[发明专利]一种牙髓干细胞制备方法有效
| 申请号： | 201910606448.0 | 申请日： | 2019-07-05 |
| 公开（公告）号： | CN110468098A | 公开（公告）日： | 2019-11-19 |
| 发明（设计）人： | 张彦茹;黄宇;唐雯 | 申请（专利权）人： | 北京中瑞联合生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/0775 | 分类号： | C12N5/0775 |
| 代理公司： | 11210 北京纽乐康知识产权代理事务所(普通合伙) | 代理人： | 刘艳艳<国际申请>=<国际公布>=<进入 |
| 地址： | 100096 北京市昌平区回*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种牙髓干细胞制备方法,包括如下步骤：牙髓的运输，取乳牙放入取样瓶中，把取样瓶及医用冰袋放回运输箱中运回实验室；牙髓干细胞的分离，用镊子夹住牙齿冠部，再用注射器吸取生理盐水从牙根断面向里吹打牙髓腔，冲洗松动牙髓；使用拔髓针取出牙髓；牙髓干细胞的扩增培养，取完全培养基，重悬牙髓沉淀，并转移到12孔板中；用一个拔髓针固定牙髓，用另一个拔髓针上的倒钩剥离牙髓，使牙髓形成细小碎片，释放其中的细胞，然后培养。该制备方法使用拔髓针对凝聚的牙髓进行剥离,释放其中的干细胞，避免使用胶原酶酶等对牙髓干细胞的损伤，可以排除消化过程对牙髓干细胞的损伤，使牙髓干细胞提取成功率达到100%，应用简单方便。 | ||
| 搜索关键词： | 牙髓 牙髓干细胞 拔髓针 取样瓶 制备 损伤 剥离 牙根 完全培养基 方法使用 扩增培养 生理盐水 细小碎片 医用冰袋 释放 干细胞 胶原酶 镊子夹 牙髓腔 运输箱 吹打 注射器 倒钩 放入 冠部 孔板 重悬 成功率 冲洗 松动 沉淀 牙齿 取出 细胞 消化 凝聚 应用 运输 | ||
【主权项】：
1.一种牙髓干细胞制备方法，其特征在于，包括如下步骤：/n（1）牙髓的运输，把牙髓干细胞的运输箱交于供者，供者接收到运输箱后，把运输箱中的取样瓶放至冷藏冰箱，医用冰袋放至冷冻冰箱，供者乳牙自行脱落后，采取乳牙放入取样瓶中，把取样瓶及医用冰袋放回运输箱中，24小时内运回实验室；/n（2）牙髓干细胞的分离，把乳牙从取样瓶取出，用生理盐水清洗乳牙后，用镊子夹住牙齿冠部，再用注射器吸取生理盐水从牙根断面向里吹打牙髓腔，冲洗松动牙髓；使用拔髓针从牙根断处插入牙髓腔中，慢慢拧动，向外轻拉，取出牙髓，放至离心管中，用注射器重新吸取生理盐水，冲洗牙髓腔一次，收集两次冲洗牙髓腔的生理盐水加入放置牙髓的离心管中，离心去除生理盐水，收集牙髓；/n（3）牙髓干细胞的扩增培养，取完全培养基，重悬牙髓沉淀，并转移到12孔板中；用一个拔髓针固定牙髓，用另一个拔髓针上的倒钩剥离牙髓，使牙髓形成细小碎片，释放其中的细胞，然后放在37℃、5％ CO2、饱和湿度条件下培养。/n
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