松暴露所致胎源性骨关节炎模型的构建方法、干预靶标及其应用。circGtdc1为一种新鉴定的circRNA,其在孕期强的松暴露所致发育不良的软骨中改变最明显。RNase R、AcD和Sanger测序确认了其环化。强的松龙浓度依赖性降低软骨细胞中circGtdc1表达。沉默circGtdc1可明显抑制软骨细胞增殖和基质合成基因表达,而过表达circGtdc1则具有相反的效应,并能逆转强的松龙的作用。关节腔注射AAV‑circGtdc1过表达circGtdc1可逆转孕期强的松暴露所致的软骨发育不良。本发明所建立的干预靶标新颖、可靠、简便,为早期防治胎源性骨关节炎提供了可能。
  • 一种细胞低氧模型建立的方法-202310480611.X
  • 李云鹏;靳丹;孔亮;张凯;张浚睿;刘富伟;陆斌;任睿;张泽柔 - 中国人民解放军空军军医大学
  • 2023-04-28 - 2023-09-29 - C12N5/077
  • 本发明公开了一种细胞低氧模型建立的方法,属于细胞模型构建技术领域。该方法包括以下步骤:将细胞培养至80%融合度后进行传代培养,将传代后的细胞接种到O2浓度为1.5%的密闭容器中进行低氧处理,构建细胞低氧模型,所述密闭容器中还包括CO2和N2,所述CO2浓度为5%,所述N2浓度为93.5%,所述低氧处理的时间为24‑48h,所述接种的细胞密度为1×104‑5×104/ml。本发明构建细胞低氧模型的方法不需要借助实验动物,也不依赖价格昂贵的特定设备,建模成本低,易于操作,解决了需要在低氧环境下培养细胞,研究缺血缺氧性疾病,但是没有三气培养箱设备的问题。
  • 一种促进成纤维细胞向肌成纤维细胞分化的方法及其应用-202310589492.1
  • 刘云松;夏丹丹;杨帆 - 北京大学口腔医学院
  • 2023-05-24 - 2023-09-29 - C12N5/077
  • 本发明涉及锌离子、镁离子联合应用在人成纤维细胞向人肌成纤维细胞分化过程中的作用。本发明发现锌离子、镁离子联合应用具有促进人成纤维细胞向肌成纤维细胞分化的功能,提供了锌离子、镁离子在促进人成纤维细胞向人肌成纤维细胞分化过程中的应用依据,并鉴定出镁离子促进锌离子通过ZIP6及ZIP10进入人成纤维细胞,进入细胞内的锌离子通过增强STAT3磷酸化,形成STAT3二聚体激活下游基因表达的作用机制。这为高效开启人成纤维细胞向人肌成纤维细胞分化提供了方便、廉价、安全、合理的诱导剂,也为修复皮肤缺损、诱导皮肤再生提供了新的理论和实验依据。
  • 体外心脏血管模型及其对化合物检测的方法-202210908312.7
  • 请求不公布姓名 - 江苏艾玮得生物科技有限公司
  • 2022-07-29 - 2023-09-29 - C12N5/077
  • 本发明提一种体外心脏血管模型及其对化合物检测的方法,属于生物组织工程技术领域。本发明的体外心脏血管模型,包括:人工血管组,和心肌细胞微球组,人工血管组包括人工血管,对人工血管的内部进行独立培养和/或灌流的人工血管内流道,以及对人工血管的外部进行培养和/或灌流的人工血管外流道;心肌细胞微球组包括单个或多个心肌细胞微球,和对单个或多个心肌细胞微球进行培养和/或灌流的心肌细胞微球流道,心肌细胞微球流道与人工血管外流道相连。本发明形成一种更准确、有效、便捷的心血管药物筛选模型,为评估药物对心血管的影响,减少药物研发周期,提高药物研发成功率,规避重大损失,提供重要的保障。
  • 提取和长期培养唾液腺腺样囊性癌相关成纤维细胞的方法及培养基-202310583855.0
  • 睢意;王鹿鸣;蔡志刚 - 北京大学口腔医学院
  • 2023-05-23 - 2023-09-26 - C12N5/077
