[发明专利]一种高效精准靶向的基因整合系统及其应用有效
| 申请号： | 201910628110.5 | 申请日： | 2019-07-12 |
| 公开（公告）号： | CN110305908B | 公开（公告）日： | 2021-08-20 |
| 发明（设计）人： | 荣知立;林瑛;马淑凤;王新龙;吕杰;刘成芳 | 申请（专利权）人： | 南方医科大学 |
| 主分类号： | C12N15/90 | 分类号： | C12N15/90;C12N15/85 |
| 代理公司： | 北京市诚辉律师事务所 11430 | 代理人： | 范盈 |
| 地址： | 510515 广东省广州*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种高效精准靶向的基因整合系统及其应用，系统包括表达外源性融合蛋白系统、向导RNA和供体载体；表达外源性融合蛋白系统包括Cas9或SB或Cas9与SB、N123、N57、SB100XE279D其中之一组成的融合蛋白；向导RNA为靶向基因组区域和供体载体两端的20bp的长序列；供体载体两端有向导RNA靶向位点、SB结合位点和中间的目的基因整合片段。本发明可同时实现基因的靶向、切割和整合；本发明利用SB转座酶结合转座子供体形成四聚体，可使供体载体定向到靶位点，更有利于基因的靶向整合；本发明利用体内线性化元件，可使供体载体体内线性化，更有利于基因的整合；本发明实现基因敲入的方法是基于SB转座酶和基因修复机制中的NHEJ，这将使本发明更加高效的实现基因的整合。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 高效 精准 靶向 基因 整合 系统 及其 应用 | ||
【主权项】：
1.一种高效精准靶向的基因整合系统，其特征在于，包括表达外源性融合蛋白系统、一种向导RNA和供体载体；所述表达外源性融合蛋白系统包括Cas9或SB或Cas9与SB、N123、N57、SB100XE279D其中之一组成的融合蛋白；所述向导RNA为靶向基因组区域和供体载体两端的20bp的长序列；所述供体载体两端分别均有向导RNA靶向位点、SB结合位点和中间的目的基因整合片段。
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