[发明专利]一种突变基因参考品的制备方法及其产品和应用在审
| 申请号： | 202210559747.5 | 申请日： | 2022-05-20 |
| 公开（公告）号： | CN115094117A | 公开（公告）日： | 2022-09-23 |
| 发明（设计）人： | 李东 | 申请（专利权）人： | 无锡博奥玛雅医学科技有限公司;成都玛雅光年科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6806 | 分类号： | C12Q1/6806 |
| 代理公司： | 江苏圣典律师事务所 32237 | 代理人： | 贺翔 |
| 地址： | 214101 江苏省无*** | 国省代码： | 江苏;32 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明公开了一种突变基因参考品的制备方法及其产品和应用，当待测基因的突变位点为n个时，将含有n个突变位点的基因序列的n个突变基因片段作为n个突变型基因序列，其对应的n个野生型基因片段作为n个野生型基因序列；2）随机序列的获得；3）定量序列的选择；4）依次将n个野生型基因序列、n个突变型基因序列、随机序列间隔设计得到n个序列片段，将n个序列片段采用随机序列连接起来得到一个序列，在序列最后连接1个定量序列即得突变基因参考品。本发明通过将一组或多组野生序列、突变序列设计在同一个序列上，中间用无关序列隔开的方法，可以使野生/突变序列的理论比例完全和实际一致，且能有效规避因为核酸降解所带来的误差和风险。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 突变 基因 参考 制备 方法 及其 产品 应用 | ||
【主权项】：
暂无信息
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于无锡博奥玛雅医学科技有限公司;成都玛雅光年科技有限公司，未经无锡博奥玛雅医学科技有限公司;成都玛雅光年科技有限公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/202210559747.5/，转载请声明来源钻瓜专利网。
- 同类专利
- 变构探针、荧光生物传感器、其制备方法及荧光检测方法-202310972552.8
- 丁世家;胡芮维;吴海平 - 重庆医科大学
- 2023-08-03 - 2023-10-27 - C12Q1/6806
- 本发明提供变构探针、荧光生物传感器、其制备方法及荧光检测方法，该变构探针包括L链、P1链及P2链，L链与P1链及P2链形成T型结构变构探针，L链的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，本申请首次创新地利用特殊设计的变构探针，适配CRISPR/Cas9系统元件，为CRISPR/Cas系统实现多重信号输出提供了新的反应模型。本申请的方法仅需一种Cas蛋白，即可通过一锅法实现多重检测，极大程度上简化了操作步骤。
- 单细胞转录组建库和测序的方法-202310707555.9
- 蓝勋;袁昊;江梦南;王崴;杜星翰 - 人科（北京）生物技术有限公司
- 2023-06-14 - 2023-10-27 - C12Q1/6806
- 本发明提出了单细胞转录组建库方法，该包括：将单细胞悬液/单细胞核悬液进行固定和/或裂解通透，收集细胞/细胞核沉淀；利用多个带有不同特异性barcode1序列的polyT的引物和逆转录酶进行逆转录；利用多个分别带有不同特异性barcode2序列的Tn5转座酶进行RNA‑cDNA杂交链打断；将打断后RNA‑cDNA杂交链进行逆转录补齐，再对细胞进行完全裂解，并利用多个带有不同特异性barcode3序列的引物PCR扩增，构成测序文库。本发明可以快速方便地进行单细胞转录组建库，成本低廉，操作步骤简单，不需要依赖特殊设备，数据质量高，适用于细胞和细胞核，方法灵活性高，适于广泛应用。
