[发明专利]一种采用离体叶片接种玉米灰斑病和发病的方法在审
| 申请号： | 201811545301.7 | 申请日： | 2018-12-17 |
| 公开（公告）号： | CN109439551A | 公开（公告）日： | 2019-03-08 |
| 发明（设计）人： | 谢宗宜 | 申请（专利权）人： | 靖西市秀美边城农业科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N1/14 | 分类号： | C12N1/14;C12R1/645 |
| 代理公司： | 北京天奇智新知识产权代理有限公司 11340 | 代理人： | 牙斐颖 |
| 地址： | 533800 广西壮族自治区*** | 国省代码： | 广西;45 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种植物灰斑病人工接种发病领域，特别涉及一种采用离体叶片接种玉米灰斑病和发病的方法，本申请的步骤如下:(1)培育感病玉米植株；(2)培养接种用病原菌；(3)选取离体叶片；(4)接种离体叶片；(5)保湿培养叶片。该方法操作简单，在室内就能完成，不受季节限制，占用场地少，效率高，重现性好，有效解决了灰斑病人工接种难成活、发病条件难把控、发病率不高的问题，有效的缩短了从接种到发病的时间，有助于灰斑病抗病性的快速鉴定，应用价值大。 | ||
| 搜索关键词： | 接种 离体叶片 玉米灰斑病 灰斑 病原菌 抗病性 保湿培养 发病条件 季节限制 快速鉴定 培养接种 有效解决 玉米植株 灰斑病 种植物 重现性 叶片 发病率 成活 室内 占用 培育 申请 应用 | ||
【主权项】：
1.一种采用离体叶片接种玉米灰斑病和发病的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：(1)培育感病玉米植株：选择玉米灰斑病感病品种种植于花盆中，常规水肥管理，得到灰斑病易感植株；(2)培养接种用病原菌：将从田间采集灰斑病感病叶片接种到含烟酰胺的玉米芯高粱粒粉培养基上，放置于温度为25℃～28℃的人工培养箱中培养5d～7d。(3)采集离体叶片：从步骤(1)盆栽的灰斑病易感植株中取新鲜干净无病害叶片，装于内放有冰袋或干冰盒子中，4℃带回室内；(4)接种离体叶片：离体叶片用剪刀剪成长约3cm，用小刀或钢珠在叶片小块上轻划或轻轻摩擦制造微伤口，伤口以只损伤表皮为准，挑取1cm长的正方形菌丝琼脂块，菌丝朝下紧贴放在离体叶片伤口上；(5)保湿培养叶片：每天用保湿液均匀喷洒步骤(4)接种的离体叶片，离体叶片放入培养基中，于人工气候培养箱中连续培养10d～15d。
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