[发明专利]基于酶DNA修复级联驱动荧光团编码/去编码的生物传感器及其在端粒酶检测中的应用在审

专利信息
申请号: 202210043048.5 申请日: 2022-01-14
公开(公告)号: CN114507706A 公开(公告)日: 2022-05-17
发明(设计)人: 张春阳;刘明昊;于宛彤 申请(专利权)人: 山东师范大学
主分类号: C12Q1/48 分类号: C12Q1/48;C12Q1/682;C12Q1/6825
代理公司: 济南圣达知识产权代理有限公司 37221 代理人: 宋海海
地址: 250014 山*** 国省代码: 山东;37
权利要求书: 查看更多 说明书: 查看更多
摘要: 发明提供基于酶DNA修复级联驱动荧光团编码/去编码的生物传感器及其在端粒酶检测中的应用,属于荧光检测技术领域。所述生物传感器至少包括AP探针,TS引物,无嘌呤/无嘧啶核酸内切酶(APE1),荧光基团修饰的dATP,末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)以及链霉亲和素包被的磁珠。采用本发明生物传感器进行端粒酶检测,可以有效防止非特异性扩展,降低背景信号,使用基于全内反射荧光(TIRF)的单分子检测进行定量,可以实现在单细胞水平灵敏检测端粒酶,从而使其在早期临床诊断和抗癌药物开发等方面具有巨大潜力,因此具有良好的实际应用之价值。
搜索关键词: 基于 dna 修复 级联 驱动 荧光 编码 生物 传感器 及其 端粒 检测 中的 应用
【主权项】:
暂无信息
下载完整专利技术内容需要扣除积分,VIP会员可以免费下载。

该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息,商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于山东师范大学,未经山东师范大学许可,擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作,请联系【客服

