[发明专利]一种新型甲型肝炎病毒抗原制备方法在审
申请号: | 201910938891.8 | 申请日: | 2019-09-30 |
公开(公告)号: | CN110669739A | 公开(公告)日: | 2020-01-10 |
发明(设计)人: | 岳立广;徐艳玲;刘令九;夏青娟;王艺博;张宏丽;任琦;付艳杰;李丽莉;王春雨 | 申请(专利权)人: | 长春生物制品研究所有限责任公司 |
主分类号: | C12N7/00 | 分类号: | C12N7/00;C07K14/10;C12R1/93 |
代理公司: | 11369 北京远大卓悦知识产权代理事务所(普通合伙) | 代理人: | 许小东 |
地址: | 130000 吉林*** | 国省代码: | 吉林;22 |
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摘要: | 本发明公开了一种新型甲型肝炎病毒抗原制备方法,包括如下步骤:步骤一、将保藏编号为CCTCC No.V92004的甲型肝炎病毒毒种L‑A‑1减毒株培养上清中含有的HAV经克隆纯化筛选的得到L‑A‑1M株;步骤二、将所述L‑A‑1M株接种于人胚肺二倍体细胞,置培养液中培养,10~17天换维持液一次,收集上清液、换维持液、留取样品,共收集培养上清液5次;步骤三、第5次上清液收集后,用胰蛋白酶消化后,用1/5维持液量的Hank’s液收集含有甲型肝炎病毒的病毒收获物;步骤四、将所述病毒收获物经处理后得到所述甲型肝炎病毒抗原。 | ||
搜索关键词: | 维持液 甲型肝炎病毒抗原 甲型肝炎病毒 病毒收获 培养液 人胚肺二倍体细胞 胰蛋白酶消化 培养上清液 上清液收集 保藏 减毒株 上清液 毒种 制备 接种 克隆 筛选 | ||
【主权项】:
1.一种新型甲型肝炎病毒抗原制备方法,其特征在于,包括:/n步骤一、将保藏编号为CCTCC No.V92004的甲型肝炎病毒毒种L-A-1减毒株培养上清中含有的HAV经克隆纯化筛选的得到L-A-1M株;/n步骤二、将所述L-A-1M株接种于人胚肺二倍体细胞,置培养液中培养,10~17天换维持液一次,收集上清液、换维持液、留取样品,共收集培养上清液5次;/n步骤三、第5次上清液收集后,用胰蛋白酶消化后,用1/5维持液量的Hank’s液收集含有甲型肝炎病毒的病毒收获物;/n步骤四、将所述病毒收获物经处理后得到所述甲型肝炎病毒抗原。/n
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