[发明专利]一种测定疏血通注射液中次黄嘌呤含量的方法

摘要

本发明涉及一种测定疏血通注射液中次黄嘌呤含量的方法，在待测疏血通注射液中加入6‑巯基嘌呤内标溶液和次黄嘌呤标准品溶液配制成加标样品，采用液质联用法，进行多反应监测MRM扫描，以加标次黄嘌呤终浓度X为横坐标，目标分析物与内标的峰面积比值Y为纵坐标，进行线性回归，获得回归方程；然后在待测疏血通注射液中加入6‑巯基嘌呤内标溶液，采用液质联用法，进行多反应监测MRM扫描，获得目标分析物与内标的峰面积比值，根据上述回归方程获得疏血通注射液中次黄嘌呤含量。本发明建立的检测方法，可快速、准确的检测疏血通注射液中次黄嘌呤的含量，有效减小基质效应的干扰。

主权项

1.一种测定疏血通注射液中次黄嘌呤含量的方法，其特征在于，包括：步骤一，配制6‑巯基嘌呤内标溶液和一系列次黄嘌呤标准品溶液；步骤二，在待测疏血通注射液中加入6‑巯基嘌呤内标溶液和次黄嘌呤标准品溶液配制成加标样品，采用液质联用法，进行多反应监测MRM扫描，以加标次黄嘌呤终浓度X为横坐标，目标分析物与内标的峰面积比值Y为纵坐标，进行线性回归，获得回归方程；步骤三，在待测疏血通注射液中加入6‑巯基嘌呤内标溶液，采用液质联用法，进行多反应监测MRM扫描，获得目标分析物与内标的峰面积比值，根据上述回归方程获得疏血通注射液中次黄嘌呤含量；步骤二和步骤三中，液相色谱条件为：分析柱为Waters Acquity UPLC BEH C18(100mm×2.1mm,1.7μm)，保护柱为Waters Acquity UPLC BEH C18(5mm×2.1mm,1.7μm)，流动相A相为甲醇，B相为0.1％甲酸水溶液，梯度洗脱，流速为0.3ml/min，柱温为40℃，进样量为2μl；质谱检测条件为：电喷雾负离子ESI(‑)检测模式；毛细管电压(Capillary)：0.5KV；锥孔电压(Cone)：30V；喷雾气压力(Nebuliser)：7psi；脱溶剂气温度(Desolvation Temp)：400℃；脱溶剂气流量(Desolvation Gas Flow)：800L·h‑1；锥孔气流量(Cone Gas Flow)：150L·h‑1，碰撞气氩气流量(Collision Gas Flow)：0.25ml·min‑1；多反应监测MRM扫描方法的参数如下：次黄嘌呤：母离子质量数(Q1)：134.9；子离子质量数(Q3)：92.0；驻留时间(Dewll Time)：0.129s；锥孔电压(Cone Voltage)：30V；碰撞能量(Collision Energy)：12V；6‑巯基嘌呤：母离子质量数(Q1)：151.0；子离子质量数(Q3)：92.1；驻留时间(Dewll Time)：0.129s；锥孔电压(Cone Voltage)：56V；碰撞能量(Collision Energy)：16V。