本文链接:http://www.vipzhuanli.com/patent/202210043048.5/,转载请声明来源钻瓜专利网。

同类专利
  • 一种肌酸激酶同工酶测定试剂盒-202010004007.6
  • 商忆文;林耀文 - 浙江夸克生物科技有限公司
  • 2020-01-03 - 2023-10-27 - C12Q1/48
  • 本发明公开了一种肌酸激酶同工酶测定试剂盒,涉及生物检测技术领域。包括彼此独立的试剂R1和试剂R2,其成分为:试剂R1:咪唑醋酸;D‑葡萄糖;醋酸镁L;己糖激酶;N‑乙酰半胱氨酸;二磷酸腺苷(ADP);氧化型辅酶Ⅱ(NADP+);叠氮钠;乙二胺四乙酸(EDTA);葡萄糖‑6‑磷酸脱氢酶;腺苷5’‑一磷酸双钠盐(AMP);二腺苷五磷酸盐(P1P5‑diAP);试剂R2:磷酸肌酸;叠氮钠;抗人CK‑M抗体。本发明在实施过程中控制各组分之间的浓度比在本发明公开的范围内时试剂盒的稳定性、准确性和精密性都明显提高,并且操作简单、制备成本低,适宜于推广使用。
  • 一种基于制麦过程呼吸酶系活力的呼吸损失预测方法及其应用-202310874154.2
  • 姜宗祥;尹花;张磊;贺扬;胡淑敏;刘明丽;周月南;岳杰;王书谦 - 青岛啤酒股份有限公司
  • 2023-07-17 - 2023-10-20 - C12Q1/48
  • 本发明提出一种基于制麦过程呼吸酶系活力的呼吸损失预测方法及其应用,属于制麦损失预测领域,能够解决传统制麦损失计算方法存在耗时较长、存在较大的滞后性,无法实现制麦过程精准调控的技术问题。该技术方案包括:原料大麦经过浸麦处理后得到露点的大麦,通过测定所述露点的大麦中关键呼吸酶的酶活力,将其代入呼吸损失计算公式中得到呼吸损失或者根据酶活力与呼吸损失评判标准,以预测所述原料大麦经过整个制麦过程后的实际呼吸损失。本发明具有操作方便、耗时短、结果准确且能够对制麦过程的呼吸损失进行提前预判的特点。本发明能够应用于制麦损失预测方面。
  • 一种检测宫颈上皮细胞端粒酶活性的试剂盒及其应用-202310714806.6
  • 郑金平;杨丹丹;谭铮;郑克威;王佳 - 长治医学院
  • 2023-06-16 - 2023-10-20 - C12Q1/48
  • 本发明属于生物医药技术领域,为了解决目前端粒酶检测技术依然无法应用于宫颈癌筛查中的问题,提供了一种检测宫颈上皮细胞端粒酶活性的试剂盒及其应用。所述试剂盒包含磁珠、端粒酶释放溶液、定量PCR试剂,其中磁珠偶联了抗人GYPC基因编码蛋白的抗体;该试剂盒使用抗人GYPC基因编码蛋白的抗体磁珠从宫颈脱落细胞中分离并富集上皮细胞,经过一步裂解释放细胞内端粒酶,通过端粒酶延伸和定量PCR单管偶联反应检测端粒酶活性。本试剂盒的采样方法去除了宫颈刷采样带来的杂质以及大部分非上皮来源的细胞,减少了干扰端粒酶检测的杂质,可适用于检测高危HPV感染的上皮病变细胞。
  • 一种检测DNA甲基化转移酶的荧光生物传感器及其制备与应用-202110408314.5
  • 易钢;黄玉麒 - 重庆医科大学
  • 2021-04-15 - 2023-10-13 - C12Q1/48
  • 本发明公开了一种检测DNA甲基化转移酶的荧光生物传感器及其制备与应用,所述荧光生物传感器包括对称双环哑铃和3D四面体荧光支架,对称双环哑铃含DNA甲基化位点,在DNA甲基化转移酶催化下会形成甲基化双链,再经酶切反应形成两结构一致的单链哑铃环;3D四面体荧光支架各顶端含有相同发夹,且修饰有荧光基团与淬灭基团,荧光基团和淬灭基团靠近导致荧光淬灭,而被剪切的哑铃环能与发夹结合产生荧光,不同浓度的DNA甲基化转移酶催化反应可产生不同强度的荧光信号。基于本发明的传感器建立的DNA甲基化转移酶检测方法稳定性、特异性好,灵敏度高,还可用于筛选MTase抑制剂,对临床上癌症的早期检测诊断及药物研究等具有重要意义。
  • 一种测定T7 RNA聚合酶活性的方法-202310710349.3
  • 任鋆;刘嘉利;丁睿清;胥禄钧;孙兴业 - 南通药明康德医药科技有限公司
