[发明专利]一种生产米黑根毛霉脂肪酶mRML酶粉的工程菌株及其构建方法在审

专利信息
申请号: 201811092260.0 申请日: 2018-09-19
公开(公告)号: CN110923259A 公开(公告)日: 2020-03-27
发明(设计)人: 黄金金;陈凌霄;赵庆伊;郑维发 申请(专利权)人: 江苏师范大学
主分类号: C12N15/81 分类号: C12N15/81;C12N15/55;C12N1/19;C12R1/84
代理公司: 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 代理人: 周敏
地址: 221000 江*** 国省代码: 江苏;32
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摘要: 一种生产米黑根毛霉(Rhizomucor miehei)脂肪酶mRML酶粉的工程菌株及其构建方法,将含前导肽的脂肪酶基因mrml插入到巴斯德毕赤酵母表达载体pPICZα+Mα上构建得到含目的基因的表达载体pPICZαA‑mrml,将含有目的基因的表达载体转到巴斯德毕赤酵母X‑33中并筛选获得含mrml基因的能够表达mRML的工程菌zα‑mRML‑X33。将上述工程菌株进行摇瓶发酵,胞外酶活为98U/mL。将该菌株产生的发酵液用丙酮制备酶粉,当发酵液pH调整到5.0‑7.0,丙酮和发酵液的体积比为2:1时,酶活回收率保持在70%以上。当发酵液pH为7.0时,酶回收率最高,获得酶粉的重量为1.373g,酶粉的比活为3367U/g,酶粉的回收率为94.4%。为该酶的储存、运输和使用提供新的方式。
搜索关键词: 一种 生产 根毛 脂肪酶 mrml 工程 菌株 及其 构建 方法
【主权项】:
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