  • 本发明涉及原代细胞提取与细胞培养技术领域,具体公开了一种提取和长期培养唾液腺腺样囊性癌相关成纤维细胞的方法及培养基。采用本发明提供的方法能够有效解决现有技术中唾液腺腺样囊性癌相关成纤维细胞的提取、培养和传代困难,培养过程中易丢失间质细胞形态,难以获得高质量高纯度的目的细胞的问题。此外,本发明还提供了适用于唾液腺腺样囊性癌相关成纤维细胞提取和培养的特异性培养基,配合本发明的方法,能够进一步提高繁殖传代的速度,且有利于维持唾液腺腺样囊性癌相关成纤维细胞的间质细胞形态和特征。
  • 一种魔芋多糖-纤维蛋白复合凝胶制备的细胞培养肉支架-202310662264.2
  • 翁雨燕;陆乃彦;王心荷;向文;唐雪;杨国锋 - 江南大学
  • 2023-06-06 - 2023-09-26 - C12N5/077
  • 本发明公开了一种魔芋多糖‑纤维蛋白复合凝胶制备的细胞培养肉支架,属于细胞培养肉领域。本发明利用食品来源的天然多糖和蛋白质制备了与细胞外基质组成和力学性能相似的复合凝胶,作为细胞支架材料,制备方法为:(1)多糖纯化:将魔芋多糖与乙醇以混合,搅拌离心,取沉淀,干燥,干燥后的沉淀研磨过筛,得到纯化魔芋多糖;(2)凝胶制备:取步骤(1)制得的纯化的魔芋多糖溶于Na2CO3溶液中,搅拌,得到均一的KGM溶液,取纤维蛋白溶于磷酸缓冲液得到均一的FG溶液,从原料上,按KGM和FG一定的质量比,量取相应体积的KGM溶液和FG溶液混合,然后加热,冷却形成支架材料。
  • 纤维质农副产物在制备细胞培养肉支架中的应用-202310766305.2
  • 徐恩波;忻启谱;刘东红;牛瑞浩;陈启和;陈军;陈敏暄;尹俊;朱旸 - 浙江大学
  • 2023-06-27 - 2023-09-22 - C12N5/077
  • 本发明涉及纤维质农副产物在制备细胞培养肉支架中的应用,纤维质农副产物包括米糠、小麦麸皮、玉米种皮等,制备过程中需加入常见的水凝胶前驱体溶液,如海藻酸钠、明胶、卡拉胶或其复合体系。本发明中制备的支架可以诱导细胞迁移,提高细胞增殖效率;针对明胶依赖性细胞,可以极大降低明胶用量,同时改善支架质构特性;此外,本发明涉及的原料价格低廉,制备方法简单高效无毒,有利于促进粮食减损增效和国民营养健康,同时降低细胞培养肉的生产成本,适用于大规模实施应用。
  • 一种利用小分子药物诱导心肌细胞重编程为心脏祖细胞的方法-202310777127.3
  • 丁胜;周伟;马天骅 - 清华大学
  • 2023-06-28 - 2023-09-22 - C12N5/077
  • 本发明涉及利用小分子药物诱导心肌细胞重编程为心脏祖细胞的方法。本发明提供了一种体外诱导人胚胎干细胞(hESCs)向心肌细胞(CMs)分化的方法以及小分子药物组合在诱导心肌细胞去分化为心脏祖细胞中的用途。本发明成功构建了基于hESCs来源的CMs的高通量小分子药物筛选平台。本发明运用CRISPR‑Cas9技术以基因敲入的方式构建了分别来源于男性和女性的基因敲入ISL1mCherry/+人胚胎干细胞系K7和K9。另外,本发明在体外实现了由两个小分子化合物CHIR99021和A‑485的组合对心肌细胞向心脏祖细胞的转变,并且还在体外实现了对心肌细胞向心脏祖细胞转变的谱系追踪。本发明在哺乳动物体内验证了小分子药物组合2C诱导哺乳动物心脏中心肌细胞向心脏祖细胞的去分化。
专利分类
×

专利文献下载

说明:

1、专利原文基于中国国家知识产权局专利说明书;

2、支持发明专利 、实用新型专利、外观设计专利(升级中);

3、专利数据每周两次同步更新,支持Adobe PDF格式;

4、内容包括专利技术的结构示意图流程工艺图技术构造图

5、已全新升级为极速版,下载速度显著提升!欢迎使用!

请您登陆后,进行下载,点击【登陆】 【注册】

关于我们 寻求报道 投稿须知 广告合作 版权声明 网站地图 友情链接 企业标识 联系我们

钻瓜专利网在线咨询

400-8765-105周一至周五 9:00-18:00

咨询在线客服咨询在线客服
tel code back_top