[发明专利]一种CRISPR/Cas基因编辑系统及其制备方法和应用有效
| 申请号： | 201910441537.4 | 申请日： | 2019-05-24 |
| 公开（公告）号： | CN110117622B | 公开（公告）日： | 2021-05-11 |
| 发明（设计）人： | 李和刚;秦怀远;赵金山;辛京京;张宁;郝小静 | 申请（专利权）人： | 青岛农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/90 | 分类号： | C12N15/90;C12N15/85 |
| 代理公司： | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人： | 董大媛 |
| 地址： | 266000 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种CRISPR/Cas基因编辑系统及其制备方法和应用，属于基因编辑技术领域，所述CRISPR/Cas基因编辑系统包括pcDNA3.1‑LjCas9质粒和pLjCas9‑sgRNA质粒。所述应用包括以下步骤：确定靶标序列，设计单链寡核苷酸对；退火获得双链DNA片段；连接到pLjCas9‑sgRNA质粒中获得靶标序列sgRNA表达载体；靶标序列sgRNA表达载体与pcDNA3.1‑LjCas9质粒共转染细胞后培养。所述基因编辑系统能够对靶标DNA进行特异性切割，编辑效率高。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 crispr cas 基因 编辑 系统 及其 制备 方法 应用 | ||
【主权项】：
1.一种CRISPR/Cas基因编辑系统，其特征在于，包括pcDNA3.1‑LjCas9质粒和pLjCas9‑sgRNA质粒；所述pcDNA3.1‑LjCas9质粒包括初始质粒pcDNA3.1(+)和编码LjCas9的DNA片段；所述pLjCas9‑sgRNA质粒包括初始质粒pUC57和sgRNA通用表达框DNA片段。
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