[发明专利]草豆蔻中桤木酮的含量测定方法

摘要

本发明属于中药质量控制领域，尤其涉及一种采用GC/MS法测定草豆蔻中桤木酮含量的方法。本发明采用的气相色谱串联质谱(GC/MS)技术是利用气相色谱进行有机物的分离，并由串联质谱完成待测物的定性和定量分析。本发明相比于以往分析方法，具有高选择性、线性范围大、高灵敏度、高准确度与精密度、分析时间短、样品处理步骤简单、等优点，适用于桤木酮含量差异较大的食品、药品质量分析，可为含桤木酮的食品、药材质量评价研究及草豆蔻的药典改进提供全新的检测方法，同时也可为桤木酮的体内分析研究提供技术参考。

主权项

1.一种草豆蔻中桤木酮的含量测定方法，其特征在于，具体包括以下步骤：(1)供试品溶液的制备：分别称取3批草豆蔻干燥药材，用粉碎机粉碎(过3号筛)，得药材细粉末，置密封袋于干燥器中保存备用。精密称取药材细粉约1.0g，放入已知重量的250ml锥形瓶中，依次精密加入甲醇溶剂(分析纯)100ml和咖啡因内标储备液5ml，称重，记录溶剂总重量，盖紧瓶塞并用锡箔纸和封口膜包裹，置于超声清洗器中超声30min，放冷称重，用甲醇溶剂补足损失重量，过滤，取溶剂总体积一半的续滤液置于旋蒸瓶中，于45℃旋蒸挥干溶剂，用甲醇复溶，用有机系0.22μm微孔滤膜过滤，取滤液置50ml容量瓶中定容，即得供试品溶液；(2)对照品及内标储备溶液的制备：分别称取桤木酮对照品约0.02g和咖啡因标准品(内标)约0.02g，精密称定，置100ml烧杯中，加甲醇(色谱纯)20ml溶解，置50ml容量瓶加甲醇(色谱纯)定容，即得对照品储备溶液(394.0g/ml)和内标储备溶液(388.0g/ml)；(3)GC‑MS条件：GC条件：SH‑Rxi‑5Sil MS色谱柱(30m×0.25mm×0.25μm，日本岛津公司)；程序升温，起始温度100℃，保持3min，以30℃/min升至260℃，保持6min，再以10℃/min升至280℃，保持6min；载气(He)总流速20mL/min，柱流速2.35ml/min，压力165.7kPa；分流比30:1；进样口温度250℃；进样体积1μl；MS条件：接口温度270℃；电子轰击(EI)离子源；电子能量70eV；离子源温度200℃；溶剂切除时间2.5min；数据采集方式SIM模式，SIM条件为“分组1：采集时间9～12min；每个质量数扫描时间0.2s；质量数选择194、109、165。分组2：采集时间14～18min；每个质量数扫描时间0.2s；质量数选择262、171、157、128”；(4)建立回归方程：精密量取对照品储备液适量，甲醇稀释，分别加入等量内标溶液，得到一系列浓度的含等量内标的对照品溶液，最终稀释倍数分别为对照品储备液的4、8、10、16、20、40、80和160倍(均含19.4μg/ml咖啡因)，进样体积1μl；以对照品与咖啡因峰面积比值(Y)为纵坐标，对照品溶液的进样量(X)为横坐标，建立回归方程；(5)试样中桤木酮的含量测定：将试样进样，根据样品的峰面积，代入上述回归方程，分别计算得出试样中桤木酮的含量。