- 一种构建单细胞测序文库的方法-202310657205.6
- 张强锋;唐磊 - 清华大学
- 2023-06-05 - 2023-10-27 - C12Q1/6806
- 本发明提供了一种构建单细胞测序文库的方法，并对构建的单细胞测序文库进行测序，实现在同一单细胞中的RNA和染色质可接近性的配对分析。本申请所述的方法获得的文库经测序验证其数据特异性好，质量高，捕获的基因数量多。而且，有很少的doublets，碰撞率极低。
- 一种试剂盒及一种核酸提取方法-202310007104.4
- 鞠明霞;康欢欢;高一凡;周乐天;曾立董;张国良;毕静 - 深圳市真迈生物科技有限公司
- 2023-01-04 - 2023-10-27 - C12Q1/6806
- 本发明公开了一种试剂盒及一种核酸提取方法，该试剂盒用于核酸样本提取，该试剂盒包括过氧化氢溶液，该过氧化氢溶液的摩尔浓度为0.1‑2mol/L。对于某些核酸样本，其中含有的菌体被粘液或黏蛋白等物质包裹，难以释放，加入过氧化氢溶液后，菌体中的物质与过氧化氢反应产生气体，生成的气泡可以破坏粘液或块状的样本，使其完全液化，从而释放被粘液或黏蛋白等物质包裹住的菌体，使得后续的核酸提取步骤得以顺利进行。
- 一种血浆环境下捕获循环肿瘤DNA特异序列的方法及其应用-202310311832.4
- 刘洋;陈兴华 - 上海迪赢生物科技有限公司
- 2023-03-28 - 2023-10-27 - C12Q1/6806
- 本发明公开了一种血浆环境下捕获循环肿瘤DNA特异序列的方法及其应用。所述方法包括使用偶联有sgRNA文库和捕获蛋白结合形成的复合物的留置针来捕获游离DNA的步骤；所述sgRNA文库由靶向目标基因的若干sgRNA序列组成；所述捕获蛋白与所述sgRNA文库中的sgRNA序列可形成复合物，所述复合物在所述sgRNA序列的指导下可与所述目标基因的游离DNA结合。相对于传统的抽取血液样本捕获cfDNA的方法，本发明通过调整设备留置时间可以取得相对传统捕获方法的十几倍到上百倍的捕获总量，为下一步的NGS测序，提供更加优质的样本，便于取得更高深度和更高精度的NGS测序结果应用于临床和病理分析。
- 一种用于监控及纠正测序污染的分子编码检测体系及其应用-202211328995.5
- 庞震国;李丽莎;朱振刚;王霞;刘萍萍;汤郡;张亚飞 - 迈杰转化医学研究（苏州）有限公司
- 2022-10-27 - 2023-10-27 - C12Q1/6806
- 本发明公开了一种用于监控及纠正测序污染的分子编码检测体系及其应用。所述分子编码检测体系包括至少一条插入式编码核酸序列，所述插入式编码核酸序列包括序列已知的骨架序列区和至少一个可变编码区，所述可变编码区为由A、T、C或G中任意一种或至少两种组成的随机序列，所述可变编码区随机分布于所述骨架序列区内，所述插入式编码核酸序列为单链或双链。本发明设计特定结构的插入式编码核酸序列，利用所述插入式编码核酸序列对待测样本进行标记，基于高通量测序原始数据进行分析，即可快速有效、识别短期内批内样本间交叉污染和由于长期批次检测造成的历史环境污染。
- 基于多重PCR合成寡核苷酸探针的方法-201910432072.6
- 娄群峰;毕云飞;赵勤政 - 南京农业大学
- 2019-05-22 - 2023-10-27 - C12Q1/6806
- 本发明公开了基于多重PCR合成寡核苷酸探针的方法。基于黄瓜基因组序列信息，筛选设计黄瓜染色体的寡核苷酸文库，并通过双接头的连接方式将寡核苷酸文库进行分段。在此基础上，提出了一种基于多重PCR的寡核苷酸探针合成方法，根据实验需要自主选择合成所需的染色体区段，通过PCR快速的合成大量满足实验所需的寡核苷酸探针。本发明基于多重PCR合成寡核苷酸探针的方法，可以大量、快速、简便、永久的合成分段寡核苷酸探针和整条染色体的探针，为寡核苷酸探针的推广应用创造了条件，同时也为植物染色体研究提供了灵活、有力的方法。
- 一种转录组文库的建库方法及其应用-202211315109.5
