[发明专利]一种高产单鼠李糖脂的基因改造方法及其应用

摘要

本发明公开了一种高产单鼠李糖脂的基因改造方法，其特征在于：根据铜绿假单胞菌的rhlC基因序列设计PCR引物，PCR产物纯化后克隆到pMD系列T simple载体中构建pMD‑rhlC，酶切rhlC基因序列内部，构建目标基因内部序列缺失的质粒pMD‑∆rhlC，通过双酶切将∆rhlC片段插入到质粒pK18mobSacB中构建打靶质粒pK18‑∆rhlC，导入铜绿假单胞菌内，经筛选压力作用发生二次同源重组，获得敲除rhlC基因的铜绿假单胞菌敲除株，敲除菌株发酵验证产生的单鼠李糖脂。本发明在鼠李糖脂的发酵生产和开发利用方面具有应用价值。