  • 2023-06-15 - 2023-10-10 - C12Q1/48
  • 本发明公开一种测定T7RNA聚合酶活性的方法,先将T7RNA聚合酶进行体外转录得到产物无机焦磷酸盐PPi,之后使用无机焦磷酸酶PPase水解无机焦磷酸盐PPi得到磷酸盐Pi,再加入底物7‑甲基‑6‑硫代鸟苷MESG和嘌呤核苷磷酸化酶PNPase,反应得到7‑甲基‑6‑硫代鸟嘌呤MTGua和核糖‑1‑磷酸,最后测定7‑甲基‑6‑硫代鸟嘌呤MTGua的吸光值并根据吸光值的结果建立无机焦磷酸盐PPi和T7RNA聚合酶的含量关系曲线。本发明通过计算拟合S形曲线的中值参数表征酶活,拓宽了检测信号与无机焦磷酸盐PPi生成的线性范围,使得检测的结果重复性更高,重现性更好。
  • 一种基于三维DNA步行器测定T4多聚核苷酸激酶活性的电化学分析方法-202310811731.3
  • 张艳丽;苏爱雯;张慧莲;廖滢;王红斌;庞鹏飞 - 云南民族大学
  • 2023-07-04 - 2023-09-29 - C12Q1/48
  • 本发明公开了一种基于三维DNA步行器测定T4多聚核苷酸激酶活性的电化学分析方法;本发明提供的三维DNA步行器通过发夹DNA修饰到金纳米粒子表面形成,发夹DNA经T4多聚核苷酸激酶磷酸化和核酸外切酶剪切产生三维DNA步行器;利用核酸内切酶驱动三维DNA步行器在金纳米粒子表面行走,剪切释放二茂铁标记DNA探针中的电化学活性片段Fc‑DNA;释放的Fc‑DNA与亚甲基蓝标记DNA探针在电极表面杂交,实现双重比率型电化学响应信号放大;本发明操作简单、成本低、非放射性、灵敏度高、选择性好。比率型电化学响应信号与T4多聚核苷酸激酶浓度成正比,实现对T4多聚核苷酸激酶的高灵敏度和高选择性测定。
  • 一种基于双足DNA步行器的检测T4多聚核苷酸激酶活性的电化学分析方法-202310811733.2
  • 张艳丽;罗丹;廖滢;苏爱雯;王红斌;庞鹏飞 - 云南民族大学
  • 2023-07-04 - 2023-09-22 - C12Q1/48
  • 本发明公开了一种基于双足DNA步行器测定T4多聚核苷酸激酶活性的电化学分析方法;本发明提供的双足DNA步行器通过三条单链DNA探针杂交形成,其中一条DNA探针由发夹DNA经T4多聚核苷酸激酶磷酸化和核酸外切酶剪切产生;利用核酸内切酶驱动双足DNA步行器在电极表面行走,剪切释放轨道链中电化学活性DNA片段,实现响应信号放大;电化学放大响应信号与T4多聚核苷酸激酶浓度成正比,实现对T4多聚核苷酸激酶的高灵敏度和高选择性测定。本发明操作简单、成本低、非放射性、灵敏度高、选择性好。
  • 一种COMT酶活性的整体水平表征方法及其应用-202111069909.9
  • 齐晓怡;梁思成;梁可;白睿然;赵文静;邓明明;熊霞;吕沐瀚 - 西南医科大学附属医院
  • 2021-09-13 - 2023-09-19 - C12Q1/48
  • 本发明公开了一种COMT酶活性的整体水平表征方法,其特征在于,以瑞香素或其衍生物作为底物,该底物在COMT酶的作用下发生C‑8位的甲基取代反应,并经磺酸水解酶和葡萄糖醛酸水解酶处理后生成8‑O‑甲基化产物,通过定量检测单位时间内底物及其8‑O‑甲基代谢物的含量来测定各生物样品中COMT酶的活性。本发明提供的方法能够从整体水平表征生物体内的COMT酶的活性水平,瑞香素或其衍生物只会转换为其8‑甲基代谢物,特异性好,检测检测精准度高;检测灵敏度好,具有较高安全性;该方法运用到试剂盒中,能够精确检测COMT酶活性,通过底物含量与8‑O‑甲基化产物含量的比值确定生物样品中COMT酶的活性,给出明确COMT酶的活性的评判标准。
  • Tn5转座酶活性测定的方法-202310431042.X
  • 董长贵;胡伟娟;蔡晶晶;苏敏 - 百力格生物科技(上海)股份有限公司
  • 2023-04-21 - 2023-09-12 - C12Q1/48