- 桑国芹;石焕焕;韩金桓;罗云超;谢莹莹;李研;关荧;韦秋霞;焦少灼;李宗文 - 北京寻因生物科技有限公司
- 2022-10-26 - 2023-10-27 - C12Q1/6806
- 本发明属于测序领域，具体涉及一种转录组文库的建库方法及其应用，包括以下步骤：提供待检测RNA反应体系，所述待检测RNA反应体系含有待检测RNA；获取双链产物；采用含有相同两个接头的转座酶对所述双链产物进行切割，得到片段化的双链产物；采用扩增引物对片段化的双链产物进行扩增，得到转录组文库。本发明中，通过使用含有通用引物序列和逆转录序列的引物进行逆转录，采用含相同双接头的转座酶进行切割并引入接头序列，对切割后的双链产物进行扩增，获得转录组文库。本发明建库简便、快速，不仅减少RNA建库时间，同时还能够分析固定样本与新鲜样本的RNA全长序列。
- 一种靶向捕获尿液样本中目标核酸的捕获探针、试剂盒、方法及应用-202311084796.9
- 李学松;樊健;董兰兰;蔡迪;张良禄;周谛晗 - 北京大学第一医院;武汉艾米森生命科技有限公司
- 2023-08-25 - 2023-10-24 - C12Q1/6806
- 本发明属于核酸靶向捕获技术领域，更具体地，涉及一种靶向捕获尿液样本中目标核酸的捕获探针、试剂盒、方法及应用。本发明利用提供的靶向捕获尿液样本中目标核酸的捕获探针和试剂盒可以特异性地捕获尿液样本中的目标核酸，快速、特异、高效的对目标核酸进行富集，且能够避免尿液样品中非目标DNA的非特异性结合，实现纯化和富集目标核酸的目的，显著提高捕获特异性，提高目标DNA的纯度。将上述捕获探针或试剂盒应用于尿液样本中尿路上皮癌检测时，能够增加检测特异性和准确性，提高检测灵敏度，降低假阴性结果检出。
- 提高建库效率的构建mRNA文库的方法-202310879367.4
- 卢超;马焕班;吕艳花 - 江西海普洛斯医学检验实验室有限公司
- 2019-12-03 - 2023-10-24 - C12Q1/6806
- 本公开提供了一种提高建库效率的构建mRNA文库的方法，其包括：cDNA第一链合成步骤；cDNA第二链合成、末端修复和末端加A步骤；接头连接步骤以及文库扩增步骤，其中，cDNA第二链合成、末端修复和末端加A步骤均在第二反应体系中进行，对第二反应体进行第二热处理并获得cDNA，第二反应体系包括cDNA第一链、DNA聚合酶I、核糖核酸酶H、T4DNA聚合酶、T4多聚核苷酸激酶、Taq‑B DNA聚合酶、Klenow片段和dNTP，其中Klenow片段缺乏5'端至3'端的缺口平移用的核酸酶活性和3'端至5'端的校正用的核酸酶活性。根据本公开，能够提供一种提高建库效率的构建mRNA文库的方法。
- 一种基于脱氧核酶的完整测定mRNA PolyA尾的方法-202310469083.8
- 陈小梅;张伟;赵国凤;郑媛媛;李娇 - 宁波甲贝医药科技有限公司
- 2023-04-27 - 2023-10-24 - C12Q1/6806
- 本发明提供了一种基于脱氧核酶的完整测定mRNAPolyA尾的方法，该方法包括：步骤S1，根据底物mRNA的序列特征，选择脱氧核酶的结构；步骤S2，根据碱基互补配对原则，设计所选结构的脱氧核酶的双臂，得到完整的脱氧核酶；步骤S3，将完整的脱氧核酶与底物mRNA退火，对底物mRNA的特定位点进行特异性酶切，产生具有完整长度的PolyA片段；步骤S4，用OligodT磁珠富集纯化具有完整长度的PolyA片段，利用LC‑MS对富集纯化所得的具有完整长度的PolyA片段进行检测。该方法既可以用于分段式mRNAPolyA尾的完整测定，也可以用于连续式mRNAPolyA尾的完整测定。与现有技术相比，该方法实现了对分段式mRNAPolyA尾的完整测定。
- 多基因不同突变频率参考品及其制备方法与应用-202210357104.2
- 张华;徐安然;秦资 - 上海思路迪生物医学科技有限公司
- 2022-04-06 - 2023-10-24 - C12Q1/6806
