[发明专利]一种熊去氧胆酸的酶法合成方法在审
| 申请号： | 201810992886.0 | 申请日： | 2018-08-29 |
| 公开（公告）号： | CN108866141A | 公开（公告）日： | 2018-11-23 |
| 发明（设计）人： | 黄清东;张翔;向世明;宋立波;杜烨;彭捷;刘金凤 | 申请（专利权）人： | 四川百特芳华医药科技有限公司 |
| 主分类号： | C12P33/00 | 分类号： | C12P33/00 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 610000 四川省成都市温江区成都海峡两岸科技产*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | 本发明公开的是一种熊去氧胆酸的酶法合成方法，解决了现有技术中采用鹅去氧胆酸制备熊去氧胆酸时，在氧化还原过程中常常出现同时氧化3位羟基的情况，导致收率和纯度不高的问题。本发明包括步骤1，制成如式一所示的7‑KLCA；步骤2，将7‑KLCA加入到磷酸缓冲液中制成反应液，在反应液中加入L‑苹果酸钠、苹果酸脱氢酶、7‑β类固醇脱氢酶，控制反应温度在25～30℃、反应pH为7.0～7.5条件下，反应直到7‑KLCA残留低于0.1％，反应完成后，加碱升温到60～80℃搅拌1～3小时，然后降温至常温，过滤，滤液加酸结晶得到熊去氧胆酸。本发明具有收率和纯度高，生产成本低等优点。 | ||
| 搜索关键词： | 熊去氧胆酸 酶法合成 收率 类固醇脱氢酶 苹果酸脱氢酶 鹅去氧胆酸 磷酸缓冲液 加酸结晶 苹果酸钠 氧化还原 反应pH 加碱 制备 生产成本 过滤 残留 | ||
【主权项】：
1.一种熊去氧胆酸的酶法合成方法，其特征在于，包括：步骤1，制成如式一所示的7‑KLCA；式一： ![]()
步骤2，将7‑KLCA加入到磷酸缓冲液中制成反应液，在反应液中加入L‑苹果酸钠、苹果酸脱氢酶、7‑β类固醇脱氢酶，控制反应温度在25～30℃、反应pH为7.0～7.5条件下，反应直到7‑KLCA残留低于0.1％，反应完成后，加碱升温到60～80℃搅拌1～3小时，然后降温至常温，过滤，滤液加酸结晶得到熊去氧胆酸；其中，步骤1的具体制备步骤包括：步骤1.1，将鹅去氧胆酸溶于甲醇溶剂中制成混合溶液，向混合溶液中加入溴化钠配置成电解体系；步骤1.2，将电解体系加入到石墨电极的无隔膜电解槽中，持续通电10～12h获得氧化产物，无隔膜电解槽中电流为3～5A，反应温度为‑5～5℃；步骤1.3，向氧化产物中滴加稀硫酸溶液，反应30min以上，反应温度为20～60℃；反应产生的气体伸入到NaOH溶液中与NaOH溶液反应制成溴化钠；步骤1.4，提纯制成7‑KLCA。
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