[发明专利]一种USP8突变的小鼠动物模型的构建方法及其应用在审
| 申请号： | 202110263099.4 | 申请日： | 2021-03-11 |
| 公开（公告）号： | CN113005147A | 公开（公告）日： | 2021-06-22 |
| 发明（设计）人： | 王海军;朱永红;朱迪敏 | 申请（专利权）人： | 中山大学附属第一医院 |
| 主分类号： | C12N15/85 | 分类号： | C12N15/85;C12N15/57;A01K67/027 |
| 代理公司： | 广州粤弘专利代理事务所(普通合伙) 44492 | 代理人： | 马腾飞 |
| 地址： | 510080 广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明提供一种USP8突变的ACTH腺瘤小鼠动物模型的构建方法及其应用，方法包括：根据基因序列设计sgRNA，构建基因打靶载体peSpCas9‑sgRNA并筛选出活性较高的sgRNA；设计含T7启动子的引物分别扩增eSpCas9及前述活性较高的sgRNA并回收纯化，体外转录试剂盒将eSpCas9、sgRNA分别转录成mRNA；同时，根据靶位点确定供体序列，体外合成Donor DNA oligos；将上述试剂共注射至小鼠受精卵，移植假孕鼠后，获得F0代小鼠；F0小鼠离乳后1周左右剪鼠尾，试剂盒提取基因组DNA，设计特异性引物PCR扩增靶位点附近DNA片段，PCR产物送样测序，获得阳性小鼠。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 usp8 突变 小鼠 动物 模型 构建 方法 及其 应用 | ||
【主权项】：
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