  • 本发明提供Tn5转座酶活性测定的方法,所述方法包括:设计一段用于Tn5转座酶活性测定的双链DNA底物,所述双链DNA底物包括二部分:含有Tn5特异性识别序列的转座子序列和被切割掉的供体序列;所述双链DNA上包括荧光淬灭基团和荧光基团,其中所述荧光淬灭基团位于所述转座子序列上,和所述荧光基团位于所述供体序列上。本发明提供了一种全新测定Tn5转座酶活性的方法,这种方法即可以快速检测已纯化Tn5转座酶活性,又可以直接检测细胞裂解液中未纯化的Tn5转座酶活性,从而可以直接用于高通量筛选Tn5转座酶的突变株。
  • 一种中/长链脂肪乳注射液中甘油含量的测定方法-202010734691.3
  • 王思渊;杨纯;郭彬;陈蓉;郝刚;张国林 - 苏州市药品检验检测研究中心
  • 2020-07-28 - 2023-09-08 - C12Q1/48
  • 本发明提供了一种中/长链脂肪乳注射液中甘油含量的测定方法,量取中/长链脂肪乳注射液(C8‑24 Ve)1ml,加70%高氯酸溶液混匀,加水稀释至刻度,摇匀。离心5min,取上清液为供试品溶液。取甘氨酰替甘氨酸缓冲液,丙酮酸激酶混悬液,均以多通道电动移液器置于透明96孔板内;加入供试品溶液,在脱色摇床混匀;以多功能酶标仪测定吸光度A0S;再加甘油含量激酶混悬液,再以脱色摇床混匀;测定吸光度A1S;按不同浓度甘油对照品所得外标曲线公式计算得甘油含量。本发明方法操作便捷,测定结果平行性与重复性好、试剂消耗量小、耗时少,能够实现中/长链脂肪乳注射液中甘油含量含量的高通量检测,能更好的控制产品质量。
  • 一种高效的tRNA甲基化酶抑制剂筛选方法-202210074017.6
  • 林水宾;郑思仪;马结仪;朱艳 - 中山大学附属第一医院
  • 2022-01-21 - 2023-08-11 - C12Q1/48
  • 本发明公开了一种高效的tRNA甲基化酶抑制剂筛选方法,包括步骤构建体外反应筛选体系,将待筛选小分子化合物与体外反应筛选体系混合,得到反应最终物,对反应最终物进行Dot Blot分析,获得体外反应筛选体系的Dot Blot扫描图,对Dot Blot扫描图中小分子化合物样本进行分类,分析分类后的小分子化合物样本,获得缺陷样本,修复缺陷样本,进行小分子化合物筛选。本发明实现了自动检测缺陷样本和修复缺陷样本斑点,使得后续识别过程更准确。
  • 一种糖基转移酶活性测定新方法-202110002225.0
  • 吴旭日;李萌;夏媛;杜雅丽;赵玲;陈依军 - 中国药科大学
  • 2021-01-04 - 2023-08-01 - C12Q1/48
  • 本发明属于生物催化技术领域,具体涉及一种糖基转移酶活性测定新方法,其特征在于通过显色法测定UDP‑葡萄糖依赖糖基转移酶偶联蔗糖合酶的双酶反应体系中生成的果糖,以表征糖基转移酶的活性。本发明公开了一种新的基于颜色反应的UDP‑葡萄糖依赖糖基转移酶的筛选方法,为糖基转移酶的改造和发掘提供了一种初步活性筛选工具,也为UDP‑葡萄糖依赖糖基转移酶的活性表征提供了新的方法。
  • 一种TaqDNA聚合酶活性测定方法-201911416831.6
  • 张坤晓;聂尚海;燕东平 - 莫纳(武汉)生物科技有限公司
  • 2019-12-31 - 2023-07-28 - C12Q1/48
  • 本发明提供了一种Taq DNA聚合酶活性测定方法,所述方法包括如下步骤:(1)以不同浓度lambda为标准品加入核酸染料,记录荧光值,得到lambda标准品浓度与荧光值的标准曲线;(2)记录不同稀释倍数的Taq DNA聚合酶在不同时间点下得到的净荧光值,计算聚合反应新生成的双链DNA量;(3)绘制同一时间点合成产物量与1/酶稀释倍数线性关系曲线;(4)Taq DNA聚合酶原酶活性计算。通过对同一时间点合成产物量与1/酶稀释倍数线性关系的推演,计算得到Taq DNA聚合酶活性,本发明的方法测定精确、反应快速、重复性好。
  • 一种SAM含量的高通量检测方法及其应用-202210992276.7
  • 刘珞;曹晨琦 - 北京化工大学
  • 2022-08-18 - 2023-07-07 - C12Q1/48