- 本发明属于基因检测技术领域，具体涉及一种多基因不同突变频率参考品及其制备方法与应用。该制备方法包括步骤：S1：提取包含目标基因的阳性和阴性样本基因组DNA；S2：获取阳性和阴性样本基因组DNA中目标基因的拷贝数并结合参考品目标突变频率与目标质量构建多元方程计算得出各样本的混合比例用以制备目标突变参考品。本申请尤其适用于多基因不同突变频率参考品制备，基于基因拷贝数的绝对定量，通过控制混合过程中各样本的添加量精确控制混合体系中各基因的拷贝数，具有快速准确且经济的特点；且稀释后的参考品无需再进行数字PCR或者NGS定量确认，提高生产效率的同时节约了成本，更具经济效益。
- 用于可视化环介导等温扩增的分子信标、制备方法及应用-202310769120.7
- 熊雄;王利斌;费延堻;薛晗玥 - 保食链食品科技江苏有限公司
- 2023-06-28 - 2023-10-24 - C12Q1/6806
- 本发明公开了一种用于可视化环介导等温扩增的分子信标，包括未经标记的寡核苷酸茎环结构LBP‑n‑0、茎环结构与靶标互补产生的双链LBP‑n‑b1/‑b2c。还包括其制备方法及其在检测虹鳟鱼中的应用。本发明利用寡核苷酸在熔解曲线中的荧光强度差值关系，成功筛选出能够实现可视化环介导等温扩增检测的分子信标，极大减少分子信标设计的背景信号，降低成本。针对新设分子信标建立的可视化检测方法可以在25min内实现对靶标的特异性检测，对建立基于分子信标的可视化检测具有重要的意义。
- 一种长片段DNA捕获方法、试剂盒及其用途-202311070666.X
- 陈彦梅;杨志;霍贝贝;余欢 - 北京齐碳科技有限公司
- 2023-08-23 - 2023-10-24 - C12Q1/6806
- 本申请涉及分子生物学领域，具体涉及一种长片段DNA捕获方法、试剂盒及其用途。
- 一种高通量测序调取未知RNA全长序列的方法-202010398919.6
- 张玉波;李东卫;黄其通;黄雷;李清 - 中国农业科学院农业基因组研究所
- 2020-05-12 - 2023-10-24 - C12Q1/6806
- 本发明公开了一种高通量测序调取未知RNA全长序列的方法，该方法为：根据RNA‑seq获取的全新短片段的序列设计该未知RNA的5’末端和3’末端基因特异性反转录引物，利用反转录酶和基因特异性反转录引物分别合成5’末端和3’末端一链cDNA，之后利用DNA聚合酶I分别合成5’末端和3’末端二链cDNA，将所合成的两个末端二链cDNA合并，超声打断后构建文库并测序，通过生物信息学分析，最终调取未知RNA全长序列。本发明可在一个实验中同时调取未知RNA的5’末端和3’末端序列，具有快速，灵活，灵敏度高和实验成本低等特点。
- 一种适用于微量样本的DNA样本制备方法-202011642164.6
- 顾颖;刘光宇;夏科科;杨勇 - 深圳华大生命科学研究院
- 2020-12-31 - 2023-10-24 - C12Q1/6806
- 本发明属于生物技术领域，公开了一种适用于微量样本的DNA样本制备方法，所述方法包括：1)将微量样本以液氮处理；2)将所述液氮处理后的样本升温后温育；3)将温育后的样本以水杨酸锂进行处理或者用磁珠进行纯化，获得所述微量样本的DNA样本。本发明的方法仅需低至1mg或10
- 一种组合物、复合DNA纳米结构、试剂盒及其在HER2同源二聚体检测与靶向降解中的应用-202310934960.4
- 钱胡孙;付怡欣;周婷 - 贵州医科大学附属医院
- 2023-07-27 - 2023-10-20 - C12Q1/6806
- 本发明属于生物化学技术领域，具体公开了一种组合物、复合DNA纳米结构、试剂盒及其在HER2同源二聚体检测与靶向降解中的应用。所述组合物包括两个修饰有HER2适配体的DNA四面体HAT1和HAT2；所述复合DNA纳米结构与HER2同源二聚体连接，包括所述组合物，及与HAT1、HAT2连接的长链DNA片段；其中HAT1和HAT2能靶向乳腺癌细胞表面的HER2蛋白，当HAT1和HAT2定位于HER2同源二聚体时，可在连接辅助链Connector的作用下诱导H1和H2在其表面引发HCR扩增反应，从而提高检测HER2二聚体的灵敏度，同时形成的复合DNA纳米结构也能被细胞内体识别包裹进入溶酶体降解，从而同时实现HER2同源二聚体的检测和靶向降解，并进一步实现肿瘤的精准治疗。
