[发明专利]检测盐酸雷尼替丁、西咪替丁、法莫替丁、尼扎替丁、拉呋替丁的方法

摘要

本发明公开了一种检测盐酸雷尼替丁、西咪替丁、法莫替丁、尼扎替丁、拉呋替丁的方法，包括：（1）选择色谱条件，（2）、选择质谱条件，（3）、标准溶液的制备，（4）、样品制备，（5）、检测及计算。经验证，本法快速、专属性强，适用于对健胃、改善胃肠功能（对胃粘膜损伤有辅助保护作用）、对胃粘膜损伤有辅助保护功能类中成药和保健食品，或其它非法宣称此类功能的食品中非法添加盐酸雷尼替丁、法莫替丁、拉呋替丁、尼扎替丁、西咪替丁等化学药物进行检测。

主权项

1.一种检测盐酸雷尼替丁、西咪替丁、法莫替丁、尼扎替丁、拉呋替丁的方法，其特征在于：包括如下步骤：（1）选择色谱条件色谱柱：C18柱，2mm×100mm，2.2μm或性能相当的色谱柱；柱温：40℃；流动相：以甲醇‑乙酸铵溶液为流动相进行梯度洗脱；A：甲醇，B：10mmol/L乙酸铵溶液，流速：0.3~0.5mL/min，进样量：1μL；梯度洗脱程序如下：时间：0~1min，流动相A：25%，流动相B：75%；时间：1~4min，流动相A：25%至80%，流动相B：75%至20%；时间：4~7min，流动相A：80%，流动相B：20%；时间：7~7.1min，流动相A：80%至25%，流动相B：20%至75%；时间：7.1~10min，流动相A：25%，流动相B：75%；（2）、选择质谱条件离子源：电喷雾离子源（ESI）；雾化气流速 3L/min；加热气流速 10L/min；干燥气流速 10L/min；接口温度 300℃；喷雾电压 4000V；扫描方式：ESI+；检测方式：MRM；化合物定性、定量离子和质谱分析参数如下：Ⅰ、盐酸雷尼替丁：母离子315.05m/z；子离子176.00m/z作为定量离子和碰撞能量19v，子离子130.00m/z和碰撞能量26v；电离方式ESI+；Ⅱ、法莫替丁：母离子337.95m/z；子离子189.00m/z作为定量离子和碰撞能量21v，子离子259.10m/z和碰撞能量13v；电离方式ESI+；Ⅲ、拉呋替丁：母离子432.20m/z；子离子193.05m/z作为定量离子和碰撞能量29v，子离子351.10m/z和碰撞能量19v；电离方式ESI+；Ⅳ、尼扎替丁：母离子332.00m/z；子离子232.10m/z和碰撞能量18v，子离子155.00m/z作为定量离子和碰撞能量21v；电离方式ESI+；Ⅴ、西咪替丁：母离子253.15m/z；子离子159.00m/z作为定量离子和碰撞能量16v，子离子117.00m/z和碰撞能量17v；电离方式ESI+；（3）、标准溶液的制备精密称定盐酸雷尼替丁、西咪替丁、法莫替丁、尼扎替丁、拉呋替丁5种对照品25mg分别至5个25mL棕色容量瓶中，加入17mL甲醇溶解并定容，得到浓度为1mg/mL的储备液备用；取上述对照品储备液各0.05mL至10mL的容量瓶中，甲醇稀释至刻度，得浓度为5μg/mL的混合标准溶液；分别取5μg/mL的混合标准溶液0.02mL、0.05mL、0.10mL至10mL的容量瓶中，甲醇稀释至刻度，得浓度为10ng/mL、25ng/mL、50ng/mL的混合标准溶液；取浓度约为50ng/mL的混合标准溶液，甲醇稀释，制得不同浓度的对照品溶液作为标准溶液；（4）、样品制备精密称定样品1.0g，置于10mL容量瓶中，加甲醇6mL，超声提取15min，冷至室温，用甲醇定容至刻度，过滤膜，取续滤液作为待测液；（5）、检测及计算5.1、定性测定在相同试验条件下测定样品和标准溶液，记录样品和标准溶液中各化合物的保留时间，当样品中出现与某标准品溶液保留时间一致的色谱峰即变化范围在±2.5%，并且样品色谱图中所选择的监测离子对的相对丰度比与浓度相当的标准溶液中相应离子对的相对丰度比（k）的偏差不超过如下规定，则确定样品中检出相应化合物；定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差如下：k>50%，最大允许偏差为±20%；50%≥k>20%，最大允许偏差为±25%；20%≥k>10%，最大允许偏差为±30%；k≤10%，最大允许偏差为±50%；5.2、定量测定样品中检出相应化合物，以不同浓度的对照品溶液定量离子对的峰面积为纵坐标，浓度为横坐标，制作标准曲线，将样品峰面积带入，计算样品中各组分的浓度；计算待测物的含量，即含量=浓度×定容体积×稀释倍数÷称样量。