[发明专利]一种DEHP降解菌剂制备及其有效降低蔬菜生产中DEHP污染的方法

摘要

本发明公开了一种DEHP降解菌剂制备及其有效降低蔬菜生产中DEHP污染的方法，所述菌剂是将红球菌Rhodococcus sp.2G活化后进行发酵培养，再将发酵液在离心，收集菌体，菌体加入保护剂后进行预冻，预冻好的菌体进行真空冷冻干燥，获得DEHP降解菌冻干菌剂。在受DEHP污染土壤的农田中投加一定比例的上述菌剂，实现土壤中DEHP的去除同时减少种植蔬菜中DEHP的累积量，通过投加DEHP降解菌剂并实现降解菌在蔬菜根际定殖，可有效降低污染土壤及种植蔬菜中的DEHP残留量，该方法在进行农田DEHP污染土壤修复的同时进行农产品安全生产，即“边生产边修复”的理念，具有处理效率高、成本低和无二次污染等优点，在农田土壤有机污染防治中具有重要的应用前景。

主权项

1.一种DEHP降解菌剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：S1.菌悬液制备：将红球菌Rhodococcus sp.2G种子液接种于发酵培养基中，控制发酵温度为26～29℃，pH为7.0～7.5，接种量OD₆₀₀＝0.5～0.7，发酵培养10h～15h；再于4℃，6000～7000r/min离心10～12min收集菌体，弃去上清液，无菌水洗涤后，再次离心去上清，获得菌泥；将菌泥与冻干保护剂按照体积比为1:1～3进行混合，制备成菌悬液；S2.冻干菌剂的制备：将制备好的菌悬液按照12～14mL装液量分装于无菌的75mm的培养皿中，放入‑20℃的冰箱中进行预冻，冻结完全后将其放入温度为‑75℃的冷阱中继续预冻，3h后取出进行冻干，冻干时间为16～18h，即得DEHP降解菌剂；其中，步骤S1所述冻干保护剂由以下体积百分比的各组分组成：甘油10％，脱脂乳10％，山梨醇15％，无菌水65％。