[发明专利]利用枯草芽孢杆菌和核酸内切酶制备人碱性成纤维细胞生长因子

摘要

本发明涉及利用枯草芽孢杆菌和核酸内切酶制备人碱性成纤维细胞生长因子。具体而言，本发明提供一种核酸构建体，其包含插入物，所述插入物从5’端到3’端包含编码短肽亲和标签、来源于鱼腥藻属(Anabaena sp.)的反式剪接内含肽、以及外源多肽的多核甘酸序列，其中所述短肽亲和标签作为所述反式剪接内含肽的N‑端外显肽，并且所述外源多肽作为所述反式剪接内含肽的C‑端外显肽。本发明还提供了包含该构建体的表达载体以及宿主细胞，以及一种产生和纯化外源蛋白的方法。通过本发明的表达系统和方法，能够显著提高具有生物活性的外源蛋白的表达效率，减少包涵体的产生，简化了纯化步骤，大幅度降低纯化成本，特别适合规模化培养使用。