[发明专利]一种通过基因枪转化快速培养甘蔗抗性植株的方法

摘要

本发明提供一种通过基因枪转化快速培养甘蔗抗性植株的方法，具体涉及一种甘蔗愈伤组织受体处理的方法，包括以下步骤：1)准备甘蔗胚性愈伤组织；2)制备基因枪转化甘蔗愈伤组织受体；3)基因枪转化：将步骤2)获得的甘蔗愈伤组织受体，用装载有DNA微弹的基因枪轰击，对轰击后的愈伤组织进行培养；4)抗性筛选，再生培养。本发明将甘蔗愈伤组织机械处理成小块，平铺在滤膜上作为受体材料，通过基因枪介导转化，经过抗性筛选和再生，获得转基因甘蔗。制备转基因受体的效率高，易操作，能够大大降低制备劳动，节省时间。

主权项

1.一种通过基因枪转化快速培养甘蔗抗性植株的方法，其特征在于，包括以下步骤：1)胚性愈伤组织制备：对诱导得到的甘蔗愈伤组织在胚性诱导培养基上进行胚性诱导，得到胚性愈伤组织；所述胚性诱导培养基为在MS培养基基础上，添加3～3.5mg/L 2,4‑D、1～1.5mg/L KT、30～35g/L蔗糖和5.5～6.5g/L琼脂粉，再调节PH至5.8～6.0；2)基因枪转化甘蔗愈伤组织受体制备：将步骤1)获得的胚性愈伤组织转移固定在支持物上，得到甘蔗愈伤组织受体；3)基因枪转化：将步骤2)获得的甘蔗愈伤组织受体转移到高渗培养基上暗培养，得到轰击前愈伤组织；按照基因枪转化流程轰击轰击前愈伤组织，再将轰击后愈伤组织置于高渗培养基中继续暗培养后，整体转移到继代培养基上恢复培养，得愈伤组织材料，步骤3)中，所述高渗培养基为在MS培养基基础上，添加0.2～0.3mol/L Sorbitol、0.2～0.3mol/L Mannitol、3～3.5mg/L 2,4‑D、30～35g/L蔗糖以及5.5～6.5g/L琼脂粉，再调节pH至5.8～6.0；步骤3)中，所述继代培养基为在MS培养基基础上，添加3～3.5mg/L 2,4‑D、30～35g/L蔗糖以及5.5～6.5g/L琼脂粉，再调节pH至5.8～6.0；4)抗性筛选与再生：对愈伤组织材料进行抗性筛选，再生培养，得到甘蔗抗性植株。