  • 本发明公开了一种SAM含量的高通量检测方法及其应用,属于生物技术领域。本发明在含有SAM的待测液中加入预混液进行反应,反应结束后再加入甘氨酸氧化酶检测液进行反应,检测反应产物中过氧化氢生成量,得到SAM含量;通过甘氨酸/肌氨酸N‑甲基转移酶和甘氨酸氧化酶的联用,可以在96微孔板上精准检测0~2mM范围内SAM含量,所述方法检测准确,显色范围合适,其他因素影响小。本发明成功将该方法应用于SAM合成酶的高通量筛选,以野生型SAM合成酶为模板,筛选到几个SAM积累量更高的突变体,可用于SAM合成酶的工业化生产。
  • 一种Bst DNA聚合酶活性的检测方法及其试剂盒-202310357964.0
  • 马耀争;晋莲;钟芳林;潘超;杨小岚;蒋如飞 - 武汉纳磁生物科技有限公司
  • 2023-04-06 - 2023-06-06 - C12Q1/48
  • 本发明公开了一种Bst DNA聚合酶活性检测方法及其试剂盒,其包括以下步骤:利用Bst DNA聚合酶进行等温扩增,绘制Bst DNA聚合酶标准品酶量与扩增产物双链DNA对应的扩增曲线线性增长期内单位时间最大荧光增量的标准曲线,通过检测Bst DNA聚合酶待测样品扩增产物在线性增长期内单位时间最大荧光增量,根据标准曲线计算待测样品的酶活。该检测方法绘制的标准曲线为线性曲线,R2在0.99以上,检测酶活范围更广,而且在检测酶活在10‑80U范围检测准确性高、重复性好且操作简便,能够快速准确测定Bst DNA聚合酶活性。
  • 一种聚合酶封闭活性测定方法-202310272270.7
  • 张帆;徐文正;魏迎东 - 江苏华抗生物科技有限公司
  • 2023-03-21 - 2023-05-26 - C12Q1/48
  • 本发明涉及聚合酶技术领域,且公开了一种聚合酶封闭活性测定方法,使用容易获得的天然单链M13噬菌体基因组作为模板,减少操作步骤,M13模板容易获得和提取,检测方法简便,可用于其他聚合酶等检测;其中1、3条引物都能进行qPCR,引物M13‑gVIII‑R扩增效果较好,实验组2用于检测聚合酶抗体封闭性效果较好。通过检测40℃和60℃,可见封闭差异。
  • 一种检测组蛋白乙酰转移酶的传感器及制备方法-201911128275.2
  • 李金龙;程文婷;胡亮;易永祥;许传军;胡凯;张兆利 - 南京市第二医院;南京鼓楼医院
  • 2019-11-18 - 2023-05-26 - C12Q1/48
  • 组蛋白乙酰转移酶(HAT)在肿瘤发生发展过程中发挥了重要的作用,因此本发明构建了一种利用降低G‑Quadruplex‑Cu(II)金属酶活性的电化学方法来检测组蛋白乙酰转移酶。G‑Quadruplex‑Cu(II)有金属酶活性,能够产生很强的电化学信号,在有HAT存在的情况下,HAT能够催化底物肽乙酰化,产生大量的乙酰辅酶A,由于G‑Quadruplex和乙酰辅酶A竞争性结合Cu(II),使电化学信号减弱,从而可以直接定量检测HAT,利用该法可以使HAT的检出限达到0.14nM。另外,本发明设计的检测方法因其不需要标记和使用抗体,仅仅使用价廉的DNA和Cu2+,从而大大降低了成本,更重要的是,电化学法操作简单,不需要复杂的修饰过程。
  • 一种检测逆转录酶活性的试剂盒及检测方法-202211426136.X
  • 刘想;阳瑜红;宋东亮 - 翌圣生物科技(上海)股份有限公司
  • 2022-11-14 - 2023-05-05 - C12Q1/48
  • 本发明公开了一种检测逆转录酶活性的试剂盒及检测方法,所述试剂盒包括具有poly(A)尾的RNA、dNTPs和Oligo dT。本发明创造性地设计了一种包括带poly(A)尾的模板RNA、dNTPs和Oligo dT的检测逆转录酶活性的试剂盒,带poly(A)尾的模板RNA在逆转录酶作用下,逆转录生成大量cDNA,并伴随着大量焦磷酸的产生,在一定范围内逆转录酶的活性与反应体系中焦磷酸的量成正比,通过检测反应体系中焦磷酸的量能够检测逆转录酶的活性,实现了方便简单、快速、高灵敏度和准确性地测定逆转录酶活性,能够用于高通量筛选,有利于广泛推广应用。
