[发明专利]一种基于过表达tfox基因的自然感受态的基因编辑方法及其应用在审
申请号: | 201811060129.6 | 申请日: | 2018-09-12 |
公开(公告)号: | CN110129351A | 公开(公告)日: | 2019-08-16 |
发明(设计)人: | 刘智;胡俊 | 申请(专利权)人: | 华中科技大学鄂州工业技术研究院;华中科技大学 |
主分类号: | C12N15/74 | 分类号: | C12N15/74;C12N15/66;C12R1/63 |
代理公司: | 上海精晟知识产权代理有限公司 31253 | 代理人: | 熊娴;冯子玲 |
地址: | 436044 湖北*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 本发明公开了一种基于过表达tfox基因的自然感受态的基因编辑方法及其应用,所述基因编辑方法将带有tfox基因的质粒转化至弧菌内,诱导弧菌自然感受态后进行基因编辑,其中基因编辑采用重叠延伸PCR的方法插入抗性基因对弧菌的待编辑基因进行编辑。本发明采用过表达诱导自然感受态的关键基因tfox,引起弧菌自然感受态的产生,进而仅通过直接外源添加同源遗传片段达到特定基因编辑的目的。本方法操作简单、原理通用,编辑过程用时短,可以快速将弧菌诱导至自然感受态,并进行需要的基因编辑,具有良好的推广价值。通过本发明的方法诱导的河流弧菌和霍乱弧菌,均处于自然感受态,是良好的外源DNA受体。 | ||
搜索关键词: | 基因 感受态 弧菌 诱导 重叠延伸PCR 关键基因 河流弧菌 霍乱弧菌 抗性基因 遗传片段 质粒转化 外源DNA 外源 用时 同源 应用 通用 | ||
【主权项】:
1.一种基于过表达tfox基因的自然感受态的基因编辑方法,其特征在于:所述基因编辑方法将带有tfox基因的质粒转化至弧菌内,诱导弧菌自然感受态后进行基因编辑,其中基因编辑采用重叠延伸PCR的方法插入抗性基因对弧菌的待编辑基因进行编辑。
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