[发明专利]一种在油松下胚轴中进行基因瞬时表达的方法在审

专利信息
申请号: 201811496734.8 申请日: 2018-12-07
公开(公告)号: CN109402167A 公开(公告)日: 2019-03-01
发明(设计)人: 马晶晶;钮世辉;李悦;李伟;刘双委 申请(专利权)人: 北京林业大学
主分类号: C12N15/82 分类号: C12N15/82
代理公司: 北京众合诚成知识产权代理有限公司 11246 代理人: 苗艳荣
地址: 100083 *** 国省代码: 北京;11
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摘要: 发明公开了一种在油松下胚轴中实现基因瞬时表达的方法,包括以下步骤:1)油松下胚轴的预处理;2)油松下胚轴组织预侵染的农杆菌菌液培养和处理;3)将下胚轴组织浸泡于导入了35S:Gus基因序列的农杆菌侵染溶液;4)超声波处理组织实现基因转入;5)下胚轴组织侵染后的继续培养。本发明建立的基因瞬时表达方法能够较高效地实现基因在油松下胚轴中表达,操作简单且结果可靠,可为油松基因功能验证和调控关系研究提供技术支持。
搜索关键词: 胚轴 瞬时表达 基因 下胚轴组织 侵染 预处理 基因功能验证 超声波处理 农杆菌菌液 农杆菌侵染 调控关系 技术支持 胚轴组织 油松 浸泡 转入 研究
【主权项】:
1.一种在油松下胚轴中进行基因瞬时表达的方法,其特征在于,包括以下步骤:1)油松下胚轴的预处理;2)油松下胚轴组织预侵染的农杆菌菌液培养;3)制备侵染溶液;4)将1)中得到的下胚轴组织浸没于3)中得到的包含农杆菌和表面活性剂的侵染溶液中,使用的农杆菌转入了35S:Gus基因;5)用超声波处理4)中的溶液,将Gus基因转入下胚轴细胞;6)下胚轴组织侵染后再培养,实现Gus基因的瞬时过量表达。
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