  • 一种NAMPT酶活性的生物发光检测组合物、试剂盒以及检测方法-202111273573.8
  • 王沛;於邱黎阳 - 深圳先进技术研究院
  • 2021-10-29 - 2023-05-05 - C12Q1/48
  • 本发明提供了一种NAMPT酶活性的生物发光检测组合物、试剂盒以及检测方法,具体公开了一种NAMPT酶活性的生物发光检测组合物,所述生物发光检测组合物包含NAM、PRPP、ATP、NMNAT、NAD+生物发光探针和对应的生物发光探针底物。还公开了NAMPT酶活性的生物发光检测方法,其包含采用上述生物发光检测组合物或试剂盒对待检测样品进行发光强度检测,并计算NAD+浓度利用线性回归确定反应体系中的NAD+生成速率,即NAMPT酶活性。本发明实现了NAMPT酶活性检测体系中NAD+浓度的直接、实时、无干扰测量,能够直接检测未经纯化的生理样本。
  • 一种检测DNA甲基化转移酶的纳米金生物传感器、其检测方法及应用-202010831729.9
  • 张春阳;王黎娟;韩笑 - 山东师范大学
  • 2020-08-18 - 2023-05-05 - C12Q1/48
  • 本发明属于DNA甲基化转移酶检测技术领域,具体涉及一种检测DNA甲基化转移酶的纳米金生物传感器、其检测方法及应用。本发明的方法可以同时检测多种DNA甲基化转移酶,并且该方法特异性好,灵敏度高。本发明使用甲基介导的核酸内切酶GlaI来切割的5‑甲基胞嘧啶(5‑mC)的特异性位点,并且将单分子检测与信号探针的循环裂解相结合,可用于单分子水平上同时检测多种DNA甲基化转移酶;进一步还可以用于区分不同种类的DNA甲基化转移酶,筛选潜在的抑制剂,并可测量人血清样品中DNA甲基化转移酶的活性,在生物医学研究,临床诊断,药物发现和癌症治疗方面具有巨大的潜力。
  • 聚合酶反应性催化核酸纳米结构-202180039078.2
  • 邵慧琳;陈渊;N·R·孙达;何瑞原 - 新加坡国立大学;新加坡科技研究局
  • 2021-04-07 - 2023-04-25 - C12Q1/48
  • 本发明涉及对聚合酶活性有反应的信号传导催化核酸纳米结构、其使用方法、包含其的装置和试剂盒。更具体地,本发明提供了一种催化信号传导纳米结构,其包含DNA酶/RNA酶如G‑四链hemin和聚合酶反应元件。所述聚合酶反应元件的聚合酶延伸消除所述DNA酶/RNA酶的催化活性。所述催化核酸纳米结构可以在集成电路中单独使用或与可将分子信号转换为聚合酶活性的靶标识别纳米结构配对使用。
  • 一种增强己糖激酶酶活性的方法-202310279367.0
  • 张远;张伯平;刘佳龙;谢芳 - 深圳市安帝宝科技有限公司
  • 2023-03-22 - 2023-04-21 - C12Q1/48
  • 本发明属体外诊断技术领域,具体来说是提供了一种增强己糖激酶酶活性的方法,其特征是,在含有己糖激酶的液体试剂中添加N‑甲基‑3,4‑二甲氧基苄胺和3,4‑二甲氧基苯乙醇中的一种,其含量为0.01‑0.03wt%,能达到增加己糖激酶酶活性目的。本发明所提供的技术方案能应用于血清葡萄糖测定试剂盒、血清1,5‑脱水山梨醇测定试剂盒等体外诊断试剂盒中,有增加检测试剂线性范围、增强试剂盒抗干扰能力的作用,并能在一定程度上降低试剂盒中己糖激酶的使用量,降低生产成本。
专利分类
×

专利文献下载

说明:

1、专利原文基于中国国家知识产权局专利说明书;

2、支持发明专利 、实用新型专利、外观设计专利(升级中);

3、专利数据每周两次同步更新,支持Adobe PDF格式;

4、内容包括专利技术的结构示意图流程工艺图技术构造图

5、已全新升级为极速版,下载速度显著提升!欢迎使用!

请您登陆后,进行下载,点击【登陆】 【注册】

关于我们 寻求报道 投稿须知 广告合作 版权声明 网站地图 友情链接 企业标识 联系我们

钻瓜专利网在线咨询

400-8765-105周一至周五 9:00-18:00

咨询在线客服咨询在线客服
tel code back_top