[发明专利]一种双重gRNA的基因表达元件及其构建方法与应用在审
| 申请号： | 201910606977.0 | 申请日： | 2019-07-06 |
| 公开（公告）号： | CN110331170A | 公开（公告）日： | 2019-10-15 |
| 发明（设计）人： | 徐峰;蒋凤娟;沈小鹏;朱国萍;吴深;张静宜;李蒙 | 申请（专利权）人： | 安徽师范大学 |
| 主分类号： | C12N15/90 | 分类号： | C12N15/90;C12N15/85 |
| 代理公司： | 北京风雅颂专利代理有限公司 11403 | 代理人： | 马骁 |
| 地址： | 241000*** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种双重gRNA的基因表达元件及其构建方法与应用，涉及gRNA基因工程技术领域，双重gRNA的基因表达元件包括如下结构：多克隆酶切位点I‑U6启动子‑gRNA特异性序列1‑结构序列‑中间连接序列‑U6启动子‑gRNA特异性序列2‑结构序列‑多克隆酶切位点III，设计的双重gRNA全套基因表达元件两端各有一处多克隆酶切位点，这些酶切位点方便之后与表达载体进行连接，且表达载体不受限制，因此可以将此双重gRNA全套基因表达元件直接连接到Cas9核酸酶表达载体中，以进一步提高转染效率与基因编辑的成功率，中间存在多克隆酶切位点，可利用这些酶切位点将双重gRNA系统“拆分成”两个单gRNA系统，由此构建各种动物模型。 | ||
| 搜索关键词： | 基因表达元件 多克隆酶切位点 表达载体 构建 特异性序列 结构序列 基因工程技术 动物模型 酶切位点 中间连接 转染效率 核酸酶 受限制 酶切 成功率 应用 基因 | ||
【主权项】：
1.一种双重gRNA的基因表达元件，其特征在于，包括如下结构：多克隆酶切位点I‑U6启动子‑gRNA特异性序列1‑结构序列‑中间连接序列‑U6启动子‑gRNA特异性序列2‑结构序列‑多克隆酶切位点III。
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