[发明专利]一种从东北岩高兰中提取、分离纯化5种查耳酮的方法

摘要

本发明涉及一种从东北岩高兰中提取、分离纯化5种查尔酮的方法，以东北岩高兰全草为原料，经过下述步骤：（1）提取；（2）高效液相色谱分离分析；（3）大孔吸附树脂富集；（4）半制备型高效液相色谱分离纯化；（5）化合物的纯度检测及结构鉴定。用半制备型高效液相色谱法进行分离纯化，流动相为甲醇‑水梯度洗脱，得到5种高纯度的成分，经核磁共振波谱鉴定分别是：2’,4’,β‑三羟基二氢查耳酮、2’‑甲氧基‑4’‑羟基二氢查耳酮、2’,4’‑二羟基二氢查耳酮、岩高兰素A及岩高兰素B。本工艺过程绿色环保，对环境无严重危害，综合成本低。

主权项

1.一种从东北岩高兰中提取、分离纯化5种查耳酮的方法,其特征是，步骤为：（1）查耳酮的提取：将东北岩高兰全草粉碎，用有机溶剂进行提取，过滤，提取液经减压浓缩得粗提物；（2）查耳酮的分离分析：用分析型高效液相色谱仪对粗提物的组成进行分离分析，色谱柱为C₁₈柱（250×4.6 mm I.D., 5 μm），流动相为甲醇‑水梯度洗脱（甲醇：0‑25分钟，67%；25‑35分钟，67%‑90%），流速为1.0 mL/min，检测波长为280 nm，柱温为室温；（3）查耳酮的富集：用AB‑8型大孔吸附树脂对粗提物中的查耳酮进行富集，首先用20%乙醇‑水溶液洗脱5个柱体积以除去杂质，再用95%乙醇‑水溶液洗脱5个柱体积将查耳酮洗脱下来；（4）查耳酮的分离纯化：用半制备型高效液相色谱仪对富集后的查耳酮进行分离纯化，色谱柱为C₁₈柱（250×25.4 mm I.D., 10 μm），流动相为甲醇‑水梯度洗脱（0‑30分钟，65%甲醇；30‑40分钟，85%甲醇），检测波长为280 nm，柱温为室温；根据色谱图手动收集目标组分馏分，减压浓缩除去溶剂；（5）化合物的纯度检测及结构鉴定：将每一个目标组分馏分经减压浓缩后用甲醇溶解，其纯度用高效液相色谱法进行检测，色谱条件见步骤（2）；经核磁共振波谱分析5种化合物分别是：2’, 4’,β‑三羟基二氢查耳酮、2’‑甲氧基‑4’‑羟基二氢查耳酮、2’, 4’‑二羟基二氢查耳酮、岩高兰素A及岩高兰素B。