[发明专利]一种仅基于化学试剂的新型基因克隆方法在审
| 申请号： | 201911377752.9 | 申请日： | 2019-12-27 |
| 公开（公告）号： | CN111455030A | 公开（公告）日： | 2020-07-28 |
| 发明（设计）人： | 袁慧;田文齐 | 申请（专利权）人： | 苏州博睐恒生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/686 | 分类号： | C12Q1/686 |
| 代理公司： | 苏州言思嘉信专利代理事务所(普通合伙) 32385 | 代理人： | 刘巍 |
| 地址： | 215000 江苏省苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种仅基于化学试剂的新型基因克隆方法，包括步骤为：用硫代化学修饰的引物扩增目标基因和质粒载体；将目标基因扩增产物和质粒载体扩增产物进行碘酒热处理；碘酒处理使得DNA双链末端形成10‑25个核苷酸长度的3’‑单链DNA，将碘酒热处理后的目标基因DNA片段与质粒载体DNA片段在常温或4度杂交配对，目标基因与质粒载体的3’‑单链DNA间彼此配对后形成含目标基因的带缺口重组质粒；所述含目标基因的带缺口重组质粒转化大肠杆菌，修复重组质粒中的缺口，形成含目标基因的完整重组质粒。通过上述方式，本发明采用最优的硫代修饰与单链末端长度控制策略，使得含有目标基因的阳性克隆率显著提高，且操作通量大，适宜于多个目标基因同时克隆。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 基于 化学试剂 新型 基因 克隆 方法 | ||
【主权项】：
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