- 一种微量翻译组建库产品-202311183121.X
- 宋伟;邹定峰;苏路瑛;李凯;卢艳 - 中国医学科学院基础医学研究所
- 2023-09-14 - 2023-10-20 - C12Q1/6806
- 本发明提供了一种微量翻译组建库产品，涉及生物医药和分子生物学领域。所述产品包括细胞裂解组件、核酸酶及酶解缓冲液组件、逆转录试剂组件、文库DNA纯化组件；细胞裂解组件用于裂解样本细胞，提取样本细胞的RNC；核酸酶及酶解缓冲液组件用于对所述RNC进行酶解处理，得到RPF‑RNA；逆转录试剂用于将RPF‑RNA片段逆转录成相应的DNA；文库DNA纯化产品包括电泳试剂、碎胶装置、过滤纯化产品。本发明提供的产品及方法对样本需求较小，适用于珍贵样本或非常有限的特殊来源样本，这意味着研究人员可以利用该方法从少量样本中获取足够的RPF‑RNA用于翻译组文库的构建，无需担心样本耗尽或浪费。
- 一种单细胞中同时进行表观基因组学和转录组学信息测序的文库的构建方法及其应用-202310715711.6
- 丁俊军;曲佳乐;孙隽 - 中山大学
- 2023-06-15 - 2023-10-20 - C12Q1/6806
- 本发明公开了一种单细胞中同时进行表观基因组学和转录组学信息测序的文库的构建方法，所述方法为：先对细胞内的RNA进行反转录，再对染色质三维结构信息进行捕获，接着将细胞裂解片段化并利用核苷酸序列如SEQ ID NO：1～SEQ ID NO：3所示的预扩增引物进行预扩增，再利用核苷酸序列如SEQ ID NO：4～SEQ ID NO：6所示的特异性文库引物构建文库。本发明所述方法实现在一个细胞内同时检测染色质三维结构和转录信息，且信息来源于真实的单细胞，并非模拟结果；同时无需高昂的高分辨显微镜设备即可实现大量的单细胞实施检测，有效推进染色质三维结构和转录的关系探究，为揭示细胞生命活动提供了有效的工具。
- 一种微生物标准品的构建方法及其应用-202310793202.5
- 黄玉芬;方晓东;阳峰 - 深圳华大基因科技服务有限公司
- 2023-06-30 - 2023-10-20 - C12Q1/6806
- 本发明提供了一种微生物标准品的构建方法及其应用。具体的，该构建方法包括：步骤1)：从样品中进行菌株分离、鉴定与扩大培养；步骤2)：对步骤1)扩大培养得到的菌株进行DNA提取并测序；步骤3)：将所需的各菌株按照其目标丰度进行混合制备得到标准品。进一步的，该构建方法还包括步骤4)：对步骤3)中制备得到的标准品进行测序确定其中各菌株的实际丰度，并将其与理论丰度进行比较，确定构建的微生物标准品的准确性。本发明不受菌株的限定，可一次性从样品中分离筛选多种不同的菌株，将菌株按照需要的目标丰度进行微生物标准品的构建，方便且成本低。
- 一种通用型核酸质控品及其应用-202310769044.X
- 原霖;吕俊霞;张淼洁;牛婷婷;陈亚娜;崔灿;贾骁晔;闫品男;徐阳 - 北京中科基因技术股份有限公司;普道（北京）标准技术有限公司
- 2023-06-27 - 2023-10-20 - C12Q1/6806
- 本发明提供一种通用型核酸质控品及其应用，所述通用型核酸质控品包括如Seq_1所示的核苷酸序列。该通用型核酸质控品满足GB/T27424‑2020《合格评定非可溯源生物质控品质量控制规范》的要求；能用于实验室内部质控，如人员比对、仪器比对、测量仪器设备的期间核查和质控图等，实验室内部质量控制是监控实验室检测质量是否处在受控当中，类似于定期检查对检测结果产生影响的因素是否发生了改变，比如检测人员能力是否发生变化、检测设备是否正常运行，性能是否发生改变等。同时该质控品能加入所有样品中监控每个样品的扩增过程，且不与待检测的病毒存在交叉污染，能有效规避因为核酸质控品污染所带来的结果误差和风险，还是一种潜在的实时荧光定量PCR仪校准用标准物质。
- 一种纳米荧光探针及其制备方法和应用-202310688974.2
- 高丰雷;王颖 - 徐州医科大学
- 2023-06-12 - 2023-10-20 - C12Q1/6806
- 本发明公开了一种纳米荧光探针及其制备方法和应用，通过构建一种包括金纳米粒子、发夹H1链、Cy5修饰的发夹H2链、FITC修饰的S1链、S2链、DNAzyme A链、BHQ1修饰的DNAzyme B链、S3链、S4链、Cy3修饰的C链、D链的纳米荧光探针，该探针可以对三种肿瘤标志物进行检测，产生三种荧光信号，精确诊断肿瘤细胞，当在体外系统中，检测这三种肿瘤标志物时，该方法的线性范围较宽，检测限较低，可满足细胞内三种肿瘤标志物原位成像的要求，可进一步根据细胞内原位成像的结果来区分肿瘤细胞和非肿瘤细胞。
- 一种可辐照灭菌的病毒保存液-202211230785.2
- 李云鹏;宋姗姗;周志图 - 无锡百泰克生物技术有限公司
- 2022-10-09 - 2023-10-20 - C12Q1/6806
- 本发明提供了一种可辐照灭菌的病毒保存液，包括以下组分：Hank’s基础液、抑菌剂、生物缓冲剂、营养剂、酸碱指示剂和辐照保护剂，其中，所述辐照保护剂包括硫代硫酸钠、BP‑10和UV‑T。本发明技术方案通过在病毒保存液中加入辐照保护剂，从而对酸碱指示剂等还原性成分进行保护，避免酸碱指示剂等还原性成分辐照氧化，防止酸碱指示剂褪色，维持酸碱指示剂的指示能力，进而即时检测病毒保存液的pH值，解决了病毒保存液辐照后酸碱指示剂褪色的问题；同时，该病毒保存液可以进行辐照灭菌处理，不但利于病毒保存液的大批量生产，还降低了生产难度和生产成本，无菌保证程度高，避免了生产环节的染菌风险。
- 一种核酸检测样本的预处理试剂及其制备方法和应用-202310995148.2
- 孙晓峰;杨浩 - 河北仓乾生物科技有限公司
- 2023-08-08 - 2023-10-17 - C12Q1/6806
- 本发明涉及生物技术领域，具体公开了一种核酸检测样本的预处理试剂及其制备方法和应用。所述预处理试剂包括以下各组分：聚苯胺改性碳纳米管、Chelex‑100、Triton X‑100、苯扎氯铵和pH缓冲液；其中，所述聚苯胺改性碳纳米管中聚苯胺通过原位聚合到碳纳米管。本发明将改性碳纳米管、Chelex‑100、Triton X‑100、苯扎氯铵和pH缓冲液配合使用，通过各组分之间的协同作用，可使核酸检测更加方便、快速、精准，且取样量更少。不同于传统的核酸提取试剂盒需要对样品进行裂解、洗涤、洗脱等繁琐的操作，大大简化了检验流程，降低了可能存在的交叉污染和院内感染的风险。
- 生产复合体的方法、判定微生物包含的方法以及鉴定所包含的微生物的方法-202310323856.1
- 蓼沼崇;宫内祐树;田口朋之;田名网健雄 - 横河电机株式会社
- 2023-03-29 - 2023-10-17 - C12Q1/6806
- 本公开提供了能够容易进行的一种用于生产复合体的方法、一种用于判定微生物包含的方法以及一种用于鉴定所包含的微生物的方法。一种用于生产复合体的方法，该复合体包含在样品中含有的目标，该方法包括：步骤(a)，使样品与标记分子A、标记分子B、标记分子C接触并形成复合体；以及步骤(b))，分离复合体。目标是核酸。标记分子A包含能够与目标的一部分杂交并且与目标的核酸序列基本互补的核酸序列。标记分子B包含能够与目标的一部分杂交并且与目标的核酸序列基本互补的核酸序列。
- 一种构建环状染色体的单体型的方法-202310881174.2
- 任姿;张志强;曾海涛;顾梦南;许瑞霞;孙晓轲;单文琪;孔令印;梁波 - 中山大学附属第六医院;苏州贝康医疗器械有限公司
- 2023-07-18 - 2023-10-13 - C12Q1/6806
- 本发明公开了一种构建环状染色体的单体型的方法。所述方法包括：对环状染色体携带者的DNA样本进行长片段全基因组测序，测序后进行全基因组变异分析，筛选在环状染色体携带者中的杂合型SNPs，通过对环状染色体携带者的长片段测序数据进行全基因组组装，集合所述杂合型SNPs进行全基因组分型，检测和筛选环状染色体的长片段DNA分子，获得环状染色体的分型结果，标记环状染色体携带者的携带型单体型，构建环状染色体携带者的携带型和正常型单体型。本发明的方法有利于阻断环状染色体遗传给后代，不需要先证者即可构建环状染色体携带的单体型，扩大了植入前染色体结构变异遗传学检测的适用范围。
- 一种植物叶际微生物分离和收集方法-202311073055.0
- 任海燕;白璐;温芸卓;徐柱文 - 内蒙古农业大学
- 2023-08-23 - 2023-10-13 - C12Q1/6806
- 本发明公开了一种植物叶际微生物分离和收集方法，本发明采用pH为7.0‑7.2的磷酸盐缓冲液；在涡旋仪上漩涡振荡1‑2分钟，接着使用超声振荡器振荡15～20分钟，将叶片转移至新管中，继续使用磷酸盐缓冲液冲洗叶片，将收集到的溶液离心，倒出上清液，将剩余悬浊液置于2ml离心管中离心，收集叶表外生菌；采用75％乙醇棉片对表面反复擦拭，进行表面灭菌，接着用移液枪吸取无菌蒸馏水对表面冲洗，随后将处理过的叶片使用液氮冷冻干燥、研磨，收集到叶内内生菌；在完成叶表微生物的收集后，对叶表微生物的提取过程中，采用无水乙醇进行洗脱2次，然后再用TE缓冲液收集DNA，该方法简单、高效，能够同时满足对叶际附生和内生细菌及真菌的有效分离，提高DNA检测浓度和纯度。
- 一种DNA直接扩增试剂及其应用-202111661280.7
- 邹永龙;何宗顺;曲峰;张佳斌 - 苏州白垩纪生物科技有限公司
- 2021-12-30 - 2023-10-13 - C12Q1/6806
- 本发明提供了一种DNA直接扩增试剂及其应用。具体地说，本发明提供了一种核酸释放剂，包含多铵、N,N‑二甲基甲酰胺、酒石酸和Brij 30等。本发明还提供了一种直接扩增试剂，包含硫酸铵、BSA、DNA聚合酶和聚(4‑苯乙烯磺酸‑共聚‑马来酸)钠盐等。本发明还提供了包括用于配制所述核酸释放剂和/或直接扩增试剂的试剂的试剂盒和采用所述试剂盒对生物样本的DNA进行定量或定性分析的方法。本发明可以对多样本中的DNA进行荧光定量PCR的直接扩增技术。本发明可以在室温条件下快速、有效释放液体样本的DNA，固体组织样本也无需过夜消化并进行核酸提取，所得粗样本可直接用于PCR扩增，无需核酸提取步骤，大大提高了检测效率。
- 一种宏基因组绝对定量的检测方法及其应用-202110744364.0
- 杨锋;梁萌萌;余伟师 - 苏州赛福医学检验有限公司
- 2021-07-01 - 2023-10-13 - C12Q1/6806
- 本发明提供了一种宏基因组绝对定量的检测方法及其应用。所述检测方法中在待测样本DNA中加入微生物绝对定量用参照DNA，经过两轮扩增之后，使用测序平台测序和基因组序列比对，实现所述待检测样本中微生物含量的绝对定量。所述检测方法能够快速建立原核生物，真核生物和真菌检测体系，降低检测成本，且灵敏度较高，是一种准确、可靠的能对单位质量样本中的微生物的含量进行绝对定量方法。
- 一种适用于微生物群体的宏基因组GutHi-C建库方法及应用-202310901421.0
- 孔思远;张玉波;李晨莹;卢宇曦;杨金宝;潘玮华 - 中国农业科学院农业基因组研究所
- 2023-07-21 - 2023-10-13 - C12Q1/6806
- 本发明公开了一种适用于微生物群体的宏基因组GutHi‑C建库方法，包括如下步骤：1）微生物分离提纯：微生物样本洗涤，添加培养基并自然沉降，4000g离心力对微生物分离；2）微生物进行裂解及甲醛交联；3）对步骤2）中产物进行酶切，然后用混有生物素标记的碱基对酶切后黏性末端进行补平，并将互作DNA邻近连接；4）将步骤3）中获得产物纯化后，加入环状共沉淀DNA，互作DNA超声片段化；5）基于生物素富集邻近互作片段，在免疫磁珠上进行末端修复与加A并与接头连接；6）进行文库预扩增QC质量控制检验，再进行正式扩增即得到GutHi‑C文库。本发明构建的GutHi‑C文库在高通量测序时，各方面数据均优于现有技术，说明本申请的建库方法更有优势。
- 专利分类
