[发明专利]一种水稻柱头长度的测量方法

摘要

本发明公开了一种水稻柱头长度测量的方法。该方法包括以下步骤：水稻颖花取样的时期(盛花期)—测量工具体式显微镜焦距的矫正与标尺的拍照—水稻柱头的剥离与拍照—柱头长度的测量—数据处理。利用本方法进行柱头长度调查，其柱头长度的表型数据人为因素影响小、准确度高。通过本方法调查的柱头长度性状，可用于长柱头有利基因的挖掘、精细定位、克隆乃至功能分析；同时利用发掘的长柱头基因改良水稻不育系，增加水稻不育系的柱头长度，从而提高水稻柱头外露率，增加制种产量。

主权项

1.一种水稻柱头长度测量的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：（1）取样：将水稻试验材料种植于试验田中，待试验材料处于盛花期时，用眼科镊子（带齿）从主茎穗（最高穗）上夹住正在开放的颖花基部（不要触碰到颖壳，以免破坏柱头），取下将其装入事先准备好的盛有1.5ml清水的离心管中，每份材料取8朵颖花，带回实验室当天测量；（2）调焦：打开连接电脑带有摄像头（MDX4，广州市明美光电技术有限公司）的体式显微镜（MZ11，广州市明美光电技术有限公司）及其软件（明美显微数码测量分析系统V1.3.10.8），将带刻度的标尺置于体式显微镜载物台上，调节焦距，直到标尺上面的刻度清晰可见，拍照保存，此后焦距不再调整；（3）剥花、拍照：将保存于离心管中的8朵颖花取出放在2.5cm*7.5cm的载玻片上，拨出一朵颖花，左手用VETUS镊子（18cm）压住内颖边缘，右手用VETUS镊子（14cm）将其外颖剥离，露出柱头，从花柱处用镊子将柱头与颖壳夹断，再用镊子将2个柱头拨直，使其与花柱之间呈一定的角度（150°左右），以此类推，8朵花16个柱头作2排排列于载玻片上，每排4朵；将剥好柱头的载玻片置于体式显微镜的载物台上，点击“拍照—保存”，以备测量；（4）测量：打开明美显微数码测量分析系统，点击“文件—打开图像到测量—打开标尺—插入单位标尺—设置参数—拍照保存”，再次点击“文件—打开图像到测量—打开待测柱头长度的照片—插入线段—逐一测量柱头长度—导出EXCEL文档—保存”，即完成测量；（5）数据处理：导出到EXCEL表中16个柱头长度的均值即为该材